In this study, the physicochemical properties of leachate and the bacteria existence in leachate using molecular biology methods for 4 animal carcass disposals on the disposal lapse time was analyzed. The result of leachate physicochemical analysis in the middle stage (been buried 20 months) showed higher EC, DO, $HCO_3{^-}$, TOC, T-N and $SO_4{^{2-}}$ concentration compared to the first stage data (been buried 5 months). For identification of leachate using 16S rRNA method, Lysinibacillus sphaericus, Bacillus pumilus, Pseudoclavibacter helvolus, Pseudochrobactrum saccharolyticum and Corynebacterium callunae in the first stage, Bacillus cereus, Lysinibacillus sphaericus, Bacillus circulans and Corynebacterium glutamicum in the middle stage was observed, while there were detections of pathogenicity bacteria such as B. cereus and L. sphaericus. This study improves our knowledge of the fate and transport in geologic media, treatment, risk analysis on the leachate from animal carcass disposal sites.
The efficient fermentative production of L-threonine fermentation was achieved by using Escherichia coli MT201, transformed a plasmid carrying pyruvate carboxylase gene. It is an attempt to supply oxaloacetate to the L-threonine biosynthetic pathway. In order to improve the L-threonine productivity of E. coli MT201, a plasmid pPYC which is an expression vector of the pyruvate carboxylase gene of Coryne-bacterium glutamicum, was introduced. When E. coli MT/pPYC was incubated with medium containing only glucose as a carbon source, both the cell growth and L-threonine production were reduced, compared to the results from fermentation of E. coli MT201. In order to circumvent this effect, we attempted the addition of a mixed carbon source, composed of glucose and sodium citrate at a ratio of 1.5:3.5. It was shown that L-threonine production and cell growth (OD660) with E. coli MT/pPYC reached up to 75.7 g/l and 48, respectively, at incubation for 75 hr under fed-batch fermentation conditions. It is assumed that overproduction of L-threonine by anaplerotic pathway leads unbalance of TCA cycle and sodium citrate might playa role to recover normal TCA cycle.
Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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v.35
no.3
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pp.219-228
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2009
This study was performed to evaluate a deodorant body wash with 1.0 wt% of triclosan and 0.4 wt% of bamboo salt, which have an inhibitory effect on axillary malodor. In this studies, in vitro antibacterial study and the clinical study, which was designed by randomized assignment, double-blind and cross-over, were performed. In the antibacterial study, test sample, which was body wash having 1.0 wt% of triclosan and 0.4 wt% of bamboo salt, have a potent antibacterial effect on Corynebacterium glutamicum, Corynebacterium xerosis, Corynebacterium jeikeium. In the clinical study, test sample has a potent and significant deodorizing effect on axillary malodor and an antibacterial efficacy. And its efficacy was maintained for 9 h at least. There was no side effect during the period of clinical study. Consequently, body wash, containing 1.0 wt% of triclosan and 0.4 wt% of bamboo salt, has the effectiveness and the safety about axillary malodor reduction.
The recent progress on metabolic systems engineering was reviewed based on our recent research results in terms of (1) metabolic signal flow diagram approach, (2) metabolic flux analysis (MFA) in particular with intracellular isotopomer distribution using NMR and/or GC-MS, (3) synthesis and optimization of metabolic flux distribution (MFD), (4) modification of MFD by gene manipulation and by controlling culture environment, (5) metabolic control analysis (MCA), (6) design of metabolic regulation structure, and (7) identification of unknown pathways with isotope tracing by NMR. The main characteristics of metabolic engineering is to treat metabolism as a network or entirety instead of individual reactions. The applications were made for poly-3-hydroxybutyrate (PHB) production using Ralstonia eutropha and recombinant Escherichia coli, lactate production by recombinant Saccharomyces cerevisiae, pyruvate production by vitamin auxotrophic yeast Toluropsis glabrata, lysine production using Corynebacterium glutamicum, and energetic analysis of photosynthesic microorganisms such as Cyanobateria. The characteristics of each approach were reviewed with their applications. The approach based on isotope labeling experiments gives reliable and quantitative results for metabolic flux analysis. It should be recognized that the next stage should be toward the investigation of metabolic flux analysis with gene and protein expressions to uncover the metabolic regulation in relation to genetic modification and/ or the change in the culture condition.
In thisstudy, effects of medium components on microbial production of L-phenylalanine by Corynebacterium glutamicum were investigated. The effect of carbon source on the production of L-phenylalanine was significant. Molasses enhanced the production of L-phenylalanine compared to sucrose, glucose, fructose, or their mixture. It was noticed that trace salts were required for the cell growth and product formation in the minimal medium, but excess amounts of trace salts had no effect on the production of L-phenylalanine. It was also found that optimum amounts of biotin and thiamine were required for the cell growth and the production of L -phenylalanine.
Brevibacterium lactofermentum, a gram-positive bacteria, has both the diaminopimelate (DAP) pathway and meso-DAP-dehydrogenase (DDH) pathway for L-lysine biosynthesis. To investigate importance of DDH pathway and the related ddh gene in lysine production, we introduced site-specific mutagenesis technique. A 300 bp DNA fragment central to the meso-DAP-dehydrogenase gene (ddh) of B. lactofermentum was used to inactive chromosomal ddh gene via homologous recombination. Southern hybridization analysis confirmed that the chromosomal ddh gene was disrupted by the vector sequence. The B. lactofementum ddh mutant obtained have an inactive DDH pathway. The results reveal that inactivation of the ddh gene in B. lactofermentum leads to dramatic reduction of lysine production as well as decrease of the growth rate, indicating that the DDH pathway is essential for high-level lysine production as well as biosynthesis of meso-DAP.
Park, Chung;Lim, Bun-Sam;Chun, Moon-Jin;Kim, Woo-Kap
Korean Journal of Microbiology
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v.23
no.4
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pp.265-270
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1985
Overall procedure of cell fusion between Brevibacterium flavum and Corynebacterium glutamicum was morphologically observed by transmission electron microscopy. Protoplasts formed by treatment of cells with penicillin G and lysozyme in order were released through the pores generated on a certain region of cell walls to be spherical form. When two different protoplasts were met, cell wall and membrane in the contact zone was disappeared and followed by the mutual exchange of cytoplasmic and/or chromosomal materials. Cell xall regeneration speed of the protoplasts fused was slower than that of the non-fused, whereas the size of the former was confirmed as bigger than that of the latter.
Violacein, a purple pigment first isolated from a gram-negative coccobacillus Chromobacterium violaceum, has gained extensive research interest in recent years due to its huge potential in the pharmaceutic area and industry. In this review, we summarize the latest research advances concerning this pigment, which include (1) fundamental studies of its biosynthetic pathway, (2) production of violacein by native producers, apart from C. violaceum, (3) metabolic engineering for improved production in heterologous hosts such as Escherichia coli, Citrobacter freundii, Corynebacterium glutamicum, and Yarrowia lipolytica, (4) biological/pharmaceutical and industrial properties, (5) and applications in synthetic biology. Due to the intrinsic properties of violacein and the intermediates during its biosynthesis, the prospective research has huge potential to move this pigment into real clinical and industrial applications.
Proceedings of the Korean Vacuum Society Conference
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2016.02a
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pp.384.1-384.1
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2016
We reported that amorphous silicon (a-Si) thin film provide sample plate exhibiting a multimodality to measure biomolecules by secondary ion mass spectrometry (SIMS) and laser desorption/ionization mass spectrometry (LDI-MS). Kim et al.1 reported that a-Si thin film were suitable to detect small molecules such as drugs and peptides by SIMS and LDI-MS. Recently, bacterial identification has been required in many fields such as food analysis, veterinary science, ecology, agriculture, and so on.2 Mass spectrometry is emerging for identifying and profiling microbiology samples from its advantageous characters of label-free and shot-time analysis. Five species of bacteria - S. aureus, G. glutamicum, B. kurstaki, B. sphaericus, and B. licheniformis - were sampled for MS analysis without lipid extraction in sample preparation steps. The samples were loaded onto the a-Si thin film with a thickness of 100 nm which did not only considered laser-beam penetration but also surface homogeneity. Mass spectra were recorded in both positive and negative ionization modes for more analytical information. High reproducibility and sensitivity of mass spectra were demonstrated in a mass range up to mass-to-charge ratio(m/z) 1200 by applying the a-Si thin film in mentioned above MS. Principle component analysis (PCA) - a popular statistical analysis widely used in data processing was employed to differentiate between five bacterial species. The PCA results verified that each bacterial species were readily distinguished and differentiated effectively from our MS approach. It shows a new opportunity to rapid bacterial profiling and identification in clinical microbiology. More details will be discussed in the presentation.
The thr operon of Escherichia coli TF427, an $\alpha$-amino-$\beta$-hydroxyvaleric acid (AHV)-resistant threonine overproducer, was cloned in a pBluescriptII $KS^+$ plasmid by complementation of E. coli mutants. All clones contained a common 8.8 kb HindIII-generated DNA fragment and complemented the thrA, thrB, and thrC mutants by showing that these clones contained the whole thr operon. This thr operon was subcloned in the plasmid vectors pBR322, pUC18, and pECCG117, an E. coli/Corynebacterium glutamicum shuttle vector, to form recombinant plasmids pBTF11, pUTF25 and pGTF18, respectively. The subcloned thr operon was shown to be present in a 6.0 kb insert. A transformant of E. coli TF125 with pBTF11 showed an 8~11 fold higher aspartokinase I activity, and 15~20 fold higher L-threonine production than TF125, an AHV-sensitive methionine auxotroph. Also, it was found that the aspartokinase I activity of E. coli TF125 harboring pBTF11 was not inhibited by threonine and its synthesis was not repressed by threonine plus isoleucine.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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