Kim, Joo-Hyung;Min, Ji-Young;Bae, Young-Seok;Kim, Heung-Tae
The Plant Pathology Journal
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v.25
no.4
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pp.322-327
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2009
A total of 23 isolates of Botrytis cinerea causing the grey mold were collected from infected ginseng in several fields of Korea. The sensitivity to carbendazim and the mixture of carbendazim plus diethofencarb was determined through a mycelial inhibition test on PDA amended with or without fungicides. B. cinerea isolates were classified as 3 phenotypes, which were the first phenotype resistant to both of carbendazim and the mixture ($Car^RMix^R$), the second one resistant to carbendazim and sensitive to the mixture ($Car^RMix^S$), and the last one sensitive to both of them ($Car^RMix^S$). Carbendazim resistance correlated with a single mutation $\beta$-tubulin gene of B. cinerea amplified with primer pair tubkjhL and tubkjhR causing a change of glutamate to alanine at amino acid position 198. Furthermore, the substitution of valine for glutamate led the resistance to carbendazim and the mixture at the same position of amino acid. PCR-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) analysis using the restriction endonuclease, Tsp451 and BstUI allowed differentiation of the PCR fragment of $\beta$-tubulin gene of $Car^SMix^S$ isolates from that of $Car^RMix^R$ and $Car^RMix^S$ isolates. This method will aid in a fast detection of resistance of carbendazim and the mixture of carbendazim plus diethofencarb in B. cinerea in ginseng field.
Since around 1980 apple rot caused by Botryosphaeria dothidea has become prevalent throughout the growing areas in Korea, during which period chemical controls have been executed with no notable improvement. Results of investigations on resistance of the causal fungus to its control chemical are as followings; The susceptible fungal isolates showed no mycelial growth at $150\;{\mu}g/ml$ of benomyl whereas the resistant isolates showed 7-13 mm growth at $300\;{\mu}g/ml$ and 6-8 mm at $2,400\;{\mu}g/ml$ of this fungicide. At the latter high concentration, spore germination of the resistant isolates was 5-9% while that of the susceptible isolates was 0%. Within the range of $20-2,400\;{\mu}g/ml$ tested, the susceptible isolates were unable to form pycnidia, but the resistant isolates formed abundant pycnidia at the lower concentration with decreasing pycnidia along with the higher concentration.
Four series (S, M, R, and W) of Alternaria longipes isolates were obtained based on consecutive selection with Dimethachlon (Dim) and ultraviolet irradiation. These isolates were then characterized according to their tolerance to Dim, sensitivity to osmotic stress, and phenotypic properties. All the selected Dim-resistant isolates showed a higher osmosensitivity than the parental strains, and the last generation was more resistant than the first generation in the M, R, and W series. In addition, the changes in the Dim resistance and osmotic sensitivity were not found to be directly correlated, and no distinct morphologic characteristics were found among the resistant and sensitive isolates, with the exception of the resistant isolate K-11. Thus, to investigate the molecular basis of the fungicide resistance, a group III two-component histidine kinase (HK) gene, AlHK1, was cloned from nineteen A. longipes isolates. AlHK1p was found to be comprised of a six 92-amino-acid repeat domain (AARD), HK domain, and response regulator domain, similar to the Os-1p from Neurospora crassa. A comparison of the nucleotide sequences of the AlHK1 gene from the Dim-sensitive and -resistant isolates revealed that all the resistant isolates contained a single-point mutation in the AARD of AlHK1p, with the exception of isolate K-11, where the AlHK1p contained a deletion of 107 amino acids. Moreover, the AlHK1p mutations in the isolates of each respective series involved the same amino acid substitution at the same site, although the resistance levels differed significantly in each series. Therefore, these findings suggested that a mutation in the AARD of AlHK1p was not the sole factor responsible for A. longipes resistance to dicarboximide fungicides.
Fungicides of tebuconazole wp, iprodione wp and flusilazole wp were applied for the control of postharvest fruit rots of kiwifruit (Actinidia deliciosa) in the field in 2000 and 2001. More than 3 consecutive applications of these fungicides from the late June with 10-day-interval successfully controlled the diseases. It was found in the field trial in 2002 that 4 consecutive spays from mid of June with 10-day-interval was found to be the most effective application program for tebuconazole wp, iprodione wp and flusilazole wp, The results suggested that currently registered fungicides of benomyl wp and thiophanate-methyl wp can be substituted by tebuconazole wp, iprodione wp and flusilazole wp for the control of the diseases in Korea. Use of these fungicides can restrain emergence of fungicide resistant strains of postharvest fruit rot pathogens with benefit of reduced application of chemicals for food safety and environmental conservation.
BACKGROUND: The resistance of rice bakanae disease pathogens against the fungicide prochloraz has been reported. Understanding the resistance mechanisms is an important for better control of the pathogens. In the present study, we investigated the resistance mechanisms of Fusarium fujikuroi CF337 (CF337) against prochloraz. METHODS AND RESULTS: Morphological changes in the cell wall of CF337 grown in potato dextrose broth (PDB) with or without prochloraz was investigated by transmission electron microscopy. Growth inhibition of CF337 was examined in PDB containing prochloraz or an ABC transporter inhibitor or both of them. Cell wall thickness of CF337 grown in PDB with prochloraz was significantly increased from $80.73{\pm}1.99nm$ to $193.11{\pm}7.07nm$. Significant inhibition in the growth of CF337 was observed in the presence of both prochloraz and the inhibitor, but no growth inhibition was observed in the presence of the inhibitor or prochloraz. Sequence analysis of ATP-binding cassette transporter (ABC) gene of CF337 showed 70 to 80% similarities to the genes of the pathogens resistant to other fungicides. CONCLUSION: Efflux transporter system and changes in cell wall thickness were suggested as resistance mechanisms of CF337 against prochloraz.
Plant damages and yields of the different rice cultivars to brown planthopper (BPR), Nilaparvata lugens S., were observed for the evaluation of varietal resistance in paddy fields. Twenty nine Korean cultivas were transplanted in paddy fields with three plots of no insecticide, no insecticide and fungicide, and no fungicide at Haenam, southern coastal area in 1983. Among 6 varieties with BPR resistant genes, Samgang, Gaya, Hangangchal, and Cheongcheong showed very low populations of BPR and no damages on all treatments. Milyang 30 and Wonpung among them had considerable populations of BPR. Seokwang and 23 others showed high populations and serious damages. Yield increasea(%) with insecticides were low on Gaya(12%), Samgang(29%) and Hangangchal(35%), but very high on Bongkwang(260%), Palgueum(223%), Songjeon(200%), and Guanauk(200%).
In this study, we evaluated the efficacy of fluopicolide to inhibit Phytophthora capsici in vitro, and to control pepper Phytophthora blight in a greenhouse and pepper fields. Fluopicolide was tested on various developmental stages of P. capsici 06-143 (a sensitive isolate to metalaxyl) and JHAW1-2 (a resistant isolate to metalaxyl). Mycelial growth and zoosporangium germination of both isolates were completely inhibited at $4.0\;{\mu}g/ml$ of the fungicide in vitro. The $EC_{50}$ (effective concentrations reducing 50%) of P. capsici 06-143 against zoospore were $0.219\;{\mu}g/ml$, while those of JHAW1-2 were $3.829\;{\mu}g/ml$. When fluopicolide was applied at 100 and $1,000\;{\mu}g/ml$ 7 days before inoculation with P. capsici 06-143 in the greenhouse test, the disease was controlled completely until 6 days after inoculation. However, the curative effect of fluopicolide was not as much as the protective effect. When fluopicolide was applied by both soil drenching and foliar spraying, the treatments strongly protected pepper against the Phytophthora blight disease. Based on these results, fluopicolide can be a promising candidate for a fungicide to control P. capsici in the pepper fields.
Rice bakanae is a typical seed-borne and seed-transmitted disease caused by infection by Fusarium fujikuroi. Seed disinfection using chemical fungicides (such as benomyl and prochloraz) is most effective in controlling the disease, but the emergence of fungicide-resistant strains has recently been increasing. Slightly acidic hypochlorous acid water (SAHW) is a safe and environmentally friendly disinfectant that has a potent and broad spectrum of antimicrobial activity against viruses, bacteria, and fungi. In this study, we aimed to investigate the effectiveness of SAHW against F. fujikuroi strains, including chemical fungicide-resistant strains, as an alternative to conventional chemical fungicides in the management of bakanae disease. SAHW showed strong but similar levels of antifungal activity among the F. fujikuroi strains with a minimum inhibitory concentration (MIC90) of 5±2.5 ppm of free available chlorine (FAC). In addition, F. fujikuroi cells lost viability completely within 5 min of SAHW treatment due to the lethal damage to cell integrity. When the rice seeds infected by F. fujikuroi were treated with SAHW containing 20±10 ppm of FAC for 12 hr, the efficiencies of seed disinfection and disease control were 95-98% and 90.1-92.6%, respectively. Altogether, our data suggest that SAHW is an effective compound for controlling rice bakanae disease.
Resazurin-based microtiter assay was used to evaluate the inhibitory effect of fungicides on the respiration of Colletotrichum acutatum s. lat. 20JDS8 sensitive and 20CDJ6 resistant to strobilurin fungicides. The spores of C. acutatum s. lat. 20JDS8 were inoculated into potato dextrose broth (PDB) at densities of 1x104, 1x105 and 1x106 spores/ml, respectively. The relative fluorescence unit (RFU) of all treatments inoculated at each spore density started to rise after 12 hr of incubation, and were 1,965.5, 5,412.5, and 10,061.0, respectively, after 24 hr of incubation. To evaluate the inhibitory effect of fungicide on the respiration of the pathogen, the spores of the pathogen were inoculated into the PDB and treated with the fungicides 0, 6, 12, and 24 hr after incubation, respectively. After keeping the pathogen culturing for another 24 hr, PrestoBlue reagent was treated into the PDB culturing the pathogen. The RFU of each treatment was examined 1 hr after the reagent was treated. When dithianon, isopyrazam, pyraclostrobin, and fluazinam were treated at high concentrations in the stages of spores (immediately after inoculation [0 hr]), spore germination (after incubation for 6 hr), and hyphal growth (after incubation for 12 hr), the respiration of pathogens was inhibited by 90-100%. When the fungicides were treated after culturing the pathogen for 24 hr, the respiratory inhibitory effects were greatly reduced. With pyraclostrobin-resistant C. acutatum s. lat. 20CDJ6, azxoystrobin, trifloxystrobin and kresoxim-methyl, which have the same mode of action, had very little or no respiratory inhibitory effect in all growth stages of pathogens. Based on the above results, it was thought that the resazurin-based microtiter assay could quickly and accurately evaluate the inhibitory efficacy of the fungicides that inhibited respiration.
The effect of various fungicides on anthracnose of strawberry, caused by Colletotrichum gloeosporioides, was determined in vitro, and in greenhouse and field trials. The $EC_{50}$ values of benomyl were clearly different between two sensitive and resistant groups of isolates. Iminoctadine tris had lower $EC_{50}$ values than mancozeb and propineb as protective fungicides and the response of mancozeb, propineb and azoxystrobin was variable depending on the isolate. In the greenhouse, pre- and post- inoculation fungicide applications significantly reduced disease compared to the non-treated control. Propineb, mancozeb and azoxystrobin were effective in controlling the disease when applied prior to inoculation. Metconazole and prochloraz-Mn treatments as ergosterol biosynthesis-inhibiting fungicides had the lowest incidence of anthracnose. In the nursery field trials in 2009 and 2010, the reduced fungicide spray program provided similar levels of disease control compared to the calendar-based applications with captan. A reduced spray program based on efficacious fungicides such as prochloraz-Mn will be useful for strawberry growers and provide more options for controlling anthracnose in Korea.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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