미역, 다시마 등 갈조류의 추출물로서 생리활성성분으로 각광 받고 있는 fucoidan이 멜라닌 합성에 미치는 영양을 알아봄으로써 미백제로서의 개발 가능성 여부를 확인하지 위하여 B16F10 melnoma 세포를 이용하여 멜라닌 합성과 tyrosmase 활성도에 대한 실험의 결과 B16F10 melnoma 세포의 멜라닌 생성과 tyrosinase 활성도는 fucoidan의 농도가 증가함에 따라 농도 의존적으로 억제되었다. B16F10 melnoma 세포에 ${\alpha}$-MSH를 투여 후 멜라닌 생성과 tyrosinase의 활성도 역시 fucoidan의 농도가 증가할수록 멜라닌 생성과 tyrosmase 활성도가 억제되는 경향을 보였다. 또한 DOPA 염색의 결과 fucoidan은 농도 의존적으로 tyrosinase 활성도를 억제하였다. 이상의 결과 해조 추출 다당류인 furosinase은 B16F10 melanoma 세포의 멜라닌 합성과 tyrosinase 활성도 억제 작용을 나타내므로 미백 활성 물질로서의 가능성을 가지고 있는 것으로 생각된다.
Polysaccharides prepared from marine algae sometimes contain contaminants such as polyphenols and endotoxins that may mislead their bona fide biological activities. In this study, we examined bioactive contaminants in commercially available fucoindan from Fucus vesiculosus, along with ascophyllan and fucoidan from Ascophyllum nodosum. F. vesiculosus fucoidan inhibited the growth of Vibrio alginolyticus in a concentration-dependent manner ($0-1,000{\mu}g\;mL^{-1}$). However, the antibacterial activity of the fucoidan significantly reduced after methanol-extraction, and the methanol-extract showed a potent antibacterial activity. The extract also showed cytotoxicity to RAW264.7 and U937 cells, and induced apoptotic nuclear morphological changes in U937 cells. These results suggest that the antibacterial activity of the fucoidan is partly due to the methanol-extractable contaminants that can also contribute to the cytotoxicity on RAW264.7 and U937 cells. On the other hand, the activities to induce secretion of nitric oxide and tumor necrosis factor-${\alpha}$ from RAW264.7 cells were observed in the fucoidan even after methanol extraction, and the extract had no such activities. Our observations suggest that commercially available fucoidan should be purified prior to biochemical use.
Volatile components of crude fucoidan and its raw material, Undaria pinnatifida sporophylls were identified by GC/MSD analysis, and the effects of a combined method of solvent extraction and drying (hot-air drying or spray drying) on deordorization of fucoidans were examined. The major components of seaweed smell (odor) in crude fucoidan and Undaria pinnatifida sporophylls were identified as alkanes (octadecane, heptadecane, tetradecane) and acids (hexadecanoic acid, oleic acid). Solvent extraction and drying were combined for the deordorization of fucoidans: hot-air drying/deordorization process (HDDP) and spray drying/deordorization process (SDDP). The deordorization effects of solvent extraction using solvents including water, ethanol, and acetone were investigated. Among the tested solvents, ethanol was selected as a deordorization solvent, because the seaweed smell and taste were mostly lowered by ethanol extraction followed by drying. In addition, HDDP and SDDP were compared, showing that SDDP gave higher sensory characteristics than HDDP. When the crude fucoidan was treated by ethanol extraction for 30 min followed by SDDP, approximately 60% of off-flavor components of crude fucoidan was removed based on GC/MSD peak area, and the total sugar and sulfate contents and APTT-anticoagulant activity significantly increased compared to crude fucoidan. In conclusion, SDDP after ethanol treatment was proposed and established as a deordorization process for fucoidan preparation.
본 연구에서는 nicotine 분해에 효과에 대하여 해양식물 유래의 후코이단을 이용하여 시험관에서 직접 혼합법 및 세포주 시험에서 nicotine의 cotinine으로의 전환능을 측정하였다. 직접 혼합법 시험결과, 후코이단 $1{\mu}g/mL$에서 시간이 경과함에 따라서 nicotine의 cotinine으로의 전환 정도가 대조군 대비 증가하여 시험 종료 시점에서 15배의 증가율을 나타내었다. 세포주을 이용한 nicotine의 분해능 시험 결과, 시험 종료 시점에서 대조군 대비 6배의 cotinine 증가율을 나타내었다. 양성 대조군으로 사용한 녹차 추출물 대비 nicotine 분해능은 우수한 것으로 평가되었다. 그러나 후코이단의 항산화능은 녹차 추출물과 대비하여 낮았으며, 항산화 주요 기능을 갖는 폴리페놀 및 플라보노이드 성분 역시 낮았다. 본 시험 결과가 나타내는 바는 후코이단의 nicotine의 cotinine으로의 전환능에 대한 입증을 하였으며 이는 금연 보조 역할을 할 수 있는 기능성 소재로 사료된다.
Fucoidan, one of the dominant sulfated polysaccharides extracted from brown seaweed, possesses a wide range of biological activities. Transforming growth $factor-{\beta}$ ($TGF-{\beta}$) plays a pivotal role in the pathogenesis of pulmonary fibrosis, by stimulating the synthesis of profibrotic factors. In this study, we investigated the in vitro effects of fucoidan on collagen synthesis, ${\alpha}-smooth$ muscle actin (${\alpha}-SMA$) expression, and interleukin (IL)-6 production in $TGF-{\beta}$-stimulated human pulmonary fibroblasts. The expression of type I collagen and ${\alpha}-SMA$ was detected by Western blot, and the production of IL-6 by enzyme-linked immunosorbent assay. $TGF-{\beta}1$ treatment of pulmonary fibroblasts enhanced the expression of ${\alpha}-SMA$, type I collagen, and IL-6 whereas these effects were inhibited in cells pretreated with fucoidan. The activation of Smad2/3, p38 mitogen-activated protein kinases (MAPKs), and Akt was also inhibited in fucoidan-pretreated, $TGF-{\beta}1-stimulated$ human pulmonary fibroblasts. These data demonstrate the anti-fibrotic potential of fucoidan in $TGF-{\beta}-induced$ human pulmonary fibroblasts, via the inhibition of Smad2/3, p38 MAPKs, and Akt phosphorylation. Our results suggest the therapeutic potential of fucoidan in the prevention or treatment of pulmonary fibrosis.
Fucoidan has been shown to exhibit a host of biological activities, including anti-coagulant, anti-thrombotic, anti-tumourigenic, anti-inflammatory, anti-viral, anti-complementary and neuroprotective effects. In the present study, we attempted to determine the effects of Fucoidan on both apoptosis and cell proliferation in the hippocampal CA1 region and the dentate gyrus of gerbils after the induction of transient global ischemia. This experiment involved the use of terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling (TUNEL) assay as well as immunohistochemisty for caspase-3 and 5-bromo-2'-deoxyuridine (BrdU). The monosaccharide composition of the purified Fucoidan which had been extracted from Laminaria religiosa was utilized in this study. The present study clearly induces that apoptotic cell death and cell proliferation in the gerbil's hippocampal regions increased significantly following the induction of transient global ischemia and the results of this study also indicate that Fucoidan exerted a suppressive effect on this observed ischemia-induced increase in apoptosis within the CA1 and dentate gyrus, and also suppressed cell proliferation in the dentate gyrus.
본 연구는 갈조류 유래 물질인 후코이단이 인슐린 민감성을 증진시키는지를 규명하기 위하여 3T3-L1 지방세포에서 포도당 흡수에 미치는 후코이단의 영향을 측정하고 그 작용기전을 조사하였다. 후코이단은 지방세포에서 포도당 흡수를 유의하게 증가시켰으며 이는 PM-GLUT4의 발현 증가와 관련이 있음을 관찰하였다. 후코이단은 인슐린 신호전달 경로에서 PI3K의 활성화 및 pIRS1tyr, Akt, PKCλ/ζ의 인산화를 대조군에 비해 유의하게 증가시켰다. 또한, AMPK의 활성화를 나타내는 pAMPK 수준이 유의하게 증가하였다. 이들 PI3K 및 AMPK 활성화는 포도당 수송체인 GLUT4를 세포막으로 이동시켰으며 이로 인하여 PM-GLUT4의 발현이 증가되고 포도당 흡수가 촉진되었다. 후코이단에 의한 PI3K 및 AMPK 경로의 활성화를 증명하기 위해, PI3K 억제제인 Wortmannin과 AMPK의 억제제인 Compound C를 사용하여 이들 처리에 의한 포도당 흡수능과 PM-GLUT4의 발현을 측정한 결과 이들의 발현이 유의하게 저해되었다. 따라서 후코이단은 3T3-L1 지방세포에서 PI3K 및 AMPK 경로를 활성화시킴으로써 인슐린 민감성을 증진하고 포도당 흡수를 촉진시킬 수 있음을 나타내었다.
국내에서 다량 생산되는 갈조류인 미역포자엽, 다시마, 톳, 모자반으로부터 fucoidan을 추출, 분획하여 Pb와 Cd의 흡착 특성을 조사하였다. 4종의 갈조류에서 추출한 fucoidan의 분획물 모두 Pb의 흡착량이 Cd보다 높았으며, 시료간에는 미역포자엽 분획물 (Fr-3.0)이 Pb와 Cd 모두 흡착력이 상대적으로 우수하였다. pH와 농도 변화에 따른 홉착력의 변화는 $C_f$ (잔류농도)가 50mg/L까지는 pH 간 차이가 없었으나, 농로가 증가함에 따라 pH 5.5 처리구가 다른 처리구에 비하여 흡착량이 증가하였다. 실험을 통하여 얻은 Pb 와 Cd의 최대 흡착량은 pH 5.5에서 각각 94mg/g ($C_f$164mg/L), 64mg/g ($C_f$197mg/L)였으며 Langmuir sorption model을 통해 구한 최대 흡착량은 pH 5.5에서 각각 178mg/g, 122mg/g이었다. Cd 공존시 Pb 흘착량은 $C_f$가 낮을 범위에서는 변화가 없었으나 $C_f$가 증가함에 따라 공존 이온의 흡착 방해로 인하여 감소하였다.
아민화 젤라틴 미세캡슐은 젤라틴의 양이온인 amino 그룹과 후코이단의 음이온인 sulfate 그룹과의 이온결합으로 제조되었다. 후코이단의 농도가 증가할수록 미세캡슐의 유리아미노 그룹의 함량은 감소했으며, 또한 미세캡슐로부터의 방출 속도 역시 후코이단의 농도가 증가함에 따라 감소했고 pH 1.2인 인공위액에서의 방출 속도가 pH 7.4인 PBS 에서보다 더 빠른 것을 알 수 있었다. 아민화 젤라틴 미세캡슐은 일반 젤라틴 미세캡슐보다 유리 아미노 그룹의 함량이 높아 음전하를 띄고 있는 위점막에 점착력이 커짐을 알 수 있었다. 본 연구는 아민화 젤라틴 미세캡슐을 제조하고 점착력을 살펴본 것으로서, 본 연구결과를 토대로 amoxicillin을 캡슐화한 아민화 젤라틴 미세캡슐의 헬리코박터 저해능력에 대한 연구도 진행되어야 할 것이다.
PEMFC 고분자막의 내구성을 향상시키기 위해서 Radical 제거제가 사용되고 있다. 본 연구에서는 라디칼 제거제로서 해조류에서 추출한 후코이단이 고분자막의 전기화학적 열화를 방지하는지 Fenton 실험과 가속내구 평가방법(OCV Holding) 실험을 통해 검토하였다. 후코이단은 항산화 효과가 있어 과산화수소와 산소 라디칼로부터 고분자막을 보호해 열화속도를 1/10로 감소시켰다. 후코이단이 라디칼 제거제로 사용되는 MnO2보다 효과적임을 보였다. PEMFC셀에서 OCV Holding 실험한 결과, 후코이단이 고분자막의 수소투과도를 12% 감소시켰고, 성능은 라디칼 제거제가 없을 때 보다 29.1% 감소시켜 PEMFC 셀에서도 라디칼 제거제의 역할을 함을 확인하였다. 그리고 후코이단을 Anode쪽보다 Cathode 쪽 전극 이오노머에 넣은 것이 더 효과적임을 확인하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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