• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제43권3호
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• pp.169-173
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• 2016

Objective: To determine the preferred regimen for women with adenomyosis undergoing in vitro fertilization (IVF), we compared the IVF outcomes of fresh embryo transfer (ET) cycles with or without gonadotropin-releasing hormone (GnRH) agonist pretreatment and of frozenthawed embryo transfer (FET) cycles following GnRH agonist treatment. Methods: This retrospective study included 241 IVF cycles of women with adenomyosis from January 2006 to January 2012. Fresh ET cycles without (147 cycles, group A) or with (105 cycles, group B) GnRH agonist pretreatment, and FET cycles following GnRH agonist treatment (43 cycles, group C) were compared. Adenomyosis was identified by using transvaginal ultrasound at the initial workup and classified into focal and diffuse types. The IVF outcomes were also subanalyzed according to the adenomyotic region. Results: GnRH agonist pretreatment increased the stimulation duration ($11.5{\pm}2.1days$ vs. $9.9{\pm}2.0days$) and total dose of gonadotropin ($3,421{\pm}1,141IU$ vs. $2,588{\pm}1,192IU$), which resulted in a significantly higher number of retrieved oocytes ($10.0{\pm}8.2$ vs. $7.9{\pm}6.8$, p=0.013) in group B than in group A. Controlled ovarian stimulation for freezing resulted in a significantly higher number of retrieved oocytes ($14.3{\pm}9.2$ vs. $10.0{\pm}8.2$, p=0.022) with a lower dose of gonadotropin ($2,974{\pm}1,112IU$ vs. $3,421{\pm}1,141IU$, p=0.037) in group C than in group B. The clinical pregnancy rate in group C (39.5%) tended to be higher than those in groups B (30.5%) and A (25.2%) but without a significant difference. Conclusion: FET following GnRH agonist pretreatment tended to increase the pregnancy rate in patients with adenomyosis. Further largescale prospective studies are required to confirm this result.

• 한국가축번식학회지
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• 제26권3호
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• pp.229-234
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• 2002

본 연구는 불임견의 번식장애를 해결할 목적으로 개 정소상체로부터 채취한 정액을 tris-buffer로 원심분리하여 정장을 제거한 RSP-T 희석 정자의 일반성상과 동결방법 및 glycerol 농도가 동결융해 후 생존성에 미치는 영향과 난자와 정소상체 정자를 매정시켰을 때 정자침입율을 조사하기 위하여 수행하였다. 1. WES, RSP-S 및 RSP-T 희석 정소상체 정액의 정자수는 각각 4.25 $\pm$ 0.25(X$10^{6}$ Cells/$m\ell$), 3.85 $\pm$ 0.20(x$10^{6}$cells/$m\ell$), 4.05 $\pm$ 0.28(X$10^{6}$cells/$m\ell$)이었고, 활력은 50.55 $\pm$ 2.75%, 67.25 $\pm$2.55%, 78.75$\pm$3.55%이었고, 기형정자율은 49.45$\pm$2.25%, 37.75 $\pm$ 2.10%, 24.25 $\pm$ 1.55%이었다. 2. RSP-S와 RSP-T 희석 정소상체 정액을 완만 동결을 했을 때 생존율은 각각 35.00 $\pm$2.35%, 45.50 $\pm$2.15%와 초급속동결시의 생존율은 16.50 $\pm$ 3.55%, 22.55 $\pm$ 3.95%이었다. RSP-T 희석 정소상체 정액을 동결시 내동제에 glycerol 농도를 2.0~8.0% 첨가하여 동결했을 때 생존율은 각각 9.25 $\pm$ 1.55%~17.50$\pm$2.50%로서 신선정액의 25.50% 4.50%~34.00$\pm$5.15%에 비해 낮은 생존율을 나타냈다. 3. 동결 융해한 정소상체 희석정자의 평균 수정 능 획득 율과 첨체반응 및 생존정자수는 각각 13.00 $\pm$ 2.35%, 3.55 $\pm$ 0.85%, 15.50 $\pm$ 1.90% 였고, 신선 정소상체 정액의 45.25$\pm$5.75%, 7.06 $\pm$0.25%, 49.20$\pm$6.80%이었다. 신선 및 동결 수정 능 획득 정자를 난자와 매정시켰을 때 난자내 정자의 침입율은 각각 39.25 $\pm$4.72 %와 34.24$\pm$3.93%였고, 난자당 정자의 침입 수는 각각 1.30$\pm$0.33개, 1.10$\pm$0.50개이었다.

• 한국가축번식학회지
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• 제17권3호
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• pp.233-242
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• 1993

The effects of in vitro maturation and sperm treatment condition on the in vitro fertilization (IVF) and developmental capacity of bovine oocytes were investigated and the development of embryos was compared under the 2 different co-culture system, with GC or BOEC. The cultured embryo to 16 cell or morula wre transferred into recipients or frozen by 2 different freezing method. The results obtained were summarized as follows; 1. In vitro maturation rates of vovine follicular oocytes cultrued in TCM199 with 10% FCS or ECS were 64.0% and 72.7%, but the case of addition of 10% FCS or ECS to TCM199 co-cultured with granulosa cells were 81.3% and 84.0%, respectively. IVM rate of three TCM199 added to granulosa cells was higher than that of media without granulosa cells. 2. When bovine follicular oocytes were matured in TCM199 with 10% FCS and GC and then fertilized in vitro by sperm treated with caffeine, embryo developments of bovine oocytes co-cultured with BOEC were 38.4% and 51.4%, respectively. But those of bovine oocytes co-cultured with GC were 52.2% by sperm treated with caffeine-heparin. 3. Cleavage rates of bovine oocytes cultured with 10% FCS alone and fertilized in vitro by sperm treated with caffeine-heparin was 33.0%. 4. When bovine follicular oocytes were matured in TCM199 with 10% FCS and GC, embryo developments of bovine ooctyes co-cultured with BOEC of GC were 46.0% and 50.2%, respectively. 5. When bovine follicular oocytes were matured in TCM199 with 10% ECS and GC, embryo developments co-cultured with BOEC or GC were 45.2% and 51.4%, respectively. 6. When Korean Native cow's follicular oocytes matured in TCM199 with 10% FCS and GC, embryo developed co-cultured with BOEC or GC were 45.2% and 51.4%, respectively. 6. When Korean Native cow's follicular oocytes matured in TCM199 with 10% FCS and GC, embryo developments of the bovine oocyte co-cultured with BOEC and GC were 41.8% and 60.1%. But with FCS 10% those of the bovine oocytes co-cultured with BOEC and GC were 42.0% and 48.4%, respectively. 7. When Holstein's follicular oocytes were matured in TCM199 with 10% ECS and GC, embryo developments fo the bovine oocytes co-cultured with BOEC and GC were 50.0% and 57.7%, but with ECS 10% those of the bovine oocytes co-cultured with BOEC and GC were 52.2% and 56.5%, respectively. 8. The viability of frozen-thawed embryos ranged from 60~80% and those of frozen-thawed embryos from vitrification was lower than that from conventional metiod. 9. The selected fresh embryos were transferred nonsurgically to 7 recipients but did not result in pregnancy.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제48권2호
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• pp.111-123
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• 2021

Objective: Using domestic cats as a biomedical research model for fertility preservation, the present study aimed to characterize the influences of ovarian tissue encapsulation in biodegradable hydrogel matrix (fibrinogen/thrombin) on resilience to cryopreservation, and static versus non-static culture systems following ovarian tissue encapsulation and cryopreservation on follicle quality. Methods: In experiment I, ovarian tissues (n=21 animals; 567 ovarian fragments) were assigned to controls or hydrogel encapsulation with 5 or 10 mg/mL fibrinogen (5 or 10 FG). Following cryopreservation (slow freezing or vitrification), follicle viability, morphology, density, and key protein phosphorylation were assessed. In experiment II (based on the findings from experiment I), ovarian tissues (n=10 animals; 270 ovarian fragments) were encapsulated with 10 FG, cryopreserved, and in vitro cultured under static or non-static systems for 7 days followed by similar follicle quality assessments. Results: In experiment I, the combination of 10 FG encapsulation/slow freezing led to greater post-thawed follicle quality than in the control group, as shown by follicle viability (66.9%±2.2% vs. 61.5%±3.1%), normal follicle morphology (62.2% ±2.1% vs. 55.2%±3.5%), and the relative band intensity of vascular endothelial growth factor protein phosphorylation (0.58±0.06 vs. 0.42±0.09). Experiment II demonstrated that hydrogel encapsulation promoted follicle survival and maintenance of follicle development regardless of the culture system when compared to fresh controls. Conclusion: These results provide a better understanding of the role of hydrogel encapsulation and culture systems in ovarian tissue cryopreservation and follicle quality outcomes using an animal model, paving the way for optimized approaches to human fertility preservation.

• 한국식품영양과학회지
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• 제42권12호
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• pp.2019-2027
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• 2013

본 연구에서는 고당도, 고점도 및 저산도를 나타낼 수 있는 케이크용 신선편의 과일을 위한 코팅제를 개발하기 위하여 설탕, 펙틴, 알긴산, 카라기난, 잔탄검 및 비타민 C를 이용한 코팅제 배합비율을 선정하였고, 선정된 배합비율로 제조된 코팅제의 냉 해동 안정성 및 제조된 코팅제로 코팅한 파인애플의 저장특성을 살펴보았다. 먼저 다양한 코팅 조성물의 배합비율은 60 brix 이상의 당도와 30,000 cP 이상의 점도 및 pH 4 이하의 산도를 나타내면서 고형분 함량이 가장 낮은 55%(w/w) 설탕, 2%(w/w) 펙틴, 2%(w/w) 알긴산, 0.04%(w/w) 카라기난, 0.1%(w/w) 잔탄검, 0.05%(w/w) 비타민 C 및 40.81%(w/w) 정제수의 비율로 선정하였다. 그리고 코팅제의 냉 해동 안정성에서 점도의 경우 3회의 냉 해동 반복 과정까지는 일정하게 유지되었으나 4회 반복 과정에서는 미비하게 감소되는 경향을 나타내었다(P<0.05). 반면 당도, pH 및 색도는 4회의 반복 과정에서도 일정하게 유지되었다. 그리고 코팅제로 코팅한 파인애플의 경우 코팅하지 않은 파인애플에 비하여 중량 감소율, 경도 변화 및 일반세균수 분포가 낮게 나타났으며(P<0.05), 색도의 경우 두 파인애플 모두 저장기간이 진행될수록 L값이 감소하면서 b값이 증가하여 갈변이 일어나는 것으로 나타나지만 색도차로 비교해볼 때 코팅된 파인애플보다 코팅하지 않은 파인애플의 진행속도가 더 빠른 것으로 나타났다. 그리고 $25^{\circ}C$에서 보다 $4^{\circ}C$에서의 진행속도가 천천히 진행됨을 확인할 수 있었다. 따라서 케이크에 적용하는 신선편의 과일에 코팅제를 적용하여 코팅하고 저온에서 보관함으로써 신선편의 과일의 저장성 향상을 유도할 수 있으므로 케이크의 유통기한 향상에 기여할 수 있을 것으로 생각된다.

• 대한수의학회지
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• 제33권3호
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• pp.547-554
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• 1993

This study was carried out to investigate the best condition for in vitro and in vivo culture after freezing and thawing of nuclear transplant 2 cell embryos. When nuclear transplant embryos were submitted to electrofusion, the significantly higher fusion rates of 2 cell donor nuclei were achieved at the electric field strength of DC 1.5 kV/cm for 100 and $150{\mu}sec$, DC 2.0 kV/cm for 100 and $150{\mu}sec$ than DC 1.0 kV/cm for 100 and $150{\mu}sec$(p<0.01). The significantly higher fusion rates of 4 cell donor nuclei were achievecl at DC 2.0 kV/cm for 100 and $150{\mu}sec$ than DC 1.0 kV/cm for 100 and $150{\mu}sec$(p<0.01). The fusion rates in 8 cell donor nuclei were 94.2~99.3%. The developmental potency to blastocyst in 2 cell donor nuclei was significantly higher in DC 2.0 kV/cm for $150{\mu}sec$ treated group(p<0.01). The significantly higher developmental potency to blastocyst in 4 cell donor nuclei were achieved at the electric field strength of DC 2.0 kV/cm for $150{\mu}sec$ than DC 1.5 kV/cm for 100 and $150{\mu}sec$, DC 2.0 kV/cm for $100{\mu}sec$ treated group(p<0.01). The develop mental potency to blastocyst in 8 cell donor nuclei was significantly higher in DC 2.0 kV/cm for $100{\mu}sec$ treated group(p<0.01). The developmental potency to blastocyst after nuclear transplantation was significantly higher in 2 cell donor nuclei than in 8 cell donor nuclei(p<0.01). When the recovered embryos in normal morphology were cultured in vitro, there were no significant differences in the developmental potency to blastocyst between the freezing methods and the concentrations of cryoprotectant(p<0.01). The production rates of offspring after transfer of nuclear transplant embryos to recipient mouse were no significant difference in 2, 4 and 8 cell donor nuclei.

• 한국식품영양과학회지
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• 제15권1호
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• pp.56-62
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• 1986

정어리, 갈전갱이, 전갱이 및 말쥐치의 4종(種)의 시료어(試料魚)를 $-3.5^{\circ}C$에서 50일간(日間) 저장(貯藏)하면서 저장기간(貯藏其間)에 따른 Microflora 변화(變化)를 조사하였다. 세균수(細菌數)의 측정(測定) 및 세균(細菌)의 분리(分離)에는 50% 인공해수한천평판배지(人工海水寒天平板培地)로서 도말법(塗抹法)으로 하였으며 분리(分離)한 세균(細菌)의 동정(同定)은 오적(奧積)등의 방법에 따라 행하였다. 저장전(貯藏前)의 신선한 생선에는 피부 $1cm^3$당 $10^4{\sim}10^5$마리의 세균(細菌)이 존재하였으나 저장(貯藏) 22일(日) 이후(以後)부터 $10^6{\sim}10^8$에 달하여 전형적인 생선의 부패취를 발생하였다. 저장기간(貯藏其間)을 통하여 300주(株)의 세균(細菌)을 분리(分離)하였으며 선어(鮮魚)에서는 Pseudomonas I/II, Pseudomonas III/IV-H, Vibrio, Moraxella가 대부분으로 전체(全體)의 87%를 차지하였다. 부패후(腐敗後)에도 이들 균주(菌株)가 주종(主種)을 이루었으나 Pseudomonas III/IV-H, Vibrio, Moraxella가 감소하는 반면에 Pseudomonas I/II가 최우위를 점하였으며 Pseudomonas가 소수 분리(分離)되었으나 저장초기(貯藏初期)에 소멸(消滅)하였다. 비동정균(非同定菌)이 분체(全體) 분리균주(分離菌株)의 9%를 차지하였는데 이중 약 절반이 저장(貯藏) 22일(日)에 분리(分離)되었다.

• 한국발생생물학회지:발생과생식
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• 제17권4호
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• pp.345-351
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• 2013

This study examines the effects on fertilization rate (FR), hatching rate (HR), and normal individual rate after artificial fertilization using frozen thawed sperm according to the cryoprotectant (DMSO) concentration and the period of cryopreserved sperm of longtooth grouper, Epinephelus bruneus. Performing artificial fertilization using frozen-thawed sperm, after freezing the sperm at different DMSO concentration of 5.0%, 7.5%, 10.0% respectively, FR were (DMSO 5.0%: $99.5{\pm}0.8%$, DMSO 7.5%: $99.5{\pm}0.7%$, and DMSO 10.0%: $99.6{\pm}0.6%$). The results are not significantly different from the control fresh sperm (100%). HR also (DMSO 5.0%: $96.2{\pm}2.3%$, DMSO 7.5%: $95.3{\pm}3.6%$, 10.0%: $96.6{\pm}1.8%$) were not significantly different in each group. The normal individual rate after hatching using with control fresh sperm ($98.4%{\pm}0.5$) and DMSO concentration level of 5.0% ($97.8{\pm}0.1%$) were not significantly different. However, with 7.5% ($97.2{\pm}0.6%$) and 10.0% DMSO concentrations ($95.9{\pm}0.2%$) are lower than the normal individual rate after hatching observed in the control and 5.0% DMSO. Performing artificial fertilization using frozen-thawed sperm at different frozen period (2 days, 2 years, and 3 years), 10% DMSO FR and HR of 3 years (FR; $66.8{\pm}1.8%$, HR: $82.0{\pm}12.9%$) and 2 years (FR; $78.5{\pm}14.8%$, HR: $79.3{\pm}0.6%$) cryopreserved sperm were lower than control (FR; 100%, HR: $91.1{\pm}3.6%$) and 2 days cryopreserved sperm (FR; $99.6{\pm}0.6%$, HR: $96.6{\pm}1.8%$). These results suggest suitable DMSO concentration ranges of cryopreservation sperm for E. bruneus is 5 to 10% and with 2 to 3 years cryopreservation period, cryopreservation sperm can be useful for seed production.

• 한국가금학회지
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• 제44권1호
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• pp.59-65
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• 2017

본 연구에서는 닭 정액의 운동성 분석에 미치는 요인을 분석하기 위하여 희석배율에 따른 생존성을 조사하고, 신선정액의 희석 시에 필요한 조건을 확보하기 위하여 희석제에 단백질원으로서 BSA와 FAF-BSA의 첨가가 닭정자의 생존성에 미치는 영향을 관찰하였다. 최종 희석율이 1/4이 되도록 닭 정액을 희석하여 생존성을 조사하면 신선정액에서 희석율이 1/8, 1/16 및 1/32로 낮아질수록 89.9%, 69.9% 및 53.2%로 생존율이 낮아지는 것을 관찰하였으며, 단백질원으로 BSA나 FAF-BSA를 이용하면 생존율을 유의적으로 증진시킬 수 있음을 증명하였다. 또한 이러한 현상은 동결정액의 희석에도 중요한 요인으로 관찰되었는데, FAF-BSA를 이용하여 희석할 때 단백질이 없는 경우보다 양호한 생존율이 나타난다는 것을 관찰하였다(17.6% 대 34.0%). 그러나 단백질원을 활용하더라도 닭정액의 희석율이 낮아질수록 생존율이 저하하는 현상은 지속적으로 나타나고 있으며, 신선정액에 비하여 동결정액은 장수성이 낮은 것으로 추정되었다. 그러므로 본 연구에서 사용된 정자의 분석방법은 닭 정액동결을 실시하여 운동성을 분석할 때 필요한 기본 정보를 제공할 수 있을 것으로 판단되며, 닭 희석배율을 낮추어 동결정액의 효율성을 높이는 연구에 기여할 것으로 추정된다.

• 한국수정란이식학회지
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• 제17권1호
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• pp.33-44
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• 2002

본 연구는 기존의 수정란 이식기술을 다각적으로 분석하고 개선하여 한우 체내수정란의 생산 및 이식기술 체계를 확립하기 위하여 수행하였다 수정란의 생산 및 이식은 농협중앙회 가축개량사업소 한우개량부에서 사육하고 있는 공란우 232두와 수란우 434두를 이용하여 실시하였다. 본 연구에서 얻어진 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 수란우의 황체 위치와 등급에 따라 수정란이식을 실시한 결과는 오른쪽 난소의 A등급 황체, 왼쪽 난소의 B등급 황체가 존재할 경우가 유의적(P<0.1)으로 높은 수태율을 나타냈다. 2. 동결수정란을 이식했을 때의 수태율을 35.0% 로서 신선수정란의 수태율 56.2%에 비하여 유의(P<0.01)하게 낮았다. 3. 수란우의 발정일차(6.0∼9.0일)에 따라 수정란을 이식한 격과는 신선수정란에서 45.4∼65.7%, 동결수정란에서 22.0∼50.0%의 임신율을 나타내서 처리간에 유의성이 인정되지 않았다. 4. 수란우의 황체등급과 수정란의 동결 여부에 따른 임신율을 신선 및 동결수정란 모두에서 A등급의 황체일 경우가 40.8∼67.9%로 B 및 C등급 황체의 25.0∼56.0%보다 양호할 성적을 나타냈다. 5. 수정란의 발육단계 및 등급에 따라서 이식한 결과는 상실배의 이식이 수정란의 등급에 관계없이 평균 46.3%의 임신율을 나타내 어서 배반포배 이식의 34.1%보다 높게 나타났다.