Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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v.34
no.2
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pp.299-308
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2007
Insoluble glucan is the important component of oral biofilm, which is synthesized from sucrose through the action of glucosyltransferase (GTF) B and GTF C encoded by the gtfB and gtfC genes, respectively of Streptococcus mutans. In present study, the effects of various sugars on the mRNA expression of gtfB and gtfC of S. mutans Ingbritt were examined by fluorescent in situ hybridization (FISH). The mRNA of gtfB and gtfC was expressed normally in the BHI broth containing 1% and 5% sucrose. The mRNA expression was decreased by the addition of 10% of glucose, and 1%, 5% and 10% of fructose. Lactose had no great effect on the expression of gtfB and gtfC. 5% and 10% of xylitol greatly reduced the mRNA expression of gtfB and gtfC. Sorbitol slightly decreased the mRNA expression of gtfB and gtfC when compared to the control. In summary, mRNA expression of gtfB and gtfC was decreased by the addition of glucose, fructose, and xylitol.
A GAL4 type transcription factor gene (formally annotated as AN3912) locating downstream of sndA (AN3911) was characterized. The putative transcription factor carries both Zn(II)2Cys6 binuclear cluster DNA-binding domain and transcription activator domain. The gene named gtfA (gal4 type transcription factor) had an open reading frame which consisted of 762 amino acids and was disrupted by three introns. The deletion mutant produced reduced amount of conidia but increased amount of fruiting bodies, suggesting that the GtfA make function in decision of asexual preferential to sexual development. The forced over expression of gtfA caused the retardation of fruiting body formation on high glucose concentration. The transcript level of gtfA was kept constant through the life cycle except late vegetative stage and early sexual development stage during which slight increase was found. The expression of gtfA was not significantly affected by sexual or asexual development regulators, such as VeA, NsdD or FluG, FadA, and SfaD. The GtfA repressed the nsdC transcription, which suggested that GftA control sexual development negatively via negative regulation of nsdC expression.
Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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v.33
no.1
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pp.77-84
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2006
Since the long-term exposure of mutans streptococci to xylitol is known to select for xylitol-resistant $(X^R)$ natural mutants, the occurrence and survival of such $(X^R)$ strains were performed in batch culture methods. The aim of the study was to compare the differentiation and quantification of mRNA expression of the gtf genes of $X^R\;and\;X^S$ mutans streptococci. Using a real-time reverse-transcription polymerase chain reaction, the expression of each gtf was determined. In $X^R$ strains, the relative levels of transcription of gtfB and gtfC were decreased while that of gtfD was increased, suggesting the presence of independent promoters. It also suggested that mutation related to production of glucosyltransferase occurred under the exposure of xylitol could explain the caries-preventive mechanisms of xylitol.
Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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v.31
no.2
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pp.304-313
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2004
Xylitol, a five-carbon natural sugar alcohol, is widely used non-cariogenic sugar substitute. In present study, the effects of xylitol on the expression of mRNA for glucosyltransferase which synthesizes glucan from sucrose were detected by Fluorescent in situ hybridization (FISH) and flow cytometry. FITC fluorescences for mRNA of gtfB, gtfC and gtfD were decreased further with increasing concentration of xylitol from 1% to 10% when detected by FISH. Flow cytometric analysis also showed that the expression of gtfB, gtfC and gtfD was increased by the addition of sucrose and decreased by the addition of xylitol to BHI broth containing 1% sucrose. In conclusion, the expression of gtfB, gtfC and gtfD mRNA was decreased by the addition of xylitol.
Streptococcus mutans (S. mutans) is the major causative bacteria in dental caries. Xylitol is effective anticarious natural sugar substitute by inhibiting the virulence of S. mutans. However, long-term xylitol consumption leads to the emergence of the xylitol-resistant (XR) strains which means xylitol is no more inhibited their growth. We therefore confirmed the general characteristics and the virulence factors of the xylitol-sensitive (XS) and XR S. mutans for different concentrations of xylitol. S. mutans KCTC 3065 was maintained in TYE medium containing 0.4% glucose with 1% xylitol during 30 days at $37^{\circ}C$, 10% $CO_2$ to form XR strain. The strains were transferred to new medium every 24 hr and the same procedures without xylitol were repeated for the formation of XS S. mutans. Both XS and XR were cultured in different concentrations of xylitol (0%, 0.1% and 1%) then, cell growth, acid production and mRNA expression of gtf genes were analyzed. Xylitol reduced the cell growth of XS S. mutans in dose-dependent manner, but not reduced that of XR. Xylitol inhibited acid production of XS in dose-dependent manner, but not inhibited that of XR. Xylitol reduced the gtfB and gtfD mRNA expression of XS S. mutans which genes synthesized soluble and insoluble extracellular polysaccharides, but not reduced that of XR. These results indicate that the virulence of XR S. mutans is different characters of XS strains, which suggests XR strains may have different cariogenicity of XS strains. Further study is needed to explain the mechanism related to extracellular polysaccharide in the XR strains.
Kim, Ji-Hye;Lee, Young-Eun;Ahn, Sang-Hun;Choi, Youn-Hee;Nam, Soon-Heyun;Song, Keun-Bae
Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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v.36
no.4
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pp.531-538
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2009
Xylitol has the ability to reduce the adherence of Streptococcus mutans(S. mutans), which can make it easier to remove plaque, decrease acid production and inhibit dental caries. There are few reports on the effects of xylitol on the expression of the virulence related genes in S. mutans. This study examined the inhibitory effect of chewing gum containing xylitol on glucan synthesis related gene expression of S. mutans. Participants were voluntarily recruited for a women's oral health prevention program, classified into two groups(a control and a xylitol group), and then followed for 2 years. Twenty salivary samples were randomly selected from each group. Colony count and real-time reverse transcription polymerase chain reaction were used to analyze the characteristics of S. mutans. The following results were obtained: The S. mutans counts decreased steadily in the xylitol group over the study period(p<0.05). The expression of the virulence related genes (gtfB, gtfC and gtfD) was significantly lower in the xylitol group than in the control groups (p<0.05). In conclusion, these results suggest that chewing xylitol gum for a long period of time may reduce the expression of the genes associated with S. mutans virulence, which can result in a decrease growth of S. mutans colonies as a result.
Erythritol is a sweetener produced by yeast from glucose and a natural sugar found in fermented foods such as mushrooms, wine, fruits, rice wine, and soy sauce. Correct information and basic data when producing or using products for preventing dental caries by checking the gene expression patterns of glucosyl transferase (GTF) and fructosyl transferase (FTF) of Streptococcus mutans in erythritol and other sweeteners it was implemented to provide. Erythritol inhibited the growth of Streptococcus mutans, which is involved in dental caries. When used as a sweetener to replace sucrose, erythritol had an excellent caries-preventative effect. In particular, erythritol reduced the expressions of gtfB, gtfC, gtfD, and FTF, which are related to the synthesis of extracellular polysaccharides, and thereby reduced the formation of dental plaque and the attachment rate of bacteria to tooth surfaces. The study shows erythritol has potential use as an anticariogenic sweetener that inhibits the mechanism underlying caries caused by Streptococci.
Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society
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v.10
no.10
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pp.2990-2996
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2009
S. mutans, one of a major causal agents of dental caries, is component of the dental plaque and produces various organic acids such as lactic acid as the end-product of glycolysis. In this study, we are interested in comparing the gene expression of acid-shocked and control cells of S. mutans isolated from Korean with caries. Expression levels of gtfB, gtfC, gtfD and ftf were analyzed by Real-time PCR, when the cells were grown under 20 mM lactic acid stress in the exponential phase. The data showed reduced expression of these genes. S. mutans is known to have developed a variety of mechanisms to tolerate acid sterss. A more detailed analysis of the functions and interactions of acid stress proteins connecting the growth, stress tolerance, biofilm formation is under way.
Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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v.31
no.2
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pp.314-322
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2004
The production of a glucan was affected by the concentration of ions and buffer solutions, and nutrients in an oral cavity. In this study, the effects of ions and buffer solutions on the mRNA expression of gtfD gene in Streptococcus mutans, an important causative agent of dental caries, were investigated by Fluorescent in situ hybridization(FISH). At first, ions and buffer solutions had little effect on the multiplication of Streptococcus mutans. The green fluorescence according to the mRNA expression of gtfD gene was detected in the BHI broth containing 1% sucrose. The intensities of the green fluorescence were strong at 0.25mM of $CaCl_2$. Little fluorescence was detected by the addition of KCl, except far 10mM KCl at which fluorescence intensities were similar to those of the control. Fluorescence intensities were weak at each concentration of $MgCl_2$ when compared to the control. As for buffer solutions, fluorescence intensities were similar to those of the control at each concentration of buffer solutions, except that they were little detected at 100mM of potassium phosphate.
Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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v.32
no.2
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pp.357-369
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2005
Streptococci are Gram-positive, facultative anaerobes and have no catalase activities. Among mutans streptococci containing ${\alpha}-type$ hemolytic activity, S. mutans is a causative agent for dental caries. As well as acid production yielding the demineralization of tooth enamel, adherence and colonization of S. mutans to the teeth are also important for its virulence. These early colonization are accomplished by the bacterial fibrillar protein, Antigen I/II (Ag I/II) and glucosyltransferase (GTF). Therefore, Ag I/II and GTF are reasonable targets for the development of vaccine against S. mutans GS-5. The ag I/II and gtfD genes from S. mutans GS-5 were cloned and sequenced. Sequence analyses showed the nucleotides sequence of cloned genes had high homology to the sequences previously reported. The sequence alignment of 280 nucleotides between the cloned Ag I/II and the available sequence of the corresponding S. mutans GS-5 showed the perfect match. Comparing with the sequence of gtfD from S. mutans UA159, the corresponding nucleotide sequence of S. mutans GS-5 showed some mismatches and the mismatches introduced changes in four residues out of 105 amino acids, yielding four missense mutations.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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