A simplified dilutor for cock spermatozoa at ambient temperature was achieved by adjusting the 5% concentration of fructose in isotonic saline. Motility of cock spermatozoa was arrested completely for maximum 6 hrs without affection the survivability of spermatozoa by employing this sugar. To study the effect of high concentration of fructose on fertility, sperm were inseminated with or without fructose at different hrs. Fructose from semen samples was removed by centrifugation. High fertility obtained in the hens inseminated with fructose free sperm (washed). In addition, washed sperm maintained the 85.00% fertility for 6 hrs in winter season ($17-21^{\circ}C$) and 82.67% fertility for 3 hrs in summer season ($31-35^{\circ}C$). Whereas control groups showed 47.33 and 25.33% fertility in winter and summer season respectively. No significant difference was found in percent motility and live counts between the control and washed experimental groups during winter season. However, these measures differed significantly in summer. Washing of cock spermatozoa more than once, high speed centrifugation and more duration for centrifugation proved harmful to fertility. It may be concluded that fructose (5%) can be used as a motility or metabolic inhibitor of spermatozoa for short-term storage of cock semen at ambient temperatures.
본 연구에서는 경제성 있는 생물학적 만니톨 고생산을 위해 선별균주의 만니톨 생산 최적화 배지조성을 RSM 방법을 이용하여 확립하고자 하였다. 먼저 김치로부터 분리된 10균주의 만니톨 생산량과 과당으로부터 만니톨 전환율 분석을 통하여 SRCM201425 균주를 선발하였으며, 선발균주는 16S rRNA 유전자 염기서열과 당 발효 분석을 통하여 Leuconostoc mesenteroides로 동정하였다. Plackett-Burman design (PBD)을 이용하여 만니톨 생산에 영향을 주는 배지 인자를 선별하기 위해 총 11개의 탄소원, 질소원, 무기원소의 영향을 조사하였으며, 통계학적 분석을 통하여 최종적으로 fructose와 sucrose, peptone을 선정하였다. 만니톨 생산을 위한 선별된 각 변수의 최적 농도를 결정하기 위한 방법으로 central composite design (CCD)과 반응표면 분석법을 이용하였으며, 최종적으로 CCD를 통해 만니톨 생산을 위한 배지 조성의 최적 농도는 fructose 38.68 g/l, sucrose 30 g/l, peptone 39.67 g/l으로 예측되었으며, 통계학적 분석을 통해 실험모델의 적합성을 확인하였다. 최종적으로 MRS 배지에서의 생산량의 약 20배의 만니톨을 생산할 수 있었으며, 100 g/l의 fructose가 포함된 MRS 배지 대비 97.46%의 만니톨을 생산하면서, 산업화시 기존 배지 대비 생산비용을 크게 절감할 수 있을 것으로 예상되었다. 본 연구를 통하여 만니톨 생산을 위한 배지 조성의 최적화를 확립하였으며, 만니톨을 생산하기 위한 방법으로 주로 사용되고 있는 고비용의 촉매환원 방법을 대체할 방법을 제시할 수 있는 기초자료로 활용될 수 있을 것으로 기대된다.
Selection of high producer strain, optimization of production medium and cultivation in bioreactor system were carried out in order to produce an antifungal substance, PAFS in large amounts which sources and 41 kinds of nitrogen sources, a synthetic medium consisting of fructose(70 g/1) and ammonium sulfate (10g/l) and a complex medium including galactose(30g/l), fructose(20g/l) and cottonseed flour(35g/l) were determined as opti-mized media for PAFS production. In bioreactor studies examining physiological characteristics of the pro- ducer microorganism with the complex medium, typical pattern of diauxic growth was observed as demonstrated by the result that fructose was not used before almost exhaustion on readily utilizable carbon source, galactose. When galactose was supplemented additionally during the fermentation period. PAFS pro-ductivity did no increases any more, indicating that large portion of the added galactose was used for cell growth instead of biosynthesis of the secondary metabolite. It was deduced that PAFS production could be enhananced by employing fed-batch operation in order to overcome the apparent phenomenon of catabolite repression and /or inhibition.
$CaCl_2$, glucose, frutose, glutamine, glutamate 그리고 Ii pids와 같은 배지 첨가물들이 회분식 그리고 연속식 2단계 생물반응기 시스템에셔 재조합 ${\beta}$-galactosidase (${\beta}$-gal) 생산을 증진시키는가를 조사하였다. Sf 21 세포에 AcNPV의 감염시 $CaCl_2$, frutose, glutamate, cholesterol 및 tocoph eral과 같은 배지 첨가물을 첨가하였을 때 ${\beta}$-gal 생산이 증진되었다. 30mM $CaCl_2$, 2.2mM frutose, 4.lmM glutamine, 그리고 O.34mM cholesterol이 보강된 감염 배 지를 이용한 재조합${\beta}$-gal 생산은 약 40% 의 증가를 보였다.
Influence of fructose addition to the cultivation medium on the production of taxanes and the growth of callus culture of Taxus baccata was studied. The cultures showed an ability to adjust to the substitution of some of the sucrose in the media by fructose and the fresh biomass accumulation was higher on the media containing different concentrations of fructose during the second cultivation period.
본 연구에서 수행한 avermectin 생산을 위한 배지 최적화에서 기존의 총 avermectin의 함량 10 mg/L를 470 mg/L까지 증가시켰으며, 이 중 광범위 활성을 가지는 avermectin B1도 50%에 달했다. 최적화된 배지 조성은 50 g/L fructose, 30 g/L malt extract, 5 g/L casamino acid, 2.5 g/L PEG 3,350, and 1 g/L $K_{2}HPO_{4}$이다. $K_{2}HPO_{4}$와 fructose, malt extract가 avermectin 생합성에 크게 작용하는 것으로 추정된다.
NAD재생형 bioreactor를 구축함에 있어 음이온 하전막을 이용하고자 하였다. 사용한 막은 용액상의 NAD의 통과를 저지하여 80.9%를 bioreactor내에 존속시켰는데 NAD의 bioreactor내에의 존속율은 Tris-maleate완충용액을 사용하고 albumin을 첨가하므로써 증가되었다. 음이온하전막을 장착한 bioreactor내에서 주반응 효소로서 sorbitol dehydrogenase와 재생반응효소로서 alcohol dehydrogenase를 사용하여 NADH로의 재생과 함께 fructose로부터 sorbitol의 생산을 행하였다. 반응형식은 반복회분조작을 행하였는데 매 회분마다 70%의 전환율이 될 때까지 반응기킨 후 반응액의 90%를 회수한 후 fructose와 ethanol을 feed하여 다음의 회분반응을 행하였다. Sobitol의 생산량은 198시간의 반응에서 47g/L이었다. 한편 사용한 막의 NAD존속율은 반응종료후에도 거의 감소되지 않았다.
Leuconostoc genus, which comprise heterofermentative lactic acid bacteria, reduces fructose to mannitol by recycling intracellular NADH. To evaluate the mannitol productivities of different Leuconostoc species, 5 stock cultures and 4 newly isolated strains were cultivated in MRS and simplified media containing glucose and fructose (1:2 ratio). Among them, L. citreum KACC 91348P, which was isolated from kimchi, showed superior result in cell growth rate, mannitol production rate, and yield in both media. The optimal condition for mannitol production of this strain was pH 6.5 and $30^{\circ}C$. When L. citreum KACC was cultured in simplified medium in a 2 l batch fermenter under optimal conditions, the maximum volumetric productivity was 14.83 $g{\cdot}l^{-1}h^{-1}$ and overall yield was 86.6%. This strain is a novel and efficient mannitol producer originated from foods to be used for fermentation of fructose-containing foods.
G. persimmonis KJ145$^{T}$ 를 사용하여 bacterial cellulose와 식초 동시 생산에 따른 성분변화를 조사하였다. 그 결과 pH는 배양 8일째에 3.22로 감소하는 경향이었으며, 총산은 8일째에 가장 높은 4.66으로 나타났다. Brix는 배양기간 동안 거의 변화가 없었으며, 유리당은 fructose, glucose 및 sucrose로 구성되어 있고 fructose는 배양 종료 후, 10일째에도 거의 감소하지 않고 높게 나타났다. G. Persimmonis KJ145$^{T}$ 균체는 배양 2일부터 급격히 증가하여 4일에 가장 높게 나타났으며, bacterial cellulose는 배양기간이 길수록 증가하는 경향을 나타내었다. 발효액의 유기산은 malic acid, succinic acid, oxalic acid 등이 검출되었으며, acetic acid는 발효 2일째부터 급격히 증가하여 8일째에 가장 높게 생성되었다. 따라서 bacterial cellulose와 초산을 동시에 생산하기 위한 최적배양기간은 8일 정도로 나타났다.
분쇄마찰매체함유 불균일상 효소반응계를 활용한 생전분의 무증자당화법은 고농도, 고순도의 포도당을 고효율로 직접 얻을 수 있는 새로운 당화법으로 이를 high fructose corn syrup(HFCS) 제조공정에 응용코져 연구하였다. 400g/$\ell$ 생전분을 24시간 무증자당화시켜 이성화반응에 적합한 고농도인 398g/$\ell$와 고순조인 98 포도당 용액을 농축과정을 거치지 않고 직접 얻을 수 있었다. 전분에 대한 포도당수율은 0.90으로, 미반응 잔유전분은 쉽게 원심분리되었으며, 재당화도 용이하였다. 또한 무증자당화액은 단백질성 변성물, 이온 등 불순물의 함량이 매우 적어, 이성화 반응 전단계인 분리 정제과정을 단순화할 수 있었다. 생성된 당용액의 고정화 포도당 이성화효소 기질로서의 적합성을 검토하여 우수한 결과를 얻었다. 생전분 직접당화법을 도입한 새로운 HFCS 제조공정은 액화/당화공정을 경유하는 기존의 공정에 비하여 여러가지 장점이 있어 산업적 활용이 기대되며, 이를 위한 후속연구가 요망된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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