The SNF2/SW12 family comprises proteins from a variety of species with in vivo functions, such as transcriptional regulation, maintenance of chromosome stability during mitosis, and various types of DNA repair. This study was shown the characterization of hrp2+ gene which was isolated by PCR amplification using the conserved domain of SNF2 motifs. Sequence analysis of hrp2+ gene showed striking evolutionary conservation among the SNF2 family of proteins. The transcript of hrp2+ gene was found to be a 4.7 kb as identified by Northern hybridization. In addition, to determine the transcription initiation site of hrp2+ gene, primer extension analysis was performed. This result showed the band of 64 bp. The transcriptional start point was mapped to a position of 47 base pair from the first ATG codon of translational initiation codon. In order to investigate the inducibility of hrp2+ gene, transcript levels were examined after treating the cells to various DNA damaging agents. The transcripts of hrp2+ were induced by UV-irradiation. But the transcripts were not induced by treatment of 0.25% Methylmethane sulfonate (MMS). These results implied that the effects of damaging agents are complex and different regulatory pathways exist for the induction of this gene.
MicroRNAs (miRNAs) act as regulators of gene expression by binding to the 3' untranslated region (UTR) of target genes. They perform important biological functions in the various species. Among many miRNAs, miR-21-3p is known to serve vital functions in development and apoptosis in olive flounder. Using genomic and bioinformatic tools, evolutionary conservation of miR-21-3p was examined in various species, and expression pattern was analyzed in olive flounder. Conserved sequences (5'-CAGUCG-3') in numerous species were detected through the stem-loop structure of miR-21-3p. Thus, we analyzed target genes of miR-21-3p. Among them, 3' UTR region of PPIL2 gene indicated the highest binding affinity with miR-21-3p based on the minimum free energy value. The PPIL2 gene showed high expression levels in testis tissue of the olive flounder, whereas miR-21-3p showed rather ubiquitous expression patterns except in testis tissue, indicating that miR-21-3p seems to control the PPIL2 gene expression in a complementary repression manner in various tissues of olive flounder. Taken together, this current study contributes to infer the target gene candidates for the miR-21-3p using bioinformatics tools. Furthermore, our data offers important information on the relationship between miR-21-3p and target gene for further functional study.
In our greenhouse experiment, soil heat treatment groups (50, 80, and 121℃) significantly promoted growth and disease suppression of Panax notoginseng in consecutively cultivated soil (CCS) samples (p < 0.01), and 80℃ worked better than 50℃ and 121℃ (p < 0.01). Furthermore, we found that heat treatment at 80℃ changes the microbial diversity in CCS, and the inhibition ratios of culturable microorganisms, such as fungi and actinomycetes, were nearly 100%. However, the heat-tolerant bacterial community was preserved. The 16S rRNA gene and internal transcribed spacer (ITS) sequencing analyses indicated that the soil heat treatment had a greater effect on the Chao1 index and Shannon's diversity index of bacteria than fungi, and the relative abundances of Firmicutes and Proteobacteria were significantly higher than without heating (80 and 121℃, p < 0.05). Soil probiotic bacteria, such as Bacillus (67%), Sporosarcina (9%), Paenibacillus (6%), Paenisporosarcina (6%), and Cohnella (4%), remained in the soil after the 80℃ and 121℃ heat treatments. Although steam increased the relative abundances of most of the heat-tolerant microbes before sowing, richness and diversity gradually recovered to the level of CCS, regardless of fungi or bacteria, after replanting. Thus, we added heat-tolerant microbes (such as Bacillus) after steaming, which reduced the relative abundance of pathogens, recruited antagonistic bacteria, and provided a long-term protective effect compared to the steaming and Bacillus alone (p < 0.05). Taken together, the current study provides novel insight into sustainable agriculture in a consecutively cultivated system.
The objective of this study was to develop a simplified, efficient, and accurate protocol for sexing goat embryos. Based on the amelogenin gene located on the conservation region of X- and Y- chromosomes, a pair of primers was utilized and the system of PCR was established to amplify a 262 bp fragment from the X- chromosome in female goats, and a 262 bp fragment from X- chromosome and 202 bp fragment from the Y- chromosome in male goats, respectively. The accuracy and specificity of the primers were assessed using DNA template extracted from goat whole blood sample of known sex. 100% (10/10) concordance was obtained by using the PCR assay. Fifty-one biopsied embryos were transferred into 25 recipient goats on the same day that the embryos were collected and sex of the kid was confirmed after parturition. Eighteen kids of predicted sex were born. The biopsied samples from 51 goat embryos were amplified with 100% efficiency and 94.7% accuracy. In conclusion, our results indicated that PCR sexing protocols based on the amelogenin gene is highly reliable and suitable for sex determination of goats.
Muthulakshmi M.;Mohan B.;Balachandran N.;Sinha R. K.;Thangavelu K.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.11
no.2
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pp.93-98
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2005
Studies on extended egg preservation schedule from 120 days to 180 days was taken up with 20 germplasm accessions of mutant silkworm genetic stocks of Bombyx mori L. Statistical analyses of the data collected over three trials revealed no significant changes both in the qualitative and quantitative traits of the genetic stocks between treatment (6 months egg preservation) and control (4 months egg preservation), except for fifth instar larval duration in TMS-61, TMS-62, TMS64, TMS-31 and TMS-34 shell weight in TMS-62, TMS-64 and TMS-66. Thus, the results indicate that extended schedule of 6 months egg preservation can safely be adopted, which will reduce the cost of conservation and minimize the genetic erosion owing to reduced crop cycle.
The SNF2/SW12 family comprises proteins from a variety of species with in vivo functions, such as transcriptional regulation, maintenance of chromosome stability during mitosis, and various types of DNA repair. This study was shown the characterization of hrp2+ gene which was isolated by PCR amplification using the conserved domain of SNF2 motifs. Sequence analysis of hrp2+ gene showed striking evolutionary conservation among the SNF2 family of proteins. The transcript of hrp2+ gene was found to be a 4.7 kb as identified by Northern hybridization. To investigate the inducibility of hrp2+ gene, transcript levels were examined after treating the cells to various DNA damaging agents. The transcripts of hrp2+ were induced by UV-irradiation. But the transcripts were not induced by treatment of $ 0.25\%$ Methylmethane sulfonate (MMS). These results implied that the effects of damaging agents are complex and different regulatory pathways exist for the induction of this gene. Hrp2 protein was purified near homogeneity by combination of affinity chromatography. We tested the purified Hrp2 protein for the helicase activity in an oligonucleotide release assay. However we were unable to detect any helicase activity associated with the Hrp2 protein, indicating that the helicase motifs in Hrp2 are merely indicators of a broader DNA-dependent ATPase activity.
To add genetic information to the conservation efforts on grey coral (Naemorhedus caudatus) in Korea, we investigated the pattern of mitochondrial cytochrome b gene sequence (606 bp) of six specimens from two localities in Korea. The corresponding sequences of N. caudatus in China obtained from GenBank were also used. The nucleotide Tamura-Nei distances between each of four haplotypes of N. caudatus in Korea and the haplotype of N. caudatus in China varied from 0.0650 to 0.0803: N. caudatus revealed high level of sequence diversity in Bovidae. In N. caudatus in Korea, the distances among three haplotypes at Yanggu were 0.0151 to 0.0185, and it suggests that the genetic diversity of Yanggu population was decreased in low level. Moreover, the distances between each of three haplotypes at Yanggu and one haplotype at Samcheok were 0.0343 to 0.0489. It indicates that habitat isolation caused the continuous increase of genetic distance with geographic distance in N. caudatus, and various conservation plans for mitigating the loss of genetic diversity in Korea have to be in immediate action. To clarify the taxonomic status of N. caudatus, the sequence (276 bp) of N. goral available from GenBank were also utilized, and n goral was not distinct from N. caudatus. It suggests that they may be conspecific, but further analyses with additional specimens of two species are necessary.
Complementary DNA of the genomic RNA of odontoglossum ringspot virus Cymbidium strain (ORSV-Cy) was synthesized from polyadenylated viral RNA and cloned. Selected clones containing the viral RNA-dependent RNA polymerase gene of the virus has been sequenced by automated sequencing system. The complete nucleotide sequence of an open reading frame is 1377 base pairs in length, and encodes a protein of 458 amino acids about 52, 334 D. The 52 kD protein of ORSV shares four sequence motifs characteristic of viral RNA-dependent RNA polymerase. Comparison of the ORSV 52 kD protein sequence with that of other five viruses in tobamovirus group showed 76.0 to 60.7% homologies at the amino acid level and the conservation of the four motifs betwen the viruses.
Biotechnological research and development are moving at a very fast rate. The subject has assumed greatest importance in recent years in the development of agriculture and human health. The science of biotechnology has endowed us with new tools and tremendous power to create novel genes and genotypes of plants, animals and fish. The application of biotechnology in the fisheries sector is a relatively recent practice. Nevertheless, it is a promising area to enhance fish production. The increased application of biotechnological tools can certainly revolutionise our fish farming besides its role in biodiversity conservation. The paper briefly reports the current progress and thrust areas in the use of synthetic hormones in fish breeding, production of monosex, uniparental and polyploid individuals, molecular biology and transgenesis, biotechnology in aquaculture nutrition and health management, gene banking and the marine natural products.
The sirtuins are a protein family named after the first identified member, S. cerevisiae Sir2p. Sirtuins are protein deacetylases whose activity is dependent on $NAD^+$ as a cosubstrate. They are structurally defined by two central domains that together form a highly conserved catalytic center, which catalyzes the transfer of an acetyl moiety from acetyllysine to $NAD^+$, yielding nicotinamide, the unique metabolite O-acetyl-ADP-ribose and deacetylated lysine. One or more sirtuins are present in virtually all species from bacteria to mammals. Here we describe a phylogenetic analysis of sirtuins. Based on their phylogenetic relationship, sirtuins can be grouped into over a dozen classes and subclasses. Humans, like most vertebrates, have seven sirtuins: SIRT1-SIRT7. These function in diverse cellular pathways, regulating transcriptional repression, aging, metabolism, DNA damage responses and apoptosis. We show that these seven sirtuins arose early during animal evolution. Conserved residues cluster around the catalytic center of known sirtuin family members.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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