Park, Hee-Won;In, Gyo;Han, Sung-Tai;Lee, Myoung-Woo;Kim, So-Young;Kim, Kyung-Tack;Cho, Byung-Goo;Han, Gyeong-Ho;Chang, Il-Moo
Journal of Ginseng Research
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제37권4호
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pp.457-467
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2013
A quick and simple method for simultaneous determination of the 30 ginsenosides (ginsenoside Ro, Rb1, Rb2, Rc, Rd, Re, Rf, Rg1, 20(S)-Rg2, 20(R)-Rg2, 20(S)-Rg3, 20(R)-Rg3, 20(S)-Rh1, 20(S)-Rh2, 20(R)-Rh2, F1, F2, F4, Ra1, Rg6, Rh4, Rk3, Rg5, Rk1, Rb3, Rk2, Rh3, compound Y, compound K, and notoginsenoside R1) in Panax ginseng preparations was developed and validated by an ultra performance liquid chromatography photo diode array detector. The separation of the 30 ginsenosides was efficiently undertaken on the Acquity BEH C-18 column with gradient elution with phosphoric acids. Especially the chromatogram of the ginsenoside Ro was dramatically enhanced by adding phosphoric acid. Under optimized conditions, the detection limits were 0.4 to 1.7 mg/L and the calibration curves of the peak areas for the 30 ginsenosides were linear over three orders of magnitude with a correlation coefficients greater than 0.999. The accuracy of the method was tested by a recovery measurement of the spiked samples which yielded good results of 89% to 118%. From these overall results, the proposed method may be helpful in the development and quality of P. ginseng preparations because of its wide range of applications due to the simultaneous analysis of many kinds of ginsenosides.
Background: Zinc homeostasis is essential for human health and is regulated by several zinc transporters including ZIP and ZnT. ZIP4 is expressed in the small intestine and is important for zinc absorption from the diet. We investigated in the present study the effects of Panax ginseng (P. ginseng) extract on modulating Zip4 expression and cellular zinc levels in mouse Hepa cells. Methods: Hepa cells were transfected with a luciferase reporter plasmid that contains metal-responsive elements, incubated with P. ginseng extract, and luciferase activity was measured. Using 65ZnCl2, zinc uptake in P. ginseng-treated cells was measured. The expression of Zip4 mRNA and protein in Hepa cells was also investigated. Finally, using a luciferase reporter assay system, the effects of several ginsenosides were monitored. Results: The luciferase activity in cells incubated with P. ginseng extract was significantly higher than that of control cells cultured in normal medium. Hepa cells treated with P. ginseng extract exhibited higher zinc uptake. P. ginseng extract induced Zip4 mRNA expression, which resulted in an enhancement of Zip4 protein expression. Furthermore, some ginsenosides, such as ginsenoside Rc and Re, enhanced luciferase activity driven by intracellular zinc levels. Conclusion: P. ginseng extract induced Zip4 expression at the mRNA and protein level and resulted in higher zinc uptake in Hepa cells. Some ginsenosides facilitated zinc influx. On the basis of these results, we suggest a novel effect of P. ginseng on Zip4-mediated zinc influx, which may provide a new strategy for preventing zinc deficiency.
열처리(熱處理)가 홍삼(紅蔘)엑기스의 성분변화(成分變化)에 미치는 영향(影響)을 조사(調査)하기 위하여 저온(低溫)에서 추출(抽出), 조제(調劑)된 홍삼(紅蔘)엑기스를 각온도별(各溫度別)로 $40^{\circ}Bx$까지 농축(濃縮)하고 다시 온도별(溫度別), 시간별(時間別)로 숙성(熟成)시켜 숙성과정중(熟成過程中)에 일어나는 pH, 당(糖), saponin 및 색상(色相) 등을 조사(調査)하여 다음과 같은 유의성(有意性)있는 결과(結果)를 얻었다. (1) 홍삼(紅蔘)엑기스의 pH는 농축(濃縮) 및 숙성(熟成)중에 차차 감소(減少)하였으며 $100^{\circ}C$에서 96시간(96時間)까지 숙성(熟成)하면 pH가 4.15까지 감소(減少)하였다. (2) HPLC에 의한 방법(方法)으로 rhamnose, glucose, fructose, sucrose, maltose 둥의 당(糖)을 동정(同定) 및 정량(定量)하였으며 $100^{\circ}C$에서의 당(糖)의 변화(變化)는 sucrose가 30시간(30時間)에서 95%이상 감소(減少)하였고 glucose는 50시간(50時間)까지는 증가(增加)하다가 감소(減少)하였고 fructose는 10시간(10時間)까지 약간 증가(增加)되다가 감소(減少)하였으며 rhamnose는 큰 변화(變化)가 없었다. (3) 수삼(水蔘)이나 백삼(白蔘)에는 없는 rhamnose가 홍삼(紅蔘)엑기스중에서는 동정(同定)되었으며 이는 인삼중(人蔘中)의 일부 배당체(配糖體)의 분해(分解)에 의한 것으로 생각되며 온도(溫度)의 변화(變化)에 따라 큰 변화(變化)가 없는 것으로 보아 다른 당(糖)에 비(比)해 amino-carbonyl 반응(反應)에 적게 관여(關與)하는 것으로 생각된다. (4) 열처리중(熱處理中)의 홍삼(紅蔘)엑기스중의 saponin은 ginsenoside-Re와 $-Rg_1$이 감소(減少)하는 반면(反面) $ginsenoside-Rg_2$와 -Rh group은 증가(增加)되어 saponin group간(間)의 상호변환(相互變換)으로 추정(推定)할 수 있다. (5) 열처리(熱處理)에 의한 홍삼(紅蔘)엑기스의 갈변색소(褐變色素)는 벤젠층에 비해 부탄올층(層)이 약(約) 10배(10倍), 수층(水層)이 약(約) 100배(100倍)로 나타나 홍삼(紅蔘)엑기스의 갈변색소형성(褐變色素形成)은 비효소적(非酵素的) 갈변반응(褐變反應)인 amino-carbonyl 반응(反應)이 주도적(主導的) 역할(役割)을 하고 있음을 알 수 있다. (6) 총당(總糖)과 갈변반응속도(褐變反應速度)는 유의성(有意性)이 있었으며 $100^{\circ}C$의 경우 20시간(20時間)에 가장 색도(色度)가 높아 갈변반응속도(褐變反應速度)가 0.2로 나타났다.
홍삼사포닌분획의 항불안작용의 양상을 검색하고자 사포닌분획을 사용하여 실험 동물에서 항불안작용을 검색하고 이들의 작용을 benzodiazepine의 대표적 약물인 diazepam의 효과와 비교하여 보았다. 실험동물에서 항불안효과의 검정을 위하여 생쥐에게 각각 상이 한 단일성분 함량을 지닌 여러분획들을 투여 후 elevated plus maze법을 사용하여 항불안효과를 비교, 관찰하였다. 실험결과 홍삼 ginsenoside Rg1, Rf 및 Re 등의 함량이 보다 높은 TSI 분획에서 항불안 효과를 관찰하였다. 중추신경계에 작용하여 진정효과를 나타내는 약물 중 특히 항불안제의 작용에 관여하는 신경전달물질 수용체로 현재까지 가장 주목을 받고 있는 것은 GABA A-benzodiazepine 수용체-chloride통로 복합체에 있는 benzodiazepine 수용체이다. 본 실험결과 관찰한 홍삼 사포닌의 항불안작용의 기전 규명을 위한 접근방법으로 홍삼 사포닌의 benzodiazepine 수용체에 대한 수용체 결합력을 관찰하고자, 흰쥐의 대뇌 피질을 검체로 하여 benzodiazepine 수용체에 대한 [$^3H$] Ro15-1788 결합 실험을 실시하였다. 홍삼 사포닌 분획들은 benzodiazpine 수용체에 결합하는 반응성을 보였으며, ginsenoside Rb, Re 및 Rd등의 함량이 높은 TSIV 분획이 가장 높은 결합력을 나타내었는데, 이 분획에서는 항불안 작용을 관찰할 수 없었다. 이상의 결과에서 볼 때 홍삼사포닌은 항불안작용을 나타내었으며, 이 항불안작용과 benzodiazepine 수용체에 대한 결합력과의 연관성은 관찰되지 않았다.
인삼(人蔘)의 근(根) 엽(葉) 및 경(莖)에서 사포닌 추출과정중(抽出過程中) 지용성(脂溶性) 용매류(溶媒類)에 따른 콜로르필 및 색소류(色素類) 등 가시부(加視部) 흡수물질(吸收物質)의 정제효과와 사포닌의 수율(收率)에 미치는 영향을 조사(調査)하였다. 근(根)사포닌의 정제(精製)는 여러 지용성(脂溶性) 용매류(溶媒類)가 효과적이었고, 엽(葉)과 경(莖)사포닌의 정제(精製)는 chloroform과 benzene이 효과적이었다. 또한 지상부(地上部)사포닌의 경우는 ethyl acetate, ethyl ether, chloroform 및 benzene으로 1회씩 순차적(順次的)으로 정제(精製)할 경우가 단일용매만으로 4회 추출하는 편보다는 효과적이었으며 지용성(脂溶性) 용매류(溶媒類)에 따른 사포닌 수율(收率)은 거의 차이가 없었다. 한편 조사포닌 분획물 및 ginsenoside 함량을 볼때 엽(葉)에 있어서는 $18.5{\sim}19.5%$ 및 $10.8{\sim}11.4%$로서 근(根)의 $4.6{\sim}5.1%$ 및 $2.0{\sim}2.6%$나 경(莖)의 $2.2{\sim}2.5%$및 $0.63{\sim}0.67%$에 비하여 현저하게 높았다 따라서 인삼엽(人蔘葉)은 사포닌 화합물(化合物)이나 $ginsenoside-Rg_1,\;-Re,\;-Rd,\;-Rc,\;-Rb_2,\;-Rf$ 등의 분리용(分離用) 원료(原料)로 매우 적합하였다.
인삼갈변기작을 연구하기에 앞서 인삼갈변에 따른 갈색도 및 성분변화에 대해 조사한 결과는 다음과 같다. $100^{\circ}C$에서 120시간까지 열처리하여도 갈색화반응은 계속 지속되었으며 갈변에 대한 활성화에너지는 약 16kcal/mole, $Q_{10}$값은 평균치가 $70{\sim}80^{\circ}C$에서는 1.90, $80{\sim}90^{\circ}C$에서는 1.67, $90{\sim}100^{\circ}C$에서는 1.46이었다. 반응액의 pH는 $90^{\circ}C$와 $100^{\circ}C$의 경우 약간씩 증가하는 경향이었다. 인삼사포닌 중에는 ginsenoside-Re가 열에 불안정하였으며 diol계 사포닌은 비교적 열에 안정하였다. 항산화능과 DNA 양성물질량은 온도가 높을수록, 반응시간이 경과할수록 증가하였으며, folin 양성물질량은 반응초기에 단백질의 침전과 함께 감소했다가 서서히 증가하였다.
Lee, Sang Myung;Bae, Bong-Seok;Park, Hee-Weon;Ahn, Nam-Geun;Cho, Byung-Gu;Cho, Yong-Lae;Kwak, Yi-Seong
Journal of Ginseng Research
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제39권4호
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pp.384-391
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2015
It has been reported that Korean Red Ginseng has been manufactured for 1,123 y as described in the GoRyeoDoGyeong record. The Korean Red Ginseng manufactured by the traditional preparation method has its own chemical component characteristics. The ginsenoside content of the red ginseng is shown as Rg1: 3.3 mg/g, Re: 2.0 mg/g, Rb1: 5.8 mg/g, Rc:1.7 mg/g, Rb2: 2.3 mg/g, and Rd: 0.4 mg/g, respectively. It is known that Korean ginseng generally consists of the main root and the lateral or fine roots at a ratio of about 75:25. Therefore, the red ginseng extract is prepared by using this same ratio of the main root and lateral or fine roots and processed by the historical traditional medicine prescription. The red ginseng extract is prepared through a water extraction ($90^{\circ}C$ for 14-16 h) and concentration process (until its final concentration is 70-73 Brix at $50-60^{\circ}C$). The ginsenoside contents of the red ginseng extract are shown as Rg1: 1.3 mg/g, Re: 1.3 mg/g, Rb1: 6.4 mg/g, Rc:2.5 mg/g, Rb2: 2.3 mg/g, and Rd: 0.9 mg/g, respectively. Arginine-fructose-glucose (AFG) is a specific amino-sugar that can be produced by chemical reaction of the process when the fresh ginseng is converted to red ginseng. The content of AFG is 1.0-1.5% in red ginseng. Acidic polysaccharide, which has been known as an immune activator, is at levels of 4.5-7.5% in red ginseng. Therefore, we recommended that the chemical profiles of Korean Red Ginseng made through the defined traditional method should be well preserved and it has had its own chemical characteristics since its traditional development.
Background: Main bioactive constituents and pharmacological functions of ripened red ginseng berry (Panax ginseng Meyer) have been frequently reported. Yet, the research gap targeting the beneficial activities of transformed green ginseng berries has not reported elsewhere. Methods: Ginsenosides of new green berry cultivar K-1 (GK-1) were identified by HPLC-QTOF/MS. Ginsenosides bioconversion in GK-1 by bgp1 enzyme was confirmed with HPLC and TLC. Then, mechanisms of GK-1 and β-glucosidase (bgp1) biotransformed GK-1 (BGK-1) were determined by Quantitative Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction and Western blot. Results: GK-1 possesses highest ginsenosides especially ginsenoside-Re amongst seven ginseng cultivars including (Chunpoong, Huangsuk, Kumpoong, K-1, Honkaejong, Gopoong, and Yunpoong). Ginseng root's biomass is not affected with the harvest of GK-1 at 3 weeks after flowering period. Then, Re is bioconverted into a promising pharmaceutical effect of Rg2 via bgp1. According to the results of cell assays, BGK-1 shows decrease of tyrosinase and melanin content in α-melanocyte-stimulating hormone challenged-murine melanoma B16 cells. BGK-1 which is comparatively more effective than GK-1 extract shows significant suppression of the nuclear factor (NF)-κB activation and inflammatory target genes, in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. Conclusion: These results reported effective whitening and anti-inflammatory of BGK-1 as compared to GK-1.
Yang Zhang;Jiulong Ma;Shan Liu;Chen Chen;Qi Li;Meng Qin;Liqun Ren
Journal of Ginseng Research
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제47권1호
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pp.106-116
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2023
Background: Pirarubicin (THP) is an anthracycline antibiotic used to treat various malignancies in humans. The clinical usefulness of THP is unfortunately limited by its dose-related cardiotoxicity. Ginsenoside F1 (GF1) is a metabolite formed when the ginsenosides Re and Rg1 are hydrolyzed. However, the protective effects and underlying mechanisms of GF1 on THP-induced cardiotoxicity remain unclear. Methods: We investigated the anti-apoptotic and anti-oxidative stress effects of GF1 on an in vitro model, using H9c2 cells stimulated by THP, plus trigonelline or AKT inhibitor imidazoquinoxaline (IMQ), as well as an in vivo model using THP-induced cardiotoxicity in rats. Using an enzyme-linked immunosorbent test, the levels of malondialdehyde (MDA), brain natriuretic peptide (BNP), creatine kinase (CK-MB), cardiac troponin (c-TnT), lactate dehydrogenase (LDH), superoxide dismutase (SOD) and glutathione (GSH) were determined. Nuclear factor (erythroid-derived2)-like 2 (Nrf2) and the expression of Nrf2 target genes, including heme oxygenase-1 (HO-1), glutathione-S-transferase (Gst), glutamate-cysteine ligase modifier subunit (GCLM), and expression levels of AKT/Bcl-2 signaling pathway proteins were detected using Western blot analysis. Results: THP-induced myocardial histopathological damage, electrocardiogram (ECG) abnormalities, and cardiac dysfunction were reduced in vivo by GF1. GF1 also decreased MDA, BNP, CK-MB, c-TnT, and LDH levels in the serum, while raising SOD and GSH levels. GF1 boosted Nrf2 nuclear translocation and Nrf2 target gene expression, including HO-1, Gst, and GCLM. Furthermore, GF1 regulated apoptosis by activating AKT/Bcl-2 signaling pathways. Employing Nrf2 inhibitor trigonelline and AKT inhibitor IMQ revealed that GF1 lacked antioxidant and anti-apoptotic effects. Conclusion: In conclusion, GF1 was found to alleviate THP-induced cardiotoxicity via modulating Nrf2 and AKT/Bcl-2 signaling pathways, ultimately alleviating myocardial oxidative stress and apoptosis.
In previous reports we demonstrated that ginsenosides, active ingredients of Panax ginseng, affect some subsets of voltage-dependent $Ca^{2+}$ channels in neuronal cells expressed in Xenopus laevis oocytes. However, the major component(s) of ginseng that affect cloned $Ca^{2+}$ channel subtypes such as ${\alpha}_{1C}$(L)-, ${\alpha}_{1B}$(N)-, ${\alpha}_{1A}$(P/Q)-, ${\alpha}_{1E}$(R)- and ${\alpha}_{1G}$(T) have not been identified. Here, we used the two-microelectrode voltage clamp technique to characterize the effects of ginsenosides and ginsenoside metabolites on $Ba^{2+}$ currents ($I_{Ba}$) in Xenopus oocytes expressing five different $Ca^{2+}$ channel subtypes. Exposure to ginseng total saponins (GTS) induced voltage-dependent, dose-dependent and reversible inhibition of the five channel subtypes, with particularly strong inhibition of the ${\alpha}_{1G}$-type. Of the various ginsenosides, $Rb_1$, Rc, Re, Rf, $Rg_1$, $Rg_3$, and $Rh_2$, ginsenoside $Rg_3$ also inhibited all five channel subtypes and ginsenoside $Rh_2$ had most effect on the ${\alpha}_{1C}$- and ${\alpha}_{1E}$-type $Ca^{2+}$ channels. Compound K (CK), a protopanaxadiol ginsenoside metabolite, strongly inhibited only the ${\alpha}_{1G}$-type of $Ca^{2+}$ channel, whereas M4, a protopanaxatriol ginsenoside metabolite, had almost no effect on any of the channels. $Rg_3$, $Rh_2$, and CK shifted the steady-state activation curves but not the inactivation curves in the depolarizing direction in the ${\alpha}_{1B}$- and ${\alpha}_{1A}$-types. These results reveal that $Rg_3$, $Rh_2$ and CK are the major inhibitors of $Ca^{2+}$ channels in Panax ginseng, and that they show some $Ca^{2+}$ channel selectivity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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