Objective: This study investigated the expression of genes in cashmere goats at different periods of their fetal development. Methods: Bioinformatics analysis was used to evaluate data obtained by transcriptome sequencing of fetus skin samples collected from Inner Mongolia cashmere goats on days 45, 55, and 65 of fetal age. Results: We found that FoxN1, FoxE1, and FoxI3 genes of the Fox gene family were probably involved in the growth and development of the follicle and the formation of hair, which is consistent with previous findings. Real-time quantitative polymerase chain reaction detecting system and Western blot analysis were employed to study the relative differentially expressed genes FoxN1, FoxE1, and FoxI3 in the body skin of cashmere goat fetuses and adult individuals. Conclusion: This study provided new fundamental information for further investigation of the genes related to follicle development and exploration of their roles in hair follicle initiation, growth, and development.
It is difficult to obtain sufficient healthy skin for coverage of a wide area of skin wound. In the skin, an additional population of living epithelial cells is located in the outer root sheath (ORS) of hair $follicles.^{1),2)}$ ORS cells should be a good source of epithelium because they are easily obtainable and patients do not have to suffer from scar formation at donor sites. We modified ordinary primary culture technique for the purpose of solving such problem that epithelial cells have a low propagation and easy aging during culture periods. First of all, we improved primary cultivation methods. In the ordinary primary culture, average yield of human ORS cells was $2\;{\times}\;10^3$ cells/follicle by direct incubation with trypsin (0.1%)/EDTA (0.02%) solution for 15 min at $37^{\circ}C$ but we could obtain about $6.5\;{\times}\;10^3$ cells/follicle by two step enzyme digestion method with dispase (1.2 U/ml) and trypsin (0.1%)/EDTA (0.02%) solution. So we could achieve three times higher primary cultured ORS cell yield. Secondly, we could obtain total $2\;{\times}\;10^7$ cells in serum free medium and even more total $6\;{\times}\;10^7$ cells in modified E-medium with mitomycin C-treated feeder cells during 17 days. Using the cultured ORS cells, and we could make bioartificial skin equivalent in vitro and concluded that ORS cells were progenitor cells for skin epithelial cell.
Guanine nucleotide-binding protein subunit alpha-s ($Gn{\alpha}s$) is a small subunit of the G protein-couple signaling pathway, which is involved in the formation of coat color. The expression level and distribution of $Gn{\alpha}s$ were detected by quantitative real-time-polymerase chain reaction (qPCR), western blot, and immunohistochemistry to investigate the underlying mechanisms of coat color in white and black skin tissues of mice. qPCR and western blot results suggested that $Gn{\alpha}s$ was expressed at significantly higher levels in black mice compared with that of white mice, and transcripts and protein possessed the same expression in both colors. Immunohistochemistry demonstrated $Gn{\alpha}s$ staining in the root sheath and dermal papilla in hair follicle of mice skins. The results indicated that the $Gn{\alpha}s$ gene was expressed in both white and black skin tissues, and the expression level of $Gn{\alpha}s$ in the two types of color was different. Therefore, $Gn{\alpha}s$ may be involved in the coat color formation in mice.
Kim, Phill-soo;Kim, Hee-taek;Roh, Seok-sun;Hwang, Chung-yeon
The Journal of Korean Medicine Ophthalmology and Otolaryngology and Dermatology
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v.17
no.3
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pp.38-60
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2004
We made an experiment if the extracts of DanGuiBoHyulTangGami-Bang(DBTG) and 15 kinds of the medical herbs used the materials of DBTG were effective on the hair formation palpation and the falling out of hair, and came to the following conclusions. 1. The extracts of Paeonia lactiflora, Cuscuta chinensis and Angelica tenuissima of DBTG consisted of the 15 kinds of the medical herbs kept the activity of 5${\alpha}$-reductase type Ⅱ from being active 75.3$\%$, 63.8$\%$. 75.5$\%$. 2. The hair growth index, 1.6(control group 0.8) of the extracts of DBTG bas a little effect on the hair growth palpation and that of Rubus coreanus 1.8(control group 0.4) was the most effective one of the medical herbs, and Paeonia lactiflora 2.3(control group 1.7) and Vitex rotundifolia 2.3(control group 1.5) showed the effect on hair formation palpation. 3. The hair growth period couldn't be extended by DBTG in this experimental stage. 4. The 15 kinds of constitution medicines of DBTG didn't have effects in dermal papilla cells DNA increase, IGF- I, KGF, HGF the revelation of a gene heredity, the protein synthesis of the hair follicle tissues. 5. All of the 15 kinds of constitution medicines of DBTG didn't have the antibacterial activity in Paper disc rule. 6. The results from the test of a radical scavenging activity of the 15 kinds of constitution medicines of DBTG showed that the extracts of Paeoria lactiflora, Scutellaria baicalensis, Rubus coreanus have the superior antioxidant activity in the concentration of 0.01$\%$ and 0.001$\%$ 7. In the formation controlled experiment, Vitex rotundifolia (70.6$\%$), Scutellaria baicalensis (47.1$\%$, Saposhnikovia (44.8$\%$) of the 15 kinds of constitution medicines of DBTG in the 50㎍/㎖ concentration controled NO forming and Vitex rotundifolia (12.7$\%$) controled NO forming in the 5㎍/㎖ concentration in order. 8. MTT(lC/50) of the extracts of Rehmannia glutinosa, Paeonia lactiflora, Scutellaria baicalensis, Lycium chinense, Rubus coreanus of the 15 kinds of constitution medicines of DBIG was more than 500㎍/㎖ and had the least cell virulence.
Obtaining a sufficient amount of healthy keratinocytes from a small tissue is difficult. However, ORS cells can be a good source of epithelium since they are easily obtainable and patients do not have to suffer from scar formation at donor sites. Accordingly, the current study modified the conventional primary culture technique to overcome the low propagation and easy aging of epithelial cells during culturing. In a conventional primary culture, the average yield of human ORS tells is 2.↑ $\times$ 10$^3$cells/follicle based on direct incubation in a trypsin (0.1%)/EDTA(0.02%) solution for 15 min at 37$^{\circ}C$, however, our modified method was able to obtain about 6.9 $\times$ 10$^3$cel1s/follicle using a two-step enzyme digestion method involving dispase (1.2 U/mL) and a trypsin (0.1%)/EDTA (0.02%) solution. Thus, the yield of primary cultured ORS cells could be increasd three times higher. Furthermore, a total of 2.0 $\times$ 10$^{7}$ cells was obtained in a serum-free medium. while a modified E-medium with mitomycin C-treated feeder tells produced a total of 6.3 $\times$ 10$^{7}$ Cel1s over 17 days When Starting With 7.5 $\times$ 10$^4$cells. Finally, We Confirmed the effectiveness of our ORS tell isolation method by presenting their ability for reconstructing the bioartificial skin epithelium in vitro
Cell-based therapy is a promising approach in the field of regenerative medicine. As cells are formed into spheroids, their survival, functions, and engraftment in the transplanted site are significantly improved compared to single cell transplantation. To improve the therapeutic effect of cell spheroids even further, various biomaterials (e.g., nano- or microparticles, fibers, and hydrogels) have been developed for spheroid engineering. These biomaterials not only can control the overall spheroid formation (e.g., size, shape, aggregation speed, and degree of compaction), but also can regulate cell-to-cell and cell-to-matrix interactions in spheroids. Therefore, cell spheroids in synergy with biomaterials have recently emerged for cell-based regenerative therapy. Biomaterials-assisted spheroid engineering has been extensively studied for regeneration of bone or/and cartilage defects, critical limb ischemia, and myocardial infarction. Furthermore, it has been expanded to pancreas islets and hair follicle transplantation. This paper comprehensively reviews biomaterials-assisted spheroid engineering for regenerative therapy.
Zhihong Yin;Zhisheng Ma;Siting Wang;Shitong Hao;Xinyou Liu;Quanhai Pang;Xinzhuang Wang
Animal Bioscience
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v.36
no.9
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pp.1367-1375
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2023
Objective: Pigment production and distribution are controlled through multiple proteins, resulting in different coat color phenotypes of sheep. Methods: The expression distribution of vimentin (VIM) and transthyretin (TTR) in white and black sheep skins was detected by liquid chromatography-electrospray ionization tandem MS (LC-ESI-MS/MS), gene ontology (GO) statistics, immunohistochemistry, Western blot, and quantitative real time polymerase chain reaction (qRT-PCR) to evaluate their role in the coat color formation of sheep. Results: LC-ESI-MS/MS results showed VIM and TTR proteins in white and black skin tissues of sheep. Meanwhile, GO functional annotation analysis suggested that VIM and TTR proteins were mainly concentrated in cellular components and biological process, respectively. Further research confirmed that VIM and TTR proteins were expressed at significantly higher levels in black sheep skins than in white sheep skins by Western blot, respectively. Immunohistochemistry notably detected VIM and TTR in hair follicle, dermal papilla, and outer root sheath of white and black sheep skins. qRT-PCR results also revealed that the expression of VIM and TTR mRNAs was higher in black sheep skins than in white sheep skins. Conclusion: The expression of VIM and TTR were higher in black sheep skins than in white sheep skins and the transcription and translation were unanimous in this study. VIM and TTR proteins were expressed in hair follicles of white and black sheep skins. These results suggested that VIM and TTR were involved in the coat color formation of sheep.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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v.27
no.4
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pp.301-307
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2001
There have been many trials to decrease the scar formation followed by wound treatment. $TGF-{\beta}$ plays a important role on wound healing in adult. Therefore the repression of $TGF-{\beta}$ expression will be helpful to decrease scar formation. Decorin is known to competitively inhibit $TGF-{\beta}$ expression. Decorin were subcutaneously administered in surgical wounds in rabbits to investigate the preventing effect of scar formation for clinical application. Histologic findings of wound healing progresses is similar with control and experimental group at 2week. $2.5{\mu}g$ decorin of administrated group was similar to those of control group at 4 and 8week. In wound healing process $10{\mu}g$ decorin of administrated groupsat showed that thickness of immature collagen fibers(scar) was decreased as compared with control group at 4, 8 weeks. $20{\mu}g$ decorin of administrated group showed similar histologic features to $10{\mu}g$ administrated group. The wounds of 8week experimental group(10, $20{\mu}g$) were completely recovered to the normal surrounding skin tissue including sweat gland and hair follicle. These results suggested that decorin can be of help to the prevention of local scar formation.
Lee, Jae Yun;Park, Seo A;Woo, Won Hong;Mun, Yeun Ja
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.33
no.1
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pp.63-67
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2019
Interaction between epidermis and dermis plays an important role in wound healing and hair follicle formation. This study focused on investigating the potency of ethanol extract of Puerariae Radix (EPR) as cosmetic ingredient using human dermal fibroblasts (hDFn). Our results revealed that EPR suppressed collagenase activity dose-dependently. EPR inhibited activity of $5{\alpha}$-reductase I and II at the final concentration of $25{\mu}g/ml$ in hDFn cells. Also, EPR promoted the proliferation and the ERK activation of cells. ERK phosphorylation by EPR was blocked by specific inhibitor of ERK, PD98059. EPR-induced cell proliferation was blocked by PD98059. This means that EPR could promote the proliferation of hDFn cells via the activation ERK. Collectively, these results suggest that EPR may be used as a new cosmetic ingredient.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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