본 연구는 백지 에탄올추출물의 항산화 활성을 알아보기 위하여 총 포리페놀 함량, 총 플라보노이드 함량, 전자공여능을 독립적으로 3회 이상 반복 실시하여 측정 하였고, brown guinea pig(450~500g)의 등 부위에 1500mJ/$cm^2$ 광량의 자외선 조사로 유발시킨 피부(6areas per group)에 1일 2회, 주 5일, 매회 $30{\mu}{\ell}$씩 총 5주간 시료를 도포한 후 염산 케타민으로 마취, 시료를 도포한 피부 부위를 직경12mm의 biopsy punch로 절취하여 10%의 중성 포르말린 용액에 12시간 실온에서 고정한 후 Hematoxylin and eosin(H&E) 염색으로 표피 및 진 조직을 관찰하였다. 백지 에탄올추출물의 총 폴리페놀 함량과 총 플라보노이드 함량을 측정한 결과, 각각 20.7mg/g, 19.5mg/g으로 확인되어 항산화물질 함량이 양호하게 나타났다. 전자공여능을 측정한 결과, 백지 에탄올추출물은 농도가 증가함에 따라 전자공여능 또한 유의하게 증가하였고, $500{\mu}g/m{\ell}$과 $1000{\mu}g/m{\ell}$농도에서 각각 14.8%, 19.8%의 전자공여능을 보여 양성대조군으로 사용한 Dibutylated hydroxytoluene(BHT)보다 공여능이 낮았으나 의미 있는 항산화 효과를 보였다. H&E 염색 결과, 대조군의 표피에서 경미한 비후도가 나타났으나, 백지 에탄올추출물 도포군은 피부조직 배열이 규칙적이며 염증관련 세포 침윤 등의 별다른 이상 징후는 발견되지 않았다. 이상의 결과를 종합하면 백지 에탄올추출물은 천연 항산화제로서 이용가치가 있을 것으로 판단된다.
Objectives : This study was carried out to know the effects of Danggwisayeokgaohsuyusaenggang-tang(hereinafter referred to DST) on arthritis induced by collagen on DBA/1 OlaHsd mice. Methods : For this purpose, DST was orally administered to mouse with arthritis induced by collagen II. Cytotoxicity, high performance liquid chromatograph(HPLC) analysis, arthritis index, value of immunocyte in draining lymph node and paw joint, cytokine were measured in vivo. Results : 1. The cytotoxicity against human fibroblast cells(hFCs) was not measured in any concentration. 2. In HPLC analysis, There are high peak patterns at 8 minute(min), 12 min, 35 min, 45 min. 3. The arthritis index was decreased significantly. 4. The degree of arthritis induced damage of joint of DST group is slight compared with control group in histopathologic observation(Hematoxylin and eosin stain(H&E), Masson's trichrome(M-T) staining). 5. In total cell counts of draining lymph node(DLN) and paw joint, the cells in DLN decreased significantly on DST 200 mg/kg and the cells in paw joint decreased significantly on 200 mg/kg and 50 mg/kg. 6. In DLN, $CD4^+/CD25^+$, $CD3^+/CD69^+$, major histocompatibility complex(MHC), class-II/$CD11c^+$ cells decreased significantly on DST 200 mg/kg and 50 mg/kg $CD3^+/CD8^+$ cells decreased significantly on DST 200 200 mg/kg, $CD4^+$, $CD3^+/CD44^+$ cells decreased. 7. In paw joints, $CD4^+$, $CD11b^+/Gr-1^+$ cells decreased significantly on DST 200 mg/kg and 50 mg/kg. 8. In joints, levels of $IL-1{\beta}$, IL-6, $TNF-{\alpha}$, cyclo-oxygenase-2(COX-2), NOS-II were decreased on DST 200 mg/kg and DST 50 mg/kg. 9. In analysing of cytokine in CD3/CD28 activated spleen, IL-17 was decreased significantly, IL-4 was increased significantly $INF-{\gamma}$ was decreased on DST 200 mg/kg. 10. In analysing of cytokine in collagen activated spleen, IL-17 were decreased significantly, IL-4 was increased significantly. Conclusions : This results demonstrated that DST suppressed the inflammatory progression of collagen-induced arthritis(CIA) mice and supported further studies are required to survey continuously in looking for the effective substance and mechanism in the future.
멸종위기야생동식물 1급으로 지정된 꼬치동자개, Pseudobagrus brevicorpus의 종복원을 위해 인위적인 교배를 통하여 획득한 자치어를 대상으로 성분화 과정을 조사하여 성적임성 여부를 확인하였다. 부화 후 4~5일째 자어에서 생식융기 1쌍이 장과 중신관 사이에서 관찰되었고, 그 후 유사분열이 활발히 진행되었다. 부화 후 20일째 치어에서 난원세포의 출현으로 난소 분화가 시작되었으며, 부화 후 30~40일째를 거치면서 염색인기와 주변인기의 난모세포로 성장하였다. 난황은 부화 후 80일째의 자어에서 생성되기 시작하였고, 부화 후 100일째가 되어 eosin에 염색되는 난황구가 생성되었다. 이후 난모세포는 난황이 지속적으로 축적되면서 세포의 크기와 수가 증가하기 시작하였고, 부화 후 약 10개월째에는 난막과 여포세포층에 의해 둘러싸여진 난모세포로 분화하였다. 한편 정소는 부화 후 25일경 치어에서 분화되기 시작하였고, 40일경 유사분열을 통해 정원세포를 둘러싸는 포낭을 형성하였다. 부화 후 100일째가 되면 정소는 정소엽 구조를 형성하였고 hematoxylin에 매우 진하게 염색되는 정모세포로 분화하였다. 부화 후 7개월째 치어의 정소엽 내부에 정세포가 출현한 이후, 부화 후 만 1년을 경과한 치어에서 최초로 성숙한 정자가 출현하였다. 위 결과를 바탕으로 인공적으로 부화된 꼬치동자개 자치어의 성분화는 다른 종에서 보이는 것과 같이 정상적인 발달을 보인다고 판단되었다.
To verify the effects of JAUN-1, which is a water-extracted herbal mixture, on gastroenteric disorders induced by 0.1 percent of iodoacetamide (IA) in rats. We divided four groups, $Na{\"{\i}}ve$ + Distilled Water (DW), 0.1% IA + DW, 0.1% IA + Proton pump inhibitor (Lansoprazole, 5 mg/kg) and 0.1% IA + Herbal mixture (JAUN-1, 50mg/kg) and performed following experimental methods to confirm its advantageous effects against ulcerogenic stomach in rats induced by 0.1% IA; cell cytotoxicity, analysis of lesions score, Hematoxylin & Eosin (H&E) stain, RT-PCR for ${\beta}-actin$, COX-1 and COX-2 and evaluation of intestinal prokinetic activity. No cytotoxicity was elucidated at the concentration of 1, 5, 10, 50, 100, $500\;{\mu}g/ml$ and 1mg/ml JAUN-1 through MTT Assay using by human stomach epithelial AGS cells, respectively. In addition, the JAUN-1 treated group and the lansoprazole treated group significantly decreased in lesions score compared to the DW treated group in the gastritis induced rat model, and results of immunohistochemistry by H&E staining showed that histological recovery in Proton Pump Inhibitor (PPI) and JAUN-1 treated groups rather than the DW administrated group. Another outcome was that ${\beta}-actin$ relative COX-2 expression level was significantly promoted in the DW treated group while ${\beta}-actin$ relative COX-1 expression level was no meaningful change in this rat model. Finally, intestinal prokinetic activity was recovered from low level of prokinetic activity due to 0.1% IA induced gastritis to the similar level of Normal group. These results suggested that JAUN-1 may have beneficial effects against 0.1% IA-induced gastritis rat model through decreasing lesions score, histological recovery, ${\beta}-actin$ relative COX-1, 2 expression level and prokinetic activity.
이 연구는 화상이 유발된 mouse에 사이클로덱스트린/폴리에틸렌이민/실크 피브로인이 함유된 수화겔을 처치하여 화상 치유효능을 평가한 실험이다. 상처치유 효능을 갖는 것으로 알려진 silk fibroin (SF)을 함유한 polyethyleneimine (PEI)/${\beta}$-cyclodextrin (${\beta}CD$) conjugate를 epichlorohydrin (EPI)로 가교시켜 ${\beta}CD/PEI/SF$ 수화겔을 제조하였고, 이를 화상이 유발된 mouse에 처치하여 일반 거즈만 처치한 음성대조군과 상용화되어 있는 상처치유 제품(OTC)을 처치한 양성대조군과 비교해 시간에 따른 화상치유 경과를 지켜보았다. 약물이 로딩되지 않은 ${\beta}CD/PEI/SF$ 수화겔과 약물이 로딩된 ${\beta}CD/PEI/SF$ 수화겔을 처치한 동물 실험군의 화상치유경과는 육안으로 관찰 시, 음성대조군과 비교했을 때에 큰 차이가 없었고 오히려 상처가 악화되는 경향을 보였다. 반면 OTC 연고를 처치한 양성대조군에서는 상처의 크기가 눈에 띄게 줄어들었다. H&E staining을 통하여 진피 층에서의 상피재생을 확인한 결과 또한 ${\beta}CD/PEI/SF$ 수화겔의 화상치유에 대한 효능이 뚜렷하게 나타나지 않았다.
궤양성 대장염은 면역학적인 이상과 유전적인 요소에 의해 대장의 점막 또는 점막밑층에 염증을 유발하는 질환이다. 이전 연구에 의하면, 비만은 궤양성 대장염의 유병률을 높이고, 진행을 악화시키는 것으로 보고되었다. 따라서 본 연구에서는 커큐민이 비만에 의한 대장염의 진행을 억제하는지에 대해 조사하였다. 비만을 유도하기 위해 고지방 식이로 마우스를 사육하였고, 커큐민의 염증억제 효과를 확인하기 위해 고지방 식이와 함께 커큐민을 섭취시켰다. 궤양성 대장염을 유도하기 위해서 DSS를 경구투여 하고 대장염의 임상 증상을 관찰하였다. 대장염의 진행을 확인하기 위해 질병활성지수와 결장의 길이를 측정하였다. 커큐민에 의한 대장염 완화를 조직학적으로 평가하기 위해 결장, 간, 복부지방의 조직표본을 제작하고 H&E 및 Alcian blue-PAS 염색법으로 분석하였다. 커큐민은 질병활성지수의 점수를 감소시키고, 결장의 길이가 짧아지는 것을 억제하는 것으로 확인하였다. 또한, 비만으로 악화된 궤양성 대장염의 결장 조직에서 염증세포 침윤과 점막손상을 억제하였다. 커큐민은 간의 지방증과 복부지방의 지방세포를 유의하게 감소시키는 것으로 확인하였다. 결론적으로 커큐민은 비만에 의한 대장염의 진행을 억제함으로써 궤양성 대장염을 치료할 수 있는 치료제로서 활용될 것으로 사료된다.
Objectives This study was designed to evaluate the healing effect of Cordyceps Militaris (CM) on collagen II-induced arthritis rats. Methods Sprague-Dawley rats were randomly divided into 6 groups (normal, control, positive control, CM with low/medium/high dosage each). Type II collagen mixed with complete Freund's adjuvant (with 1:1 v/v) was injected subcutaneously, and the mixture was injected in a same manner one week after the first injection to boost arthritis. Arthritis index, paw thickness and von Frey test were conducted to observe physical changes. hematoxylin and eosin (H&E) staining was performed to observe knee cartilage. The levels of messenger RNA (mRNA) expressions of interleukin (IL)-1𝛽, IL-6, tumor necrosis factor-alpha (TNF-𝛼) in spleen were assessed by real-time polymerase chain reaction. Results Rheumatoid arthritis is an autoimmune disease that occurs on multiple joints and can lead to temporary shape change of bones or organ failure in severe cases. Here, we aimed to determine the effect of CM extract on rheumatoid arthritis by measuring paw thickness, arthritis index, conducting von Frey test and H&E staining, and evaluating the level of IL-1𝛽, IL-6, TNF-𝛼. As a result, paw thickness, arthritis index significantly decreased in low concentration group, hind leg became less sensitive in all expermental groups. Also, histological analysis showed that the damage of knee cartilage was prevented in all experimental groups. The level of mRNA of IL-1𝛽, IL-6, and TNF-𝛼 in spleen was analyzed to decide the effectiveness of CM extract. IL-1𝛽 did not show significant change, but IL-6 and TNF-𝛼 showed significant decrease in at least one of the experimental groups. Conclusions CM showed protective effect on knee tissue destruction and improved the physical conditions of the leg involving arthritis. Also, it showed that CM has anti-inflammatory effect on specific cytokines inducing rheumatoid arthritis. In conclusion, this study demonstrated that the therapeutic potential of CM for the treatment rheumatoid arthritis, and set the foundation for the further studies.
실험에 사용한 플라나리아는 Dugesia japonia Ichikawa et Kawakatsu로서 核型分析에 의하여 種을 확인하였다. 이 種의 咽頭 및 腸을 구성하는 세포들의 세포화학적 및 미세구조적 특징을 밝히고자 본 실험을 行하였다. 세포화학적 방법으로는 hematoxylin-eosin, periodic acid-Schiff(PAS) 反應, alcian blue(pH 2.5), PAS-alcian blue 反應 그리고 methylene blue-basic fuchsin등으로 염색을 시행하고, 光學顯微鏡으로 관찰하였으며 또한 各部位의 微細構造를 透査電子顯微鏡으로 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 咽頭(pharynx) 內腔上皮는 遊離面에 미세융모를 가지고 있었다. 세포질에는 PAS반응에 양성을 나타내는 약 0.4$\\times$0.6 $\\mum$의 과립들이 있고, 小胞 및 液胞가 분화되어 있었다. 핵은 基底部 쪽으로 치우쳐져 있고 基底膜은 관찰되지 않았다. 咽頭外腔의 咽頭 측상피에서는 섬모와 미세융모가 발달되어 있었고 上皮內側에는 근육층이 발달되어 있었다. 咽頭外腔을 둘러싸는 壁側上皮細胞에서는 미세융모가 관찰되었고 세포질에는 전자밀도가 높은 과립들이 포함되어 있었다. 2. 腸(caeca) 腸上皮細胞는 食細胞와 顆粒性棍棒體細胞 그리고 이 세포들을 둘러싸고 있는 貯藏細胞와 幼若貯藏細胞로 구성되어 있었다. 1) 食細胞(phagocytic cell) 세포질에는 비교적 많은 lysosome을 포함하고 있었으며 無顆粒性小胞體와 mitochondria등의 細胞小器官도 잘 발달되어 있었다. 특히 無顆粒性小胞體의 cisternae는 대부분 팽윤되어 있었고 polyribosome도 풍부하게 관찰되었다. 2) 顆粒性棍棒體細胞(granular club cell) 세포질에는 PAS 반응에 강한 양성을 보이고 또 약한 eosinophilia도 나타내는 약 5 $\\mum$의 球形의 과립들을 포함하고 있었다. 특히 顆粒性小胞體가 잘 발달되어 있어TEk. 3) 貯藏細胞(storage cell) 세포질내에는 glycogen 과립들과 PAS에 각기 다른 정도의 양성반응을 보이는 다수의 中性多糖性 과립과 脂肪顆粒들이 포함되어 있었다. 4) 幼若貯藏細胞(immature storage cell) 세포질에는 PAS반응에 양성을 보이는 소수의 작은과립과 脂肪顆粒이 내포되어 있으며 세포질에 비하여 핵은 매우컸다. 핵막 주위의 세포질에서는 chromatoid body들이 관찰되었다.
Kim, Ko-Eun;Kim, Soo-Yong;Kim, Eun-Young;Kim, Bum-Hoi;Shin, Jung-Won;Lee, Hyun-Sam;Sohn, Young-Joo;Jung, Hyuk-Sang;Sohn, Nak-Won
Advances in Traditional Medicine
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제8권4호
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pp.430-439
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2008
Chungpaesagan-tang (CPSGT) is most frequently used to treat ischemic brain injury in tradition Korean medicine. Clinically, cerebral ischemia is likely to be accompanied by preexisting or complicating disease. However, animal models used to examine the effects of herbal medicines on cerebral ischemia have not given this issue sufficient consideration. The present study was undertaken to determine the effects of CPSGT on focal cerebral ischemia in normal and SHR rats subjected to transient middle cerebral artery occlusion (MCAO). Animals were divided into four groups: Normal (Sprague-Dawley) rats subjected to MACO (the NC+MCAO group), normal rats subjected to MCAO and then administered CPSGT (NC + MCAO + CP), SHR rats subjected to MCAO (SHR + MCAO), and SHR rats subjected to MCAO and then administered CPSGT (SHR + MCAO + CP). MCAO was performed using the intraluminal method. CPSGT was administrated orally twice (1 and 4 h) after MCAO. All animals were sacrificed at 24 h postoperatively. Brain tissues were stained with hematoxylin & eosin, to examine the effect of CPSGT on ischemic brain tissues. In addition, changes in TNF-$\alpha$ expression in ischemic areas were examined by immunostaining. CPSGT was found to significantly reduce infarction areas in normal and SHR rats and infarction volumes in SHR rats. Similarly, CPGST markedly increased neuron numbers and sizes in all treated groups, except cell sizes in SHRs. Furthermore, CPSGT reduced TNF-$\alpha$ expression in MCAO administered SHR rats. The findings of the present study suggest that CPSGT effectively ameliorates neuron damage caused by MACO-induced cerebral ischemia, and that it has a significant neuroprotective effect after cerebral ischemia in SHR.
Bang, Jihye;Lee, Ki Mo;Kim, Bu-Yeo;Lee, Jeong-Hwa;Lee, In Sun;Jeon, Won Kyung
대한한의학회지
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제34권2호
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pp.51-58
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2013
Objectives: The aim of this study was to examine the antithrombotic effects of the four herbal ingredients (Mume Fructus, MF; Santali Albi Lignum, SAL; Amomi Tsao-Ko Fructus, ATF; and Amomi Fructus, AF) of modified Jeho-tang (MJHT) in a ferric chloride ($FeCl_3$)-induced carotid arterial thrombosis model. Methods: Thirty minutes prior to a 35% $FeCl_3$ application, Sprague-Dawley (SD) rats were injected with saline, MF, SAL, ATF or AF (100 mg/kg, intraperitoneal injection), respectively. The effect of the MJHT ingredients was examined for time to occlusion (TTO) and thrombus weight (TW) in a $FeCl_3$-induced thrombosis model. Histological analysis was performed to examine the effect of the MJHT ingredients on collagen fiber damage using hematoxylin & eosin and Masson's trichrome staining. Results: Compared with vehicle treatment, MF, SAL and ATF treatment delayed TTO (vehicle, $8.11{\pm}0.60$ min; MF, $16.67{\pm}1.03$ min; SAL, $17.50{\pm}1.52$ min and ATF, $13.33{\pm}1.21$ min; P < 0.001) and inhibited thrombus formation (vehicle, $0.79{\pm}0.03$ mg/mm; MF, $0.61{\pm}0.07$ mg/mm; SAL, $0.57{\pm}0.03$ mg/mm and ATF, $0.72{\pm}0.02$ mg/mm; P < 0.001). In addition, each herbal ingredient of MJHT except for AF prevented the collagen fiber damage induced by a 35% $FeCl_3$ application. These results indicate that the MJHT ingredients MF ${\geq}$ SAL ${\geq}$ ATF ${\geq}$ AF possess antithrombotic activity in a $FeCl_3$-induced carotid arterial thrombosis. Conclusions: Altogether, these results are the first evidence that the MJHT ingredients MF, SAL and ATF have the ability to prevent vascular damage and thrombus formation in $FeCl_3$-induced carotid arterial thrombosis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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