Human caliciviruses (HuCVs) cause sporadic cases and outbreaks of acute gastroenteritis (AGE). Three major genogroups of HuCVs have been described including the Norwalk virus (NV)-, the Snow Mountain virus (SMA)-, and the Sapporo-genogroups. This study describes the detection and genetic variation of HuCVs from hospitalized infants with AGE in Korea by RT-PCR and sequencing. The cDNA fragments of 206 to 470bp corresponding to the region of 3 primer pairs (36/35, 35/51 or 3/51) in the polymerase region of NV were generated. Of 185 stools screened, 8% were positive by RT-PCR and their sequences showed that all strains contained the GLPSG and YGDD motifs which are conserved for HuCVs. Amino acid (aa) sequence analysis showed that these strains can be divided into 3 major genogroups. High conservation was observed in that one strain shares 100% of aa sequence with Southampton virus, another shares 99% with the Sapporo virus, and six strains share 90 to 95% with Snow Mountain virus. However, significant sequence variation was also found in other strains. This study indicates that all major genogroups of HuCVs are circulating in Korea.
Background: Feline calicivirus (FCV) is widespread throughout the world. An FCV infection is associated with conjunctivitis, rhinitis, and mouth ulcers that can lead to the animal's death. Because vaccination is not always effective, it is necessary to monitor the infection regularly. Objectives: This study examined the FCV epizootic situation in the Moscow metropolitan area by conducting a molecular phylogenetic analysis of the virus isolates. Methods: Samples from 6213 animals were examined by a reverse transcription polymerase chain reaction. For phylogenetic analysis, 12 nucleotide sequences obtained from animal samples were selected. Sequencing was performed using the Sanger method. Phylogenetic analysis was conducted using the Maximum Likelihood method. Results: The FCV genome was detected in 1,596 (25.7%) samples out of 6,213. In 2018, calicivirus was detected in 18.9% of samples, 27.8% in 2019, 21.4% in 2020, and 32.6% in 2021. Phylogenetic analysis of the F ORF2 region and the ORF3 start region led to division into two FCV genogroups. Most of the isolates (8 out of 12) were close to the Chinese strains. On the other hand, there were isolates closely related to European and American strains. The isolates circulating in Moscow were not included in clusters with vaccine strains; their nucleotide similarity varied from 77% to 83%. Conclusions: This study revealed a high prevalence and genetic diversity of the FCV in Moscow. The epizootic situation remains stably tense because 24 viruses were detected in 25% of animals annually.
Kim, Sung Jae;Kim, Cheongung;Chung, Hee Chun;Park, Yong Ho;Park, Kun Taek
Journal of Veterinary Science
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v.22
no.3
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pp.32.1-32.8
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2021
Feline calicivirus (FCV) is a highly infectious pathogen in cats and widely distributed worldwide with high genetic variation. Full-length open reading frame 2 of 5 from recently isolated Korean FCV isolates were sequenced and compared with those of global isolates. The results of phylogenetic analysis supported dividing global FCV isolates into two genogroups (type I and II) and demonstrated the presence of genogroup II in Korea, indicating their geographic spread in East Asia. High sequence variations in region E of the FCV isolates emphasizes that a novel vaccine needs to be developed to induce protective immunity against various FCV strains.
Twenty isolates of Hantavirus were isolated from patients and reserovirs from 1988 to 1994 in Korea. Isolation rate was 1.9% (10/538) in patients, 6.2% (5/81) in Apodemus sp., 2.6% (1/38) in Rattus sp. and 0.6% (4/677) in bats. Reciprocal mean IFA titers ranged from 27.5 to 1,024 at the specimen collection. According to the growth rate and reaching peak titier of infectivity, the isolates were grouped as rapid, intermediate, and slow growing groups. All isolates were confirmed as Hantaan type by the nested RT-PCR on the G1 region of the M segment. Comparison of nucleotide sequence (Nt: 2101 - Nt: 2280) of the G2 region revealed that the sequence homology bewteen Hantaan 76/118 virus and the isolates was more than 90%. Several nucleotide positions of the isolates showed high variation. The variation rate of patientisolates was about one-half when compared with that of rodentisolates. On the basis of phylogenetic analysis Hantaan viruses isolated were divided into two genogroups. These results indicate that Hantaan virus is highly dominant serotype in Korea and the virologic property and genogroup are not correlated.
Yoo, Ju Eun;Lee, Cheonghoon;Park, SungJun;Ko, GwangPyo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.27
no.4
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pp.816-824
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2017
Human noroviruses are widespread and contagious viruses causing nonbacterial gastroenteritis. Real-time reverse transcription quantitative PCR (real-time RT-qPCR) is currently the gold standard for the sensitive and accurate detection of these pathogens and serves as a critical tool in outbreak prevention and control. Different surveillance teams, however, may use different assays, and variability in specimen conditions may lead to disagreement in results. Furthermore, the norovirus genome is highly variable and continuously evolving. These issues necessitate the re-examination of the real-time RT-qPCR's robustness in the context of accurate detection as well as the investigation of practical strategies to enhance assay performance. Four widely referenced real-time RT-qPCR assays (Assays A-D) were simultaneously performed to evaluate characteristics such as PCR efficiency, detection limit, and sensitivity and specificity with RT-PCR, and to assess the most accurate method for detecting norovirus genogroups I and II. Overall, Assay D was evaluated to be the most precise and accurate assay in this study. A ZEN internal quencher, which decreases nonspecific fluorescence during the PCR, was added to Assay D's probe, which further improved the assay performance. This study compared several detection assays for noroviruses, and an improvement strategy based on such comparisons provided useful characterizations of a highly optimized real-time RT-qPCR assay for norovirus detection.
Norovirus (NoV) is a major cause of food poisoning outbreaks in Korea. Most NoV outbreaks originate from environmental contamination, but bivalves such as oysters are also important vectors. Oyster Crassostrea gigas contamination by NoV has been reported in Korea, but no quantitative analyses of NoV have been performed. We investigated the NoV concentration in 21 oyster samples from a Korean commercial oyster-growing area with confirmed fecal contamination from January to December 2012, using real-time reverse transcription-polymerase chain reaction. Additionally, we assessed the NoV concentration after heating to investigate the effects of heat treatment on NoV-infected oysters. In NoV-positive samples, the cycle threshold (Ct) values were 37.43-39.41 and 36.77-39.30, while viral concentrations were $8.97{\times}10^2-2.24{\times}10^2$ and $3.05{\times}10^2-7.47{\times}10^1$ copies/g for genogroups I and II, respectively. After heat treatment, NoV genogroup I decreased by 83.4%, 88.0%, 89.4% and 100% at $60^{\circ}C$, $68^{\circ}C$, $70^{\circ}C$, and $100^{\circ}C$, respectively, for 15 min, while genogroup II respectively decreased by 67.3%, 76.3%, 80.1%, and 89.8% under the same conditions.
Sequence comparison of the RNA-dependent RNA polymerase of human caliciviruses (HuCVs) from Korean children with gastroenteritis revealed significant genetic variation among them. cDNA clones were produced from the HuCVs collected from pediatric population during a period of 1987-1994. The application of reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) using primers directed to the RNA-dependent RNA polymerase region within ORF1 of Norwalk virus (NV) showed that 13.7% of HuCVs yielded PCR products of similar size to the NV prototype, NV8FIIa/68/US, with exceptions of HuCV 185/87/Korea and HuCV 1115/90/Korea. Computer analyses showed that the PCR products had a continuous protein encoding frame on the positive strand, and contained GLPSG and YGDD amino acid motifs at the predicted distance from primers. Alignment of the amino acid sequences of HuCVs with previously published sequences for Snow Mountain agent (SMA), NV, and Sapporo/82/Japan indicated that these strains can be divided into four major genogroups. There were 10 (45%) SMA-like CVs, one (4.5%) NV-like HuCVs, two (9%) Sapporo-like HuCVs, and nine (41%) unidentified HuCVs. This fourth genogroup should be investigated further. HuCV 185/87/Korea and HuCV 1115/90/Korea, Sapporo-like CVs, were genetically distinct from previously characterized HuCVs and more closely related to known animal CVs. One of the animal CV-like strain, HuCV 185/87/Korea, showed nucleotide and amino acid homology of only 67% and 73% with the prototype Sapporo/82/Japan. Further characterization of animal and human CV genomes and studies of possible cross-transmission of CVs from animals to humans are likely to be beneficial in understanding the epidemiology of HuCVs.
So, Cheol Whoan;Kim, Dong Sup;Yu, Seung Taek;Cho, Ji-Hyun;Kim, Jong Duck
Clinical and Experimental Pediatrics
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v.56
no.9
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pp.383-388
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2013
Purpose: Viral etiology is common in cases of children with acute diarrhea, and antibiotic therapy is usually not required. Therefore, it is important to determine the distribution of common viruses among children hospitalized with acute diarrhea. Methods: We included 186 children who suffered from acute diarrhea and were hospitalized at the Wonkwang University Hospital Pediatric ward from December 1, 2010 to June 30, 2011 in this study. Stool samples were collected and multiplex reverse transcriptase polymerase chain reaction (multiplex RT-PCR) was used to simultaneously determine the viral etiology such as rotavirus, norovirus, astrovirus, or adenovirus. Results: Causative viruses were detected in 72 of the 186 cases (38.7%). The mean age of the virus-positive cases was 1 year and 9 months (range, 1 month to 11 years). Rotavirus was detected in 50/186 (26.9%); norovirus, in 18/186 (9.7%); and astrovirus, in 3/186 cases (1.6%). Adenovirus was not detected in any of the cases. Proportions of norovirus genogroups I and II were 21.1% and 78.9%, respectively. Four of the 51 rotavirus-positive cases (7.8%) had received rotavirus vaccination at least once. The mean duration of diarrhea was 2.8 days (range, 1 to 10 days) and vomiting occurred in 39 of the 72 cases (54.2%). Conclusion: Viral etiology was confirmed in about one-third of the children with acute diarrhea, and the most common viral agent was rotavirus, followed by norovirus.
Lee, Gyu-Cheol;Kim, Min-Jeong;Kim, Jong Ik;Lee, Chan Hee
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.24
no.4
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pp.556-562
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2014
The occurrence of human norovirus (NoV) genogroup I (GI) and genogroup II (GII) strains was investigated in Korea. Between 2007 and 2010, 265 samples were collected from 89 Korean water source locations. NoV GI was detected in 4.5% and NoV GII in 1.5%. Samples collected in winter had the highest occurrence; 9.4% for NoV GI and 6.3% for NoV GII. NoV GI detection was highest in groundwater, with the next highest in river water and the lowest in lake water (5.9%, 5.4%, and 1.6%, respectively), and NoV GII was found only in river water. When three representative Korean basin systems (Han (H)-, Geum/Seom (G/S)-, and Nakdong (N)-river basins) were compared, both NoV genogroups were high in the G/S-, but absent in the H- river basin. The most prevalent genotypes within the GI and GII groups were GI.5 and GII.4, respectively. The NoVs found in surface water were identical to those found in patients and those found in groundwater. The NoVs appeared to be transmitted from the patient to the surface water, and then to the groundwater, suggesting a fecal-oral route of transmission. This is the first nationwide surveillance of NoV in major Korean water sources.
For detection of noroviruses (NVs), we compared various PCR primer sets based on reverse transcription nested PCR (RT-nested PCR) in the water samples from Dong brook in Busan, South Korea. We designed various new primer sets based on the most conserved sequences of the capsid protein gene that react with diverse NVs found in Korea. Designed primer sets (KG1F/KG1R and KG2F/KG2R, named as PNK) for the respective genogroups of NVs, genogroup I and II (GI and GII), were applied to detect NVs in the water samples from Dong brook concentrated with ultracentrifugation. In the application to the water samples, proportion of GI (76.47%) and GII (70.59%) in water samples of Dong brook in RT-nested PCR with the primer sets of this study. However, no significant differences of the proportion of the positive samples were not found between RT-nested PCRs with reported and newly designed primer sets. From the nucleotide sequencing, GI and GII of NVs present in Dong brook were appeared to be the members of 1/2/4/5/9/10 genotypes, and 3/4/5/11/13 genotypes respectively. Appeared genotype 4 of GII known as an one of main genotype found in patients of many Asian countries warned us to consider the risks of norovirus in aquatic environments in southern part of Korea.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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