• Nutrition Research and Practice
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• 제11권5호
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• pp.381-387
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• 2017

BACKGROUND/OBJECTIVES: Vascular dementia (VaD) caused by reduced blood supply to the brain manifests as white matter lesions accompanying demyelination and glial activation. We previously showed that arabinoxylan consisting of arabinose and xylose, and arabinose itself attenuated white matter injury in a rat model of VaD. Here, we investigated whether larch arabinogalactan (LAG) consisting of arabinose and galactose could also reduce white matter injury. MATERIALS/METHODS: We used a rat model of bilateral common carotid artery occlusion (BCCAO), in which the bilateral common carotid arteries were exposed and ligated permanently with silk sutures. The rats were fed a modified AIN-93G diet supplemented with LAG (100 mg/kg/day) for 5 days before and 4 weeks after being subjected to BCCAO. Four weeks after BCCAO, the pupillary light reflex (PLR) was measured to assess functional consequences of injury in the corpus callosum (cc). Additionally, Luxol fast blue staining and immunohistochemical staining were conducted to assess white matter injury, and astrocytic and microglial activation, respectively. RESULTS: We showed that white matter injury in the the cc and optic tract (opt) was attenuated in rats fed diet supplemented with LAG. Functional consequences of injury reduction in the opt manifested as improved PLR. Overall, these findings indicate that LAG intake protects against white matter injury through inhibition of glial activation. CONCLUSIONS: The results of this study support our hypothesis that cell wall polysaccharides consisting of arabinose are effective at protecting white matter injury, regardless of their origin. Moreover, LAG has the potential for development as a functional food to prevent vascular dementia.

• 한국안광학회지
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• 제20권3호
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• pp.391-396
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• 2015

목적: 본 연구에서는 한국관박쥐 망막에서의 시각계를 이해하기 위하여 한국관박쥐의 망막 내 글루타메이트 및 ${\gamma}$-aminobutyric acid (GABA), 아세틸콜린과 같은 중추신경계의 주요 신경전달물질과 수용체, 신경교세포인 뮬러세포의 분포를 분석하였다. 방법: 성체 한국관박쥐의 망막을 대상으로 하였다. 망막을 수직 절편한 다음, 표준면역세포화학법을 적용하였다. 공초점 현미경을 사용하여 면역형광이미지 내 면역반응성을 확인하였다. 결과: 한국관박쥐의 망막에서 글루타메이트에 대한 면역반응성을 나타내는 신경세포들은 주로 신경절세포층에 존재하였다. GABA에 대한 면역반응성을 가지는 신경세포들은 내핵층에 주요하게 분포했으며, GABA의 수용체들은 내망상층에 존재하였다. 아세틸콜린의 면역반응성 신경세포들은 주로 내핵층에 위치하고 있었으며, 니코틴성 아세틸콜린 수용체 각각의 면역반응성들은 대부분 내망상층에 밀집해 있었다. 한국관박쥐의 망막에서 신경교세포 중 하나인 뮬러세포는 신경절 세포층에서 외핵층까지 길게 뻗어 있었다. 결론: 본 연구를 통하여 한국관박쥐의 망막에도 다른 포유동물의 망막에 있는 주요 신경전달물질 및 수용체, 뮬러세포가 존재한다는 것이 밝혀졌다. 이와 같은 연구결과는 한국관박쥐는 조직화된 망막 신경회로를 가지는 기능적 망막을 가지고 있음을 의미한다.

• 한국임상수의학회지
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• 제32권6호
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• pp.544-547
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• 2015

11살 수컷 페키니즈가 10일간의 발작을 주증으로 내원하였다. 내원 15일전 파행으로 지역병원에서 소염제를 처방 받았었고 10일 전 간헐적 전신발작을 시작으로 내원 2일 전에는 실조와 정신둔감이 함께 발생하였다. 혈액검사와 영상학적 검사상 특이소견은 관찰되지 않았으나, 신경계 검사상 위협반사와 동공 빛 반사가 떨어짐을 확인할 수 있었다. 내원 9시간 후 호흡곤란이 발생하였고 그 후 12시간 후 보호자의 요청으로 안락사를 실시하였다. 부검상 가로 단면에서 확장된 종양으로 인해 현저한 중심선 이동을 관찰할 수 있었다. 조직학적 분석을 통해 신경아교세포의 거짓 울타리화된 괴사와 미세혈관의 증식을 확인할 수 있었다. 면역염색 결과 종양 부위에서 GFAP, PCNA, Iba-a 에 염색된 세포가 관찰되었다. 이와 같은 결과를 바탕으로 아교모세포종으로 진단되었다. 원발성 두강내 종양은 수의학에서 흔하지 않다. 이번 증례는 페키니즈견에서 아교모세포종의 임상적, 조직학적 발견에 대한 보고이다.

• Applied Microscopy
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• 제30권4호
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• pp.377-387
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• 2000

뇌실을 감싸는 뇌실막층은 대부분이 일반적인 뇌실막 세포로 이루어졌으나, 이들 세포 사이에 간혹 띠뇌실막 세포(tanycyte)가 분포하고 있다. 띠뇌실막세포는 일반적인 뇌실막세포와는 달리 뇌의 실질로 뻗은 매우 긴 기저돌기를 갖고 있다. 특히 제3뇌실의 뇌실막층에서 주로 연구된 띠뇌실막세포는 뇌실과 뇌실질의 혈관 혹은 신경세포와의 사이에 물질교환을 담당하는 것으로 추측되고 있으며, 띠뇌실막세포는 일반적인 뇌실막세포와는 달리 glial fibrillary acidic protein(GFAP)항체에 대해 양성반응을 보이는 것으로 알려져 있다. 본 연구는 면역조직화학 및 면역금표지법을 이용하여 박쥐 맨아래구역을 감싸는 뇌실막층에서 GFAP 항체에 대해 양성반응을 보이는 세포의 분포여부 및 이의 미세 구조를 확인하고자 시행하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 세로 절단한 절편을 대상으로 GFAP 항체를 이용하여 면역염색한 후 광학현미경으로 확인한 결과 맨아래구역을 감싸는 뇌실막층에 GFAP 양성반응을 보이는 세포가 관찰되었으며, 특히 맨아래구역의 목부분에서 양성반응 세포가 많이 모여 있었다. GFAP양성반응을 보이는 세포들은 매우 긴 기저돌기를 갖고 있었으며, 기저돌기에서도 매우 강한 GFAP 양성반응을 보였다. 세포체에서는 주변부에서 양성반응을 보였다. 전자현미경하에서 맨아래구역 띠뇌실막세포는 주로 ependymal tanycytes였으며, 자유면에 소수의 미세융모 및 세포질돌기가 관찰되었으나, 섬모는 관찰되지 않았다. 기저부에 특징적으로 긴 기저돌기를 갖고 있었으며 이 돌기에는 중간세사 및 세로로 길게 달리는 사립체가 발달되어 있었고, 세포체와 돌기에 지방방울이 산재되어 있었다. 금입자를 표지한 GFAP항체를 사용하여 면역 염색한 후 전자현미경으로 관찰한 결과 세포체에서 핵을 둘러싸는 중간세사에서 금입자를 관찰할 수 있었으며, 나머지 핵을 비롯한 다른 세포소기관이나 세포질에서는 관찰되지 많았다. 또한 기저돌기에서도 중간세사에서만 금입자를 관찰할 수 있었다. 이와 같은 본 실험의 결과는 박쥐 맨아래구역 뇌실막층에도 띠뇌실막세포가 존재하고 있으며, 이 세포의 발달된 긴 기저돌기는 띠뇌실막세포가 일반적인 뇌실막세포와는 다른 기능을 동면동물인 박쥐의 맨아래구역에서도 수행하고 있음을 암시하고 있으나 이를 확인하기 위해서 더욱 자세한 연구가 필요한 것으로 사료된다.

• 생명과학회지
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• 제29권12호
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• pp.1371-1377
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• 2019

뇌에서 과량의 reactive oxygen species (ROS) 생성에 의해 유발되는 산화적 스트레스는 알츠하이머 질환과 같은 신경퇴행성 질환의 원인으로 알려져 있다. 본 연구에서는 kaempferol, kaempferol-3-O-glucoside, quercetin, quercetin-3-β-D-glucoside와 같은 flavonoid와 그 배당체의 H₂O₂ 유도 산화적 스트레스에 대한 C6 신경교세포보호 효과를 확인하였다. H₂O₂만을 처리한 control군은 아무것도 처리하지 않은 normal군에 비해 세포 생존율 감소와 ROS 생성 증가를 통해 C6 신경교세포의 산화적 손상이 유도되었음을 확인하였다. 반면 4가지 flavonoid를 각각 처리한 군의 경우, H₂O₂를 처리한 control군에 비해 세포 생존율 증가와 ROS 생성 감소를 통해 산화적 손상 억제를 통한 신경교세포 보호 효과를 확인하였다. Flavonoid의 신경교세포 보호 작용 메커니즘을 규명하기 위해, inducible nitric oxide synthase (iNOS), cyclooxygenase-2 (COX-2), and interleukine (IL)-1β 등의 염증 관련 단백질 발현을 측정하였다. H₂O₂를 처리한 control군은 normal군에 비해 iNOS, COX-2, IL-1β 단백질 발현 증가와 IκB-α 발현 감소를 통해 신경교세포의 산화적 손상으로 인한 염증 반응을 확인하였다. 반면, 4가지 flavonoid를 각각 처리한 군의 경우 iNOS, COX-2, IL-1β 단백질 발현 감소와 IκB-α 발현 증가를 나타내어, 염증 반응 개선을 통한 신경교세포 보호 효과를 확인하였다. 특히, quercetin과 그 배당체인 quercetin-3-β-D-glucoside를 처리한 군은 kaempferol과 그 배당체인 kaempferol-3-O-glucoside를 처리한 군에 비해 우수한 신경교세포 보호 효과를 나타내었다. 본 연구는 4가지 flavonoid가 신경교세포에서 산화적 스트레스 억제를 통해 신경퇴행성 질환을 예방 및 치료할 수 있을 것으로 사료된다.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제29권10호
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• pp.1407-1415
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• 2016

Isolation and culture of spermatogonial stem cells (SSCs) are attractive for production of genetic modified offspring. In the present study, buffalo spermatogonial stem-like cells were isolated, cultured and expression pattern of different germ cell marker genes were determined. To recover spermatogonia, testes from age 3 to 7 months of buffalo were decapsulated, and seminiferous tubules were enzymatically dissociated. Two types of cells, immature sertoli cell and type A spermatogonia were observed in buffalo testes in this stage. Germ cell marker genes, OCT3/4 (Pou5f1), THY-1, c-kit, PGP9.5 (UCHL-1) and Dolichos biflorus agglutinin, were determined to be expressed both in mRNA and protein level by reverse transcription polymerase chain reaction and immunostaining in buffalo testes and buffalo spermatogonial stem-like cells, respectively. In the following, when the isolated buffalo buffalo spermatogonial stem-like cells were cultured in the medium supplemented 2.5% fetal bovine serum and 40 ng/mL glial cell-derived neurotrophic factor medium, SSCs proliferation efficiency and colony number were significantly improved than those of other groups (p<0.05). These findings may help in isolation and establishing long term in vitro culture system for buffalo spermatogonial stem-like cells, and accelerating the generation of genetic modified buffaloes.

• 동의신경정신과학회지
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• 제17권2호
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• pp.75-89
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• 2006

Objective : This experiment was designed to investigate the effect of Rhododendron simsii Planch(RSP) on the Alzheimer's disease. Method : The effects of RSP on amyloid precursor proteins(APP), acetylcholinesterase (AChE), glial fibrillary acidic protein(GFAP) mRNA of PC-12 cell treated by amyloid ${\beta}$ protein$(A{\beta})$ and $IL-1{\beta}$, IL-6, $TNF-{\alpha}$ mRNA of THP-1 cell treated by lipopolysaccharide(LPS), AChE activity of PC-12 cell lysate treated by $A{\beta}$ and behavior of the memory deficit mice induced by scopolamine, and glucose, AChE in serum of the memory deficit mice induced by scopolamine were investigated, respectively. Result : 1. RSP suppressed APP, AChE, GFAP mRNA in PC-12 celt treated by $A{\beta}$. 2. RSP suppressed $IL-1{\beta}$, IL-6, $TNF-{\alpha}$ mRNA in THP-1 cell treated by LPS. 3. RSP suppressed AChE activity in cell lysate of PC-12 cell treated by $A{\beta}$. 4. RSP increased glucose and decreased AChE significantly in the serum of the memory deficit mice induced by scopolamine. 5. RSP group showed significantly inhibitory effect on the scopolamine-induced impairment of teaming and. memory in the experiment of Morris water maze. Conclusion : According to the above results, it is suggested that RSP might be usefully applied for prevention and treatment of Alzheimer's disease and memory deficit symptom.

• 동의신경정신과학회지
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• 제15권1호
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• pp.87-99
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• 2004

This experiment was designed to investigate the effect of Coptis japonica Makino(CJM) on the Alzheimer's disease. The effects of CJM extract on $IL-1{\beta}$, IL-6, amyloid precursor proteins (APP), acetylcholinesterase(AChE), glial fibrillary acidic protein(GFAP) mRNA of PC-12 cell treated by $A{\beta}$ plus $rIL-1{\beta}$ and AChE activity of PC-12 cell lysate treated by $A{\beta}$ plus $rIL-1{\beta}$ and behavior of memory deficit rats induced by scopolamine and mice glucose, uric acid, AChE activity of memory deficit rats induced by scopolamine were investigated, respectively. The results were summarized as follows ; 1. CJM extract suppressed $IL-1{\beta}$, IL-6 mRNA in PC-12 cell treated by $A{\beta}$ plus $rIL-1{\beta}$ 2. CJM extract suppressed APP, AChE, GFAP mRNA in PC-12 cell treated by $A{\beta}$ plus $rIL-1{\beta}$ 3. CJM extract suppressed AChE activity in cell lysate of PC-12 cell treated by $A{\beta}$ plus $rIL-1{\beta}$ 4. CJM extract group showed significantly inhibitory effect on the memory deficit of mice induced by scopolamine in the experiment of Morris water maze. 5. CJM extract increased glucose, decreased uric acid and AChE significantly in the serum of the memory deficit rats induced by scopolamine. According to the above results, it is suggested that CJM extract might be usefully applied for prevention and treatment of Alzheimer's disease and memory deficit symptom.

• 한국독성학회:학술대회논문집
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• 한국독성학회 2006년도 추계학술대회
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• pp.55-64
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• 2006

The fetal central nervous system (CNS) is sensitive to diverse environmental factors, such as alcohol, heavy metals, irradiation, mycotoxins, neurotransmitters, and DNA damage, because a large number of processes occur during an extended period of development. Fetal neural damage is an important issue affecting the completion of normal CNS development. As many concepts about the brain development have been recently revealed, it is necessary to compare the mechanism of developmental abnormalities induced by extrinsic factors with the normal brain development. To clarify the mechanism of fetal CNS damage, we used one experimental model in which 5-azacytidine (5AZC), a DNA damaging and demethylating agent, was injected to the dams of rodents to damage the fetal brain. 5AzC induced cell death (apoptosis)and cell cycle arrest in the fetal brain, and it lead to microencephaly in the neonatal brain. We investigated the mechanism of apoptosis and cell cycle arrest in the neural progenitor cells in detail, and demonstrated that various cell cycle regulators were changed in response to DNA damage. p53, the guardian of genome, played a main role in these processes. Further, using DNA microarray analysis, tile signal cascades of cell cycle regulation were clearly shown. Our results indicate that neural progenitor cells have the potential to repair the DNA damages via cell cyclearrest and to exclude highly affected cells through the apoptotic process. If the stimulus and subsequent DNA damage are high, brain development proceeds abnormally and results in malformation in the neonatal brain. Although the mechanisms of fetal brain injury and features of brain malformation afterbirth have been well studied, the process between those stages is largely unknown. We hypothesized that the fetal CNS has the ability to repair itself post-injuring, and investigated the repair process after 5AZC-induced damage. Wefound that the damages were repaired by 60 h after the treatment and developmental processes continued. During the repair process, amoeboid microglial cells infiltrated in the brain tissue, some of which ingested apoptotic cells. The expressions of genes categorized to glial cells, inflammation, extracellular matrix, glycolysis, and neurogenesis were upregulated in the DNA microarray analysis. We show here that the developing brain has a capacity to repair the damage induced by the extrinsic stresses, including changing the expression of numerous genes and the induction of microglia to aid the repair process.

• Toxicological Research
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• 제12권1호
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• pp.69-79
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• 1996

Primary culture of cerebellar neuronal cells derived from 8-day old Long-Evans rats was used. Pure granule cells, astrocytes or mixed cells culture systems were prepared. These cells were differentiated and developed synaptic connections. And the astrocytes were identified by immunostaining with glial fibrillary acidic protein (GFAP). Methamphetamine (MAP), which acts on dopaminergic system and cadmium (Cd), a toxic heavy metal, were applied and biochemical assays and electrophysiological studies were performed. $LC_50$ values estimated by MTT assay of MAP and Cd were 3 mM and 2$\mu M$ respectively. Cells were treated with 1 mM or 2 mM MAP and 1$\mu M$ $CdCl_2$ for 48 hour, and the incubation media were analyzed for the content of released LDH. MAP (2 mM) and Cd significantly increased the LDH release. Cell viability was decreased in both groups and some cytopathological changes like cell swelling or vacuolization were seen. The cerebellar granule cells were used for measuring membrane currents using whole-cell clamp technique. Sodium and potassium currents were not affected by MAP neither Cd, but calcium current was significantly reduced by Cd but not affected by MAP. Therefore, in vitro neurotoxicity test system using neuronaI cells and astrocytes cultures were established and can be used in screening of potential neurotoxic chemicals.