1. Back ground and purpose An experimental study has done to examine the effect of defense and cure gastric mucasal damage of Mokdan-pijihwang-tang. 2. Methods Mice had intragastric injected with MJ extract before indomethacin treatment which induces homorrhage infarct and erosion artificially. Degree of lipid peroxidation, general morphology, change of mucous cell, the distribution of PNA, ICAM and distribution of apoptotic cell were objected. (Abbreviation) MJ : Mokdanpijihwang-tang, PNA : Peanut Agglutinin, ICAM : Intercellular Adhesion Molecule 3 Results 1) The degree of lipid peroxidation in INDO-group had increased conspicuously than control group. But the degree of lipid peroxidation in MJ-group had decreased than INDO-group and these decline had probability. 2) After indomethacin treatment, hemorrhage infarct and erosion had increased in stomach body. But in MJ-group, the configuration is normal, except the group intragastric injected with MJ extract at hour 24 before indomethacin treatment. 3) Surface mucous cell and neck mucous had disappeared in INDO-group. But in MJ-group tormal distribution had shown like control group except the group intragastric injected with MJ extract at hour 24 before indomethacin treatment. 4) PNA positive reaction had not shown in INDO-group. But medium PNA positive reaction had shown In Mj-group. 5) ICAM positive reacted cell had shown in INDO-group. The decrease of ICAM positive cell were shown than INDO-group. 6) A number of apoptotic cell was distributed in hemorrhagic erosion. A few number of apoptotic cell was distributed in MJ-group except some surface mucous. 4. Conclusion These results suggest that MJ has an effect on cure of gastric mucosal damage.
Objective: Alcohol is known to cause inflammation in the stomach by decreasing the protective substances of the gastric mucosa and increasing oxidative stress. The purpose of this study was to investigate the anti-inflammatory effect of Artemisiae Argyi Folium extract (AF) on alcohol-induced gastritis. Methods: The total polyphenol and flavonoid contents of AF were confirmed through an in vitro experiment. Radical scavenging activities were confirmed using DPPH and ABTS assays. In vivo experiments were conducted on mice divided into 5 groups (n=8): a normal group (Nor), an alcohol-induced gastritis group (Con), an alcohol-induced gastritis group administered 10 mg/kg sucralfate (SC), an alcohol-induced gastritis group administered 100 mg/kg AF (AFL), and an alcohol-induced gastritis group administered 200 mg/kg AF(AFH). The serum levels of reactive oxygen species (ROS) were determined, and protein expressions were confirmed in gastric tissues. Results: In alcohol-induced gastritis, AF alleviated damage to the gastric mucosa caused by alcohol. AF also decreased the serum ROS levels. Western blots showed that AF decreased the expression of NADPH oxidase and decreased the expression of the NF-κB pathway associated with inflammation. AF also decreased the expression of adhesion molecules and chemokine proteins, and increased the expression of anti-inflammatory proteins. Conclusions: AF not only reduced oxidative stress in alcohol-induced gastritis, but it also relieved gastric mucosal inflammation by regulating the expression of the NF-κB pathway.
H. pylori 유래의 위장 질환에 대한 예방 및 치료에 대체할 수 있는 방법으로 감염 원인균의 부착 억제와 탈착이 가능한 물질의 사용이 타당성 조사 및 그 기초연구를 목적으로 조사하였다. 우선, 닭에 면역접종을 하여 면역접종 횟수에 따른 IgG 항체의 증가를 확인하여 면역접종을 하지 않은 군에 비해 10배 이상 H. pylori에 대한 항체가 생산되는 것을 확인하였다. H. pylori가 위 상피세포에 결합하는 현상이 H. pylori의 감염에 중요한 첫 단계라는 점에 착안하여 H. pylori의 위벽세포에 대한 결합의 특성을 조사하는 한편, 여러가지 부착 억제 후보물질을 이용하여 단독 또는 H. pylori에 대한 난황 항체와 함께 H. pylori의 부착 억제 정도를 실험하였다. 부착 억제 실험의 결과, 난황 항체를 이용하여 H. pylori(NCTC11637, ATCC43526)가 AGS에 부착하는 것을 저해가 가능하였으며 NCTC11637와 ATCC43526 모두 균체 및 외막단백으로 면역접종하여 생산된 항체의 경우 0.5 mg/mL의 농도로 NCTC11637은 80%, ATCC43526은 60% 정도의 부착 억제를 하는 것으로 나타났다. 탈착 실험의 결과도 면역접종을 실시한 난황 항체가 40-60% 정도의 탈착 효과를 보였으며 균체 자체와 외막 단백을 항원으로 사용한 군 사이의 탈착력 차이는 크지 않았다. 그러나 이러한 결과들이 사용 균주에 따라, 특히 분리 균주를 이용한 경우에는 상이한 결과들이 나타나므로 항체를 이용한 경우에는 더 많은 연구가 필요할 것으로 사료된다. 그러나 난황 항체는 식품성분의 하나로서 안정성의 면에서 매우 유리하고 대량 생산이 가능하므로 특이적 항체를 많이 생산할 수 있는 항원의 개발과 함께 정제도를 높인다면 더욱 좋은 효과를 기대할 수 있을 것이다. 그러나 외국의 다른 연구에서 보고된 경우와 같이 in vitro에서 유효한 물질이 in vivo에서 효과가 없는 경우도 종종 보고되고 있어 지금까지 탐색한 물질의 in vivo에서의 부착 억제 효과에 대한 진단도 함께 이루어져야 할 것으로 사료되며 또한 앞서 기술한 바와 같이 H. pylori의 결합에 관계하는 receptors 및 ligands가 어떤 특정한 한가지가 아니라 여러 가지의 복합적인 물질이 관여하는 것이기 때문에 여기에 대해서는 더 많은 연구가 뒷받침되어야 할 것이다.
Objective: To investigate changes in the invasive capacity of gastric cancer cells in vitro after expression inhibition of T lymphoma invasion and metastasis inducing factor 1 (Tiam 1) and underlying mechanisms. Methods: Using adhesion selection, two subpopulations with high ($M_H$) or low ($M_L$) invasive capacity were separated from the human gastric cancer cell line MKN-45 ($M_0$). Tiam 1 antisense oligodeoxynucleotide (ASODN) was transfected into $M_H$ cells with liposomes, and expression of Tiam 1 mRNA and protein was determined by RT-PCR and quantitative cellular-ELISA. Changes in the cytoskeleton, invasive capacity in vitro and expression of ras-related $C_3$ botulinum toxin substrate 1 (Rac 1), integrin ${\beta}1$ and matrix metalloproteinase 2 (MMP 2) between Tiam 1 ASODN transfected $M_H$ cells and non-transfected cells were observed by HE staining, cytoskeletal protein staining, scanning electron microscopy, Boyden chamber tests and cyto-immunohistochemistry. Results: A positive correlation existed between the expression level of Tiam l mRNA or protein and the invasion capacity of gastric cancer cells. After ASODN treatment ($0.43{\mu}M$ for 48 h), Tiam 1 mRNA transcription and protein expression in $M_H$ cells were decreased by 80% and 24% respectively (P < 0.05), compared with untreated controls, while invasive capacity in vitro was suppressed by 60% (P < 0.05). Morphologic and ultrastructural observation also showed that ASODN-treated $M_H$ cells exhibited smooth surfaces with obviously reduced filopodia and microspikes, which resembled $M_0$ and $M_L$ cells. Additionally, cytoskeletal distribution dramatically altered from disorder to regularity with reduced long filament-like structure, projections, pseudopodia on cell surface, and with decreased acitn-bodies in cytoplasm. After Tiam 1 ASODN treatment, the expression of Rac 1 and Integrin ${\beta}1$ in $M_H$ cells was not affected (P > 0.05), but that of MMP 2 in $M_H$ cells was significantly inhibited compared with untreated cells (P < 0.05). Conclusion: Over-expression of Tiam-1 contributes to the invasive phenotype of gastric cancer cells. Inhibition of Tiam 1 expression could impair the invasive capacity of gastric cancer cells through modulating reconstruction of the cytoskeleton and regulating expression of MMP 2.
Kim, Jeung-Beum;Kim, Min-Su;Kim, Ee-Hwa;Kim, Sung-Hoon
동의생리병리학회지
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제19권1호
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pp.212-217
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2005
The purpose of this study was to examine the effects of Citrus Reticulata(CR) on the Cell Detachment and Apoptosis in Human Gastric Cancer SNU-668 Cells. The effect of CR on apoptosis was investigated through MTT assay, DAPI staining, and TUNEL assay. We also performed RT-PCR for apoptotic genes including BCL-2, BAX, and caspase-3, the caspase-3 activity assay, and western blotting for pro-CASP-3. Then, to detect that adhesion of cell to ECM was reduced by CR, we investigated mRNA expression of CDH1 and PTK2 using RT-PCR, and their protein expressions using western blotting, and immunocytochemistry in SNU-668 cells. In this study, the results showed that treatment of CR induced time and dose-dependent cell death in SNU-668 cells. Downregulated mRNA expression of BCL-2, and upregulated mRNA expressions of BAX and CASP-3 indicated that the cell death was due to apoptosis. Protein expression of inactivated CASP-3, and caspase-3 activity assay also showed that apoptosis was induced in CR-treated cells.
This study evaluated the anti-Helicobacter and anti-inflammatory effects of Sohamhyungtang (SHHT). The minimum inhibitory concentration (MIC) of SHHT against Helicobacter pylori (H. pylori) was determined by the agar dilution method. Expression of the H. pylori cagA gene in the presence of SHHT was determined by quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR). Inhibition of H. pylori urease by SHHT was determined by the phenol-hypochlorite assay. Antiadhesion activity of SHHT was measured by urea-phenol red reagent. Inhibition of nitric oxide (NO) production in AGS cells was measured with Griess reagent. Inducible nitric oxide synthase (iNOS) and IL-8 mRNA expression in AGS cells which were infected with H. pylori was determined by qRT-PCR. IL-8 level was measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The MIC of SHHT was $100{\mu}g/mL$ and the expression of cagA gene was decreased about 25 folds in the presence of SHHT. H. pylori urease was inhibited 90% by SHHT. SHHT inhibited H. pylori adhesion on AGS cell in a concentration dependent manner. mRNA expression of iNOS and IL-8 and the production of NO and IL-8 were significantly decreased in the presence of SHHT. In conclusion, SHHT showed anti-Helicobacter activity and has potent anti-inflammatory effect on H. pylori-induced inflammation in human gastric epithelial AGS cells.
Infantile hypertrophic pyloric stenosis (IHPS) a common childhood disorders characterized by nonbilious projectile vomiting, an olive shaped mass in the right upper quadrant of the abdomen and visible gastric peristaltic wave in the upper abdomen. Its etiology and pathogenesis are not clear but abnormal nerve distribution of the pylorus has been $postulated^{2-6}$. We performed immunocytochemical staning to the pyloric muscle from 10 IHPS and 3 controls patients, utilizing specific monoclonal antibody to NCAM(neural cell adhesion molecule). In IHPS patients, the number of NCAM protein immunoreactive nerve fibers were less than that in normal subjects. Auerbach myenteric plexuse was well developed and interbundle nerve plexuse was present but nerve fibers supplying individual muscle cells in smooth muscle bundles were poorly developed. These results indicate reduction of innervation in smooth muscles in IHPS patients that possibly contributes to the pathogenesis of IHPS.
가자미식해에서 분리된 유산균 40종은 Lactobacillus plantarum spp., Leuconostoc mesenteroides spp., Lactobacillus brevis spp., and Weisella paramenteroides spp.로 확인됐으며, 40종 중 10종을 선별해 검사에 사용했다. 본 연구에서는 가자미식해에서 분리된 유산균을 프로바이오틱스로 활용하기 위해 산 및 인공위액 저항성, 담즙산 저항성, 자가 응집성, 공동 응집성, 세포 표면 소수성 등의 프로바이오틱 연구를 수행하였다. 분리한 유산균주는 산성 및 인공 위액에 대해 저항성을 보여 높은 생존율을 나타내었으며, L. plantarum GS11이 가장 뛰어난 저항성을 보였다. 또한 담즙산 저항성 측정 결과 모든 유산균주가 108~109 log CFU/ml의 생균수로, 100% 이상의 생존력을 보여주었다. 그리고 세포 표면 부착능을 간접적으로 측정하기 위해 응집력 평가를 한 결과, autoaggregation 능력을 46% 이상 나타내었다. 세포 표면 소수성 평가를 위해 Xylene 부착능을 측정한 결과 분리된 유산균주에서 32.2%의 소수성을 가지는 B. subtilis 보다 더 뛰어난 세포 부착률을 보여주었다. 이와같이 유산균은 프로바이오틱스로 활용될 만한 유의미한 결과를 보였으며, L. plantarum GS12와 L. plantarum GS13을 제외한 유산균에서 항균 활성이 나타났다. 따라서 가자미 식해에서 분리된 유산균은 다양한 프로바이오틱스 특성을 가진 프로바이오틱스로 활용할 수 있을 것으로 판단되어진다.
Background : Peritoneal metastasis is one of the maj or types of the stomach cancer recurrence and the role of the adhesion molecules is thought to be very much important in this event. Retinoic acid (RA) has been known to induce the growth inhibition and differentiation of various malignancies, and apoptpsis and the change of expression of adhesion molecules have been reported to be involved in the action of RA. Methods : We studied the adhesion abilities of SNU-1, SNU-5, and SNU-6 cells to the peritoneal endothelial cells as well as the expression of the adhesion molecules (CD44, ICAM-1) in Western blot analysis. And also we studied the expression of apoptosis and the change of expression patterns of the various isoforms of CD44 and the change of the adhsion abilities of the cell line cells after RA treatment. Results: CD44 was expressed in SNU-5 and -16, together with an isoform in SNU-16. ICAM-1 was not expressed in any of the cell line cells tested. After the treatment of RA in the concentration range of $1-5{\times}10^{-5}M$ to three stomach cancer cell lines, growth inhibition, apoptosis and the change of expression of the CD44 were noted. After RA treatment, the expression of CD44H was weakly increased in SNU-1, and was markedly increased in SNU-5. In SNU-16, the expression of CD44H was decreased while that of CD44E were markedly increased. The adhesibility of cells to peritoneal cells was increased in relation with the increase of the CD44H expression, which shows the fact that the adhesibility of tumor cells to peritoneal mesothelial cells is mediated by CD44H recognizing hyaluronic acid. Conclusion : RA induces growth inhibition of stomach cancer cell line cells and increase the adhesiblity of stomach cancer cell line cells to peritoneal mesothelium. It is believed that RA decreases the metastatic ability of stomach cancer cells by upregulating the CD44H expression.
Arellano, Karina;Park, Haryung;Kim, Bobae;Yeo, Subin;Jo, Hyunjoo;Kim, Jin-Hak;Ji, Yosep;Holzapfel, Wilhelm H.
한국미생물·생명공학회지
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제49권2호
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pp.157-166
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2021
The probiotic market is constantly continuing to grow, concomitantly with a widening in the range and diversity of probiotic products. Probiotics are defined as live microorganisms that provide a benefit to the host when consumed at a proper dose; the viability of a probiotic is therefore of crucial importance for its efficacy. Many products undergo lyophilization for maintaining their shelf-life. Unfortunately, this procedure may damage the integrity of the cells due to stress conditions during both the freezing and (vacuum-) drying process, thereby impacting their functionality. We propose a lysine-based mixture for rehydration of freeze-dried probiotics for improving their viability during in vitro simulated gastric and duodenum stress conditions. Measurement of the zeta potential served as an indicator of cell integrity and efficacy of this mixture, while functionality was estimated by adhesion to a human enterocyte-like Caco-2 cell-line. The freeze-dried bacteria exhibited a significantly different zeta potential compared to fresh cultures; however, this condition could be restored by rehydration with the lysine mixture. Recovery of the surface charge was found to influence adhesion ability to the Caco-2 cell-line. The optimum lysine concentration of the formulation, designated "Zeta-bio", was found to be 0.03 M for improving the viability of Lactiplantibacillus plantarum Lp-115 by up to 13.86% and a 7-strain mixture (400B) to 41.99% compared to the control rehydrated with distilled water. In addition, the lysine Zeta-bio formulation notably increased the adherence ability of lyophilized Lp-115 to the Caco-2 cell-line after subjected to the in vitro stress conditions of the simulated gastrointestinal tract passage.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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