• 대한한의학회지
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• 제31권1호
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• pp.138-152
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• 2010

Objective: Yikgeebohyul-tang (Yiqib$\check{u}$xu$\grave{e}$-t$\bar{a}$ng) is one of the representative prescriptions for invigoration of vitality and nourishing of the blood. This study was carried out to investigate the effects of Yikgeebohyul-tang (Yiqib$\check{u}$xu$\grave{e}$-t$\bar{a}$ng) on hair regrowth and cytokine changes in a shaving model of C57BL6 mice. Method: Five-week-old mice were acclimated for 1 week at a temperature between $21-23^{\circ}C{\acute{E}}$, 40-60% relative humidity, and 12h of a light/dark cycle before beginning of the experiment. There were two groups including normal saline (control) and a positive control of oral intake of Yikgeebohyul-tang (Yiqib$\check{u}$xu$\grave{e}$-t$\bar{a}$ng) extract (sample) in 18 female mice. The test compounds were topically treated once a day over 14 days. The hair regrowth was photographically and histologically determined during the experimental period of 14 days. Revelation of TGF-${\beta}1$ and EGF were also determined using immunohistochemistry. In addition to that, IFN-$\gamma$, IL-4 and IL-10 were determined in serum. Results: Hair regrowth in the sample group was promoted earlier and faster than the control group, as shown by concentrations of hairs and thick-hair ratio in the sample group. TGF-${\beta}1$ was not revealed in either control or sample group. EGF was strongly positive in out root sheath of some thick hair of the sample group. Serum IFN-$\gamma$ was significantly decreased in the sample group compared with the control group at 7 experimental days. However, it was not significantly decreased at 14 experimental days. Serum IL-4 was significantly increased in the sample group compared with the control group at 7 experimental days. However, it was not significantly decreased at 14 experimental days. Serum IL-10 was decreased in the sample group compared with the control group, but with no real statistical significance. Conclusion: These results suggest that Yikgeebohyul-tang (Yiqib$\check{u}$xu$\grave{e}$-t$\bar{a}$ng) has hair growth promoting activity and it can be used for treatment of alopecia. Also, these effects relate to EGF revelation of hair roots, a decrease in serum IFN-$\gamma$, and an increase of serum IL-4.

• KSBB Journal
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• 제16권3호
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• pp.274-280
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• 2001

본 연구에서는 레트로바이러스 생산 세포인 CRIP/LacZ 세포의 배양시에 혈청의 역할을 대체 할 수 있는 여러 첨가불을 선정하고 그 농도를 정하는 실험올 수행하여, 레트로바이러 스 생산을 워한 무혈청 배지를 개발하였다. 그 결과 DMEM 을 기본배지로 하고 insulin, transfenin, BSA, EGF and linoleic acid를 포함한 무혈청 배지를 개발하였다. 이를 충전 층 연속배양기흘 이용한 레트로바이러스의 연속생산 실험에 본 결과 $6-7\times10^4 cfu/ml$서 수율을 가진 레트로바이러스를 약 8일간 생산할 수 있었다. 충전층 연속반응기에서도 T -flask와 같이 온도의 영향이 매우 중요하였고 $32^{circ}C$, 에서 가 장 높은 수율회 레트로바이러스를 생산할 수 있었다. 이는 레트로바이러스외 온도에 따흔 비활성속도가 바이러스 생산 수율에 매우 큰 영향음 마칩을 시사해 주논 결과이다. 또한 충전층 배양기에서 무혈청배지를 이용한 세포배양 시에는 무혈청배지 첨가물로 서1포 부착 물짚에 대한 연구가 필요하다고 생각된다.

• 한국수정란이식학회지
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• 제14권2호
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• pp.113-119
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• 1999

This study was performed to improve the development of the in vitro fertilized bovine embryos by the condition of in vitro maturation. COCs were matured in TCM 199 supplemented with 0.1% PVA, 10ng/ml EGF, Hormones (5$\mu\textrm{g}$/ml FSH, 10 IU hCG, 1 $\mu\textrm{g}$/ml estradiol 17-$\beta$) or granulsa cell+Hormones atmosphere 39$^{\circ}C$, 5% CO2, 95% air for 24hrs. Matured oocytes were fertilized with frozen-thawed semen capacitated with 5mM caffein in BO medium for 20 hrs. IVF embryos were cultured in TCM 199 containing with hormones(same as matured medium), 10% FBS and co-culture with bovine oviduct epitherial cells. Maturation rates of COCs were showed 73.8%, 78.5%, 83.2% and 87.6% respectively, and were significant differences between PVA, EGF, and Hormones, GC+Hormones(p<0.05). The cleavage rates of IVF embryos were revealed 72.5%, 78.4%, 82.3% and 84.2% and showed same tendency as maturation rates(p<0.05). The blastocysts matured by above maturation condition and cultured for 7~10 days after fertilization had 34.4, 43.6, 52.3 and 59.3 cells had no differences among the treatments. These results suggest that high molecules as a substitutes of serum and growth factor may induce nuclear resumption of COCs but we need more study to produce transferable IVF blastocysts by use of that agents.

• 한국동물번식학회:학술대회논문집
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• 한국동물번식학회 2004년도 춘계학술발표대회
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• pp.244-244
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• 2004

본 실험에서는 돼지 액상정액의 보존일령에 따른 생존율과 활력도를 CASA를 이용하여 조사하고, 이어 IVF 후 전핵 형성율과 배 발생율을 비교하여 액상정액의 보존일령이 돼지 체외수정율에 미치는 영향을 조사하였다. 돼지 난포란을 10% pFF, 0.1 ㎎/㎖ cysteine, 10 IU/㎖ PMSG, 10 IU/㎖ hCG, 10 ng/㎖ EGF가 첨가된 TCM-199 배양액에서 22시간 동안 배양한 후, 성선자극 호르몬이 배제된 배양액에서 추가로 22시간 동안 배양하여 성숙을 유도하였다. 희석제(BTS)로 희석된 액상정액은 17℃에서 보관하였다. (중략)

• Bulletin of the Korean Chemical Society
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• 제26권6호
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• pp.959-965
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• 2005

Investigation of structure-activity relationships of novel quinazolines has identified 7,8-dihydro-[1,4]dioxino-[2,3-g]quinazolines as a potent inhibitor of EGFR. These compounds have a benzodioxane framwork, which was prepared by regioselective O-alkylation of ethyl 3,4-dihydroxy benzoate by epoxide ring opening. Compounds 3f and 3k were more potent than ZD-1839 in EGF enzyme and EGFR autophosporylation inhibition assays.

• 한국수정란이식학회지
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• 제27권2호
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• pp.121-126
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• 2012

The objective of this study was to examine the effect of in vitro culture media on embryonic development of in vitro-matured (IVM) oocytes after parthenogenetic activation (PA) in pigs. Immature pig oocytes were matured in TCM-199 supplemented with porcine follicular fluid, cysteine, pyruvate, EGF, insulin, and hormones for the first 22 h and then further cultured in hormone-free medium for an additional 22~26 h. IVM oocytes were activated by electric pulses and cultured in porcine zygote medium-3 (PZM-3) and North Carolina State University-23 supplemented with essential and non-essential amino acids (NCSU-23aa). These media were further modified by supplementing 2.77 mM myo-inositol, 0.34 mM trisodium citrate, and $10{\mu}M$ ${\beta}$-mercaptoethanol (designated as mPZM-3 and mNCSU-23aa, respectively). Culture of PA embryos in mPZM-3 significantly increased development to the blastocyst stage than culture in NCSU-23aa (36.2% vs. 24.8%, p<0.05). Modified PZM-3 showed a significantly higher blastocyst formation than NCSU-23aa in both groups of embryos that were activated at 44 h and 48 h of IVM (51.0% vs. 35.5% and 49.0% vs. 34.2% in oocytes activated at 44 h and 48 h of IVM, respectively). Irrespective of the follicle diameter where oocytes were collected, embryonic development to the blastocyst stage was increased (p<0.05) by the culture in mPZM-3 compared to culture in NCSU-23aa (25.9% vs. 34.2% and 32.9% vs. 44.8% in embryos derived from small and medium size follicles, respectively). Our results demonstrated that culture media had significant effect on preimplantation development PA embryos and that mPZM-3 was superior to mNCSU-23 in supporting development to the blastocyst stage in pigs. This beneficial effect of mPZM-3 on embryonic development was not impaired by other factors such as time of oocyte activation and origin of immature oocytes (small and medium size follicles).

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제36권4호
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• pp.249-254
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• 2009

목 적: 고식적 체외수정시술과 세포질내정자주입법을 사용하여 체외성숙 난자를 수정시키고 수정률과 배발달율을 비교하고자 하였다. 연구방법: 2007년 1월부터 2008년 8월까지 난소과자극과 체외수정시술을 받은 59명의 여성에서 135개의 배아소포 단계의 미성숙난자만을 얻어 75 mIU/mL rFSH, 0.5 IU/mL rhCG, 10 ng/mL rEGF가 포함된 체외성숙용 배양액에서 최대 48시간까지 배양하였다. 체외성숙된 난자는 고식적 체외수정방법 (n=41) 또는 세포질내정자주입법 (n=94)을 이용하여 수정시켰으며 이후 배발달율을 관찰하였다. 결 과: 고식적 체외수정군과 세포질내정자주입군에서 체외성숙률은 각각 51.2%와 59.6%였고, 수정률은 각각 71.4%와 80.4%로 두 군간에 통계적으로 유의한 차이는 없었다. 배발달율도 두 군에서 비슷하게 관찰되었다. 결 론: 난소과자극을 통해 얻은 미성숙난자는 고식적 체외수정법을 사용하더라도 세포질내정자주입법과 동등한 수정률과 배발달율을 보임을 확인하였다.

• 생명과학회지
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• 제30권8호
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• pp.680-687
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• 2020

본 연구에서는 Hovenia dulcis Thunberg (헛개나무)의 80% 메탄올 분획물의 항산화 및 세포 노화 억제활성을 규명하고자 하였다. 헛개나무 에틸아세테이트 분획물이 DPPH라이칼 소거능에서 가장 높은 활성 저해를 보였고 (RC₅₀ = 3.6±0.8 ㎍/ml), 총 페놀(417.2±5.3 mg GAE/ml) 및 총플라보노이드(260.6±27.5 mg QE/ml) 측정에서도 가장 높은 활성을 보였다. HDF 세포에서 노화가 진행됨에 따라 sm22의 발현이 증가되었고(p<0.001), β-갈락토시다아제의 염색양이 증가(p<0.001)되는 것을 확인하였다. 반면, sm22의 증가는 세포 노화가 진행된 세포일수록 증가폭이 감소되는 것이 확인되었고, 초기노화에서 발현이 높은 것을 알 수 있었다. 헛개나무 에틸아세테이트 분획물을 처리시 HDF세포의 EGF (p<0.01), PDGF-BB (p<0.01), SHH (p<0.05)의 사이토카인이 유의적으로 증가를 보이며, 노화 시 발생된 sm22의 수치를 감소시키는 것을 보였다. 이러한 결과는 헛개나무 에틸아세테이트 분획물이 초기 세포 노화의 작용을 조절할 수 있음을 보여준다.

• 한국수정란이식학회지
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• 제25권1호
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• pp.1-7
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• 2010

The objective of this study was to examine the effect of vitamin B (pantothenic acid, folic acid, and myo-inositol) that was supplemented to embryo culture medium on in vitro development of parthenogenetically activated (PA) pig embryos. Cumulus-oocyte complexes derived from slaughtered ovaries were matured in TCM-199 supplemented with porcine follicular fluid, cysteine, pyruvate, EGF, insulin, and hormones (hCG and eCG) for the first 22 h and then further cultured in hormone-free medium for an additional 22 h. After maturation culture, metaphase II oocytes that extruded 1st polar body were electrically activated and treated with $5.0\;{\mu}g/ml$ cytochalasin B for 4 h. Then, PA embryos were cultured for 7 days in a modified NCSU-23 that was supplemented with pantothenic acid, myo-inositol, or folic acid at different concentrations ($3{\sim}300\;{\mu}M$) according to the experimental design. Myo-inositol added to culture medium did not show any beneficial or inhibitory effects on embryo cleavage and blastocyst formation. However, $300\;{\mu}M$ pantothenic acid significantly inhibited blastocyst formation compared to control (no addition) (24% vs. 36%, p<0.05). Folic acid ($300\;{\mu}M$) significantly (p<0.05) increased blastocyst formation (56%) compared to control (41%). Our results demonstrated that in vitro development of PA embryos was significantly influenced by vitamin B and addition of $300\;{\mu}M$ folic acid to culture medium improved in vitro development of pig PA embryos.

• 한국발생생물학회:학술대회논문집
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• 한국발생생물학회 2003년도 제3회 국제심포지움 및 학술대회
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• pp.87-87
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• 2003

난자성숙 중 MPF활성은 MI 과 MII에서 최대로, MII로의 성숙 직후 난자를 핵이식에 이용하는 것은 핵과 세포질 사이의 reprogramming에의 효율을 높일 수 있을 것이다. 일반적으로 돼지의 IVF나 핵이식은 체외성숙후 44h에 이뤄지고 있다. 이는 aging을 낳을 수 있고 aging은 또한 발달능을 떨어뜨릴 수 있다. 따라서, 본 실험은 돼지의 체외성숙시간에 따른 체외성숙율과 단위발생후 체외발달율을 비교하여 최적의 체외성숙시간을 찾고자 실시하였다. 돼지 난포란을 10% pFF, 0.1mg/ml cysteine, 10IU/ml PMSG, 10IU/ml hCG, 10ng/ml EGF가 첨가된 TCM-199배양액에서 22, 30, 44시간 동안 배양하여 성숙을 유도하였다. 체외성숙이 야기된 난자는 난구세포를 제거한 후 전기자극(2.0kv/cm, $30 \mu s$) 후 5분 동안 TCM-199에서 세정하고 다시 4시간 동안 6-DMAP에서 배양된 후 4mg/ml BSA가 첨가된 NCSU-23에 넣어 $39^{\circ}C$, 5% $CO_2$배양기에서 각각 6-7일 동안 배양을 실시하였다. 체외성숙 22시간 성숙난자는 M I 44.3%(35/79)와 A I -T I 36.7%(29/79)로 81%가 M II로의 성숙에는 아직 미치지 못했다. 30시간 성숙난자는 46.3%(56/121)가 M II로 성숙하였고, M I과 A I -T I 은 각각 25.6%(31/121), 27 3%(33/121)이었다. 44시간 성숙난자는 78%(71/91)가 M II로 성숙하였고, M I 과 A I -T I 은 각각 12.1%(31/121), 7 7%(33/121)이었다. 단위발생율은 22시간에 난할율은 35.4%(75/137)이었고, 배반포 발달은 없었다. 30시간에 난할율은 51.8%(145/280)이었고, 배반포 발달율은 5.5%(8/145)이었다. 44시간에 난할율은 80.0%(244/306)이었고, 배반포 발달율은 14.3%(35/144)이었다. 본 연구결과 핵 및 세포질의 완전한 성숙은 44h에 이루어지고, 이에 따른 배발달율도 뒤따름을 알 수 있었다. 난자가 핵성숙의 완성에도 불구하고 완전한 활성을 위한 발달능은 갖지 못함을 알 수 있었으며, 질 좋은 배반포 생산을 위해 핵과 세포질 성숙의 synchronous가 중요하다 사료된다. 체외성숙을 위한 배양기술의 진전과 더불어 체외성숙 시간에 따른 세포질적인 기전에 대한 연구가 필요하다.