환자의 생조직, 얼린 조직 혹은 혈액이 없는 경우에, formalin으로 고정된 파라핀조직을 이용하여 미토콘드리아 돌연변이를 확인할 수 있는지를 조사하였다. MELAS 환자 4명의 파라핀조직을 택해 이들 조직으로부터 DNA를 추출하여 대부분의 MELAS 환자 미토콘드리아 DNA의 tRN $A^{Leu(UUR)}$ gene의 3243지역에서 발견되는 Adenine의 Cuanine으로의 염기치환을 확인하고자 하였다. 실험결과 3명의 환자에게서 이 점 돌연변이를 확인할 수 있어 이들 파라핀조직의 상태가 좋은 것으로 여겨져 미토콘드리아 DNA 돌연변이 연구에 파라핀조직을 활용할 수 있을 것으로 보인다.다.
Sapkal, Suryakant B.;Shelke, Kiran F.;Shingate, Bapurao B.;Shingare, Murlidhar S.
대한화학회지
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제54권4호
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pp.437-442
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2010
수용액 속에서 $NaHSO_4$, TBAB (phase transfer catalyst), ionic liquid (IL) (1-butyl-3-methyl imidazolium hydrogen sulphate [bmim]$HSO_4$)를 사용하여, formalin, ${\beta}$-naphthol, aromatic amines을 반응시켜서 대응하는 2,3-dihydro-2-phenyl-1Hnaphtho-[1,2-e] [1,3] oxazine 유도체를 합성할 수 있는 보다 친환경적이고, 수율이 좋고, 크로마토그래피 분리 방법을 사용하지 않는 합성 방법을 개발하였다.
We examined the immunological properties of the recombinant hepatitis B surface antigen (r-HBsAg) which was expressed in mammalian cell (C127). The cross-immunity of r-HBsAg and plasma-derived hepatitis B surface antigen (p-HBsAg) were tested using Western blotting and ELISA with guinea pig polyclonal antibody and naturally infected human-derived antibody and the both antigens show the same results in their response pattern and intensity, which indicate they have a good cross-immunity. from the measurement of $ED_{50}$ after formalin- or heat-inactivation, both r-HBsAg and p-HBsAg and p-HBsAg showed $ED_{50}$ of 0.2-0.3 in formalin-inactivaton, while r-HBsAg was 0.05-0.09 and p-HBsAg was 0.03-0.07 in heat-inactivation, which means heat-inactivation method is 3-4 times superior in immunogenicity. In the immunopersistency test performed in guinea pig for the period of 3 months with two different adjuvants, antibody titer was 34.2 with muramyl dipeptide adjuvant, which was 1.8 times greater than the antibody titer of 18.9 with $AIPO_{4}$ adjuvant. the mutagenicity of r-HBsAg has the same cross-immunity with p-HBsAg, and heat-inactivation method and muramyl dipeptide adjuvant allow development of r-HBsAg vaccine with excellent immunogenicity.
앞의 연구에서 우리는 진세노사이드 Rc, Rd, Re 및 Rr를 복강내 전 처리할 경우 포르말린으로 유도된 통증을 억제하다는 것을 보고하였다 그러나 이러한 진세노사이드가 어느 위치에서 항통증작용을 발휘하는가에 대하여서는 아직 알려지지 않고 있다. 본 연구에서는 이들 진세노사이드를 뇌실내, 척수강내 혹은 피하내 전처리한 다음 포르밀린에 의하여 유도되는 통증이 어느 위치에서 억제되는가를 연구하였다. 연구 결과 이들 진세노사이드는 척수강내 전처리할 경우 포르말린에 의하여 유도되는 통증을 억제하는 것으로 나타났다. 급성 통증 phase에서 ED$_{50}$는 Rc가 1.0 (0.SS~l.75mg/kg)이었고, Rd가 1.15 (0.6~2.25 mg/kg)이었고, Re가 8.9(3.9~20.5 mg/kg)이었다. 지속성 통증 phase에서 ED$_{50}$는 Rc가0.3 (0.1~0.85 mg/kg)이었고, Rd가 0.6 (0.35~l.1 mg/kg)이었고, Re가 2.45 (1.2s~4.65 mg/kg)이었고, Rf가 1.9(1.5~4.25 mg/kg)인 것으로 나타났다. 또한 뇌실내 전처리할 경우에도 이들 진세노사이드들은 포르말린에 의하여 유도되는 통증을 억제하였다. 급성통증 phase에서 ED$_{50}$는 Rc가 0.9 (0.55~l.4 mg/kg)이었고, Rd가0.9 (0.45~l.7 mg/kg)이었고, Re가 0.93 (0.Sol.75 mg/kg), Rf가1.85 (0.95~3.5 mg/kg)인 것으로 나타났다. 지속성 통증 phase에서는 ED$_{50}$는 Rc가 0.7 (0.45~l.05 mg/kg)이었고, Rd가 1.25(0.7~2.2 mg/kg)이었고, Re가 0.85 (0.45~l.6 mg/kg)이었고, H의 경우에는 0.8 (0.4~l.45 mg/kg) 이었다. 항통증 효능 potency는 두 가지 투여 경로에 있어서 Rc$\geq$Rd>Re>Rf인 것으로 나타났다. 그러나, 피하내 주사는 포르말린에 의하여 유도되는 통증을 억제하지 않은 것으로 나타났다. 이러한 연구 결과는 진세노사이드에 의한 항통증 작용은 척수 수준 및 척수위 수준에서 이루어진다는 것을 보여주고 있다.보여주고 있다.
Recently Carter(1952) reported the capsule antigens of Pasteurella multocida could be divided into four serological types A,B,C and D by means of precipitation tests. Subsequently he showed that the most sensitive for identification of these types involved the use of capsule substance adsorbed by erythrocytes in hemagglutination test. It may be somewhat difficult to conduct the hemagglutination test in small laboratory, because relatively large amounts of antisera and erythrocytes of the human O type are required for the test. A simple method for serological typing of P. multocida was the slide agglutination test employed by Little et al. (1943) and Namioka et al. (1962), but this method is still in controversy. The author tried adapting Carter's hemagglutination method to the slide method so called "micromethod technique", and studied on the stabilization of erythrocytes for use of slide hemagglutination to P. multocida although many invesigators reported the stabilization of erythrocytes. The results obtained are summarized as follows: 1. A simplified method (slide method) for capsule typing of the organism was developed by adapting Carter's hemagglutination reaction(tube method). Antibody-containing serum can be diluted serially on Boerner's microtest slide with capillary or serological pipetts with a considerable accuracy. The slide reaction can be carried out with case on the slide by adding $0.05m{\ell}$ of antigen-sensitized erythrocytes suspension diluted to one percent on $0.05m{\ell}$ of serially diluted antibody-containing sera, and the final result can be read after 60 minutes at the room temperature ($15^{\circ}C$). 2. It is difficult to determine superiority of inferiority between the slide method and the tube method on the pattern of the reaction of hemagglutination. 3. The pH range of 6.6 to 8.3 is optimal for the slide hemagglutination reaction. 4. The antigen-sensitization against erythrocytes at $37^{\circ}C$ is optimal for the slide hemagglutination. 5. Both the doses and concentration of antigen do not influence the antigen-adsorbing capacity of erythrocytes. 6. The reduction of antigen-sensitizing hours does not influence the antigen-adsorbing capacity of erythrocytes even 30 minutes. 7. The tannic acid treatment against formalinized and non-formalinized erythrocytes showed no effect on the reaction of hemagglutination. 8. The erythrocytes preserved at $4^{\circ}C$ in the ACD solution do not decrease the reactivity on the reaction of hemagglutination for 60 days, while they begin slight hemolysis 30 days after preserving. 9. The stable preparation of erythrocytes can be obtained by treating the cells at $37^{\circ}C$ for 20 hours with from 4 to 8 percent of formalin in saline or buffer. These cells can be preserved at $4^{\circ}C$ for more than 8 months experimented without hemolysis. With low concentration of formalin, the cells were not sufficiently stabilized resulting in the hemolysis after short period of preservation at $4^{\circ}C$. 10. The erythrocytes treated with 16 percent of formalin remain constantly or increase the reactivity for the reaction of hemagglutination. On the contrary, the cells treated with I to 8 percent of formalin decrease the reactivity. 11. There is no difference between nontreated fresh erythrocytes and the erythrocytes preserved in the ACD solution on the reactivity against the hemagglutination, and the erythrocytes treated with 16 percent of formalin showed the reactivity of higher level than that of the above two kinds of erythrocytes. 12. There is no difference between the saline and the isotonic buffer solution on the reaction of hemagglutination.
1987년(年) 3(월)月 부산수산대학(釜山水産大學) 어병학(魚病學) 실험실(實驗室)에서 사육중(飼育中)이던 틸라피아 (Oreochromis niloticus)에 세균성(細菌性) 질병(疾病)이 발생(發生)하여 만성적(慢性的)으로 몇마리씩 폐사(斃死)하였다. 본(本) 연구(硏究)는 이러한 질병(疾病)의 원인(原因)을 밝히기 위하여 원인균(原因菌)을 분리(分離)하였으며, 형태적(型態的), 생화학적(生化學的) 성상(性狀)을 관찰(觀察)하고 병원성(病原性), 약제감수성(藥劑感受性) 실험(實驗)을 하였으며 시험항원(試驗抗原)을 제작(制作)하여 그 항원성(抗原性)을 조사하였는바, 그 결과(結果)를 요약(要約)하면 다음과 같다. 1. 병어(病魚)에서 분리(分離)된 원인균(原因菌)은 Edwardsiella tarda로 동정(同定)되었다. 2. 분리균(分離菌)을 틸라피아에 접종하여 재현성실험(再現性實驗)을 한 결과(結果) 전형적인 E. tarda의 감염증상을 나타내고 사망(死亡)했으며, 어류(魚類)로부터 동일균(同一菌)을 얻을 수 있었다. 3. 분리균(分離菌)은 oxytetracycline에서 감수성(感受性)이 높았고, MIC는 6.9로 나타났다. 4. 분리균(分離菌)은 병원성(病原性)이 강한 균(菌)이었으며, 48-LD50은 $10^{6.4}cell$/fish 이었다. 5. 시험항균(試驗抗原)으로, 포르말린사균항원, 초음파처리항원, 균여과액항원을 사용하였으며, 이 세가지를 사용한 항원성시험(抗原性試驗) 결과 포르말린사균항원의 시험구에서 높은 응집가와 방어력을 나타내었다.
이 연구는 triptolide와 L-NAME의 측두하악관절 통증조절효과를 확인하기 위하여 포르말린으로 유도된 측두하악관절 통증모델에서 triptolide와 L-NAME의 소뇌연수조 내 각각의 얄물의 단독 투여에 따른 통증행위반응과 두 약물의 병용 투여에 따른 상호작용이 통증행위반응에 미치는 영향을 평가하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 먼저, 관절강 내로 주입한 5% 포르말린($30{\mu}l$)은 유의한 통증행위반응을 유발하였고, 2차 통증행위반응 관찰 시 포르말린 주입 전 $1{\mu}g/10{\mu}l$ triptolide 투여군($163.33{\pm}29.11$회)은 포르말린군($308{\pm}33.04$회)과 비교 시 통증행위반응이 유의하게 감소하였다. $0.1{\mu}g/10{\mu}l$의 L-NAME 투여군의 1, 2차 통증행위반응의 결과, 각각 $5.80{\pm}3.75$회, $92.30{\pm}16.04$회로 포르말린 주입군 $25.4{\pm}6.59$회, $285.60{\pm}29.93$회와 비교 시 유의하게 감소되었다. 다음으로, $1{\mu}g/10{\mu}l$의 triptolide와 $0.01{\mu}g/10{\mu}l$의 L-NAME 병용 투여군에서 1, 2차 통증행위반응이 $0.80{\pm}0.80$회, $96.50{\pm}26.16$회로 나타나 $22.50{\pm}19.15$회, $163.33{\pm}29.11$회로 나타난 $1{\mu}g/10{\mu}l$ trtiptolide군과 비교 시 유의하게 통증행위반응이 경감되었다. 이러한 연구결과는 측두하악관절 통증조절의 예방 및 치료에 있어 활용가능한 천연물로 triptolide가 제시될 수 있으며, 천연물과 화합물들의 병용 투여를 통해 그 효과를 증가시킬 수 있을 것으로 기대된다.
본 연구는 뱀장어 양식에서 오랜 기간 문제시되고 있는 에드와드병(Edwardsiellosis)에 대한 효과적인 백신 투여 방법의 가능성을 알아보고자하였다. 뱀장어 유래의 Edwardsiella tarda로부터 포르말린 불활화백신(FKC)을 제작하여, 크기가 다른 3개 그룹의 뱀장어($26.8{\pm}1.2g$, $7.1{\pm}0.7g$, $2.2{\pm}0.4g$)에 침지 및 경구 투여를 실시하였다. 그리고 혈청 응집항체가의 활성과 E. tarda 공격접종에 대한 방어력(상대생존율, RSP)의 변화를 조사하였다. 모든 그룹에서 응집항체가와 공격접종에 의한 방어력은 상관성이 없었다. 그러나 $26.8g{\pm}1.2g$그룹의 경우, 침지(10 mg/mL)와 침지(10 mg/mL)+경구(10 mg/g) 실험구에서 RSP는 각각 62.6% 및 52.2%를 나타내었으며, $7.1{\pm}0.7g$ 그룹의 경우, 침지(10 mg/mL)+경구(10 mg/g) 실험구에서 RSP는 56.8%로 나타나서 방어력(RPS>50%)이 확인되었다.
FDA가 공인한 항 HIV제로서 사용중인 AZT나 DDI와 같은 화합물은 장기 투여로 심각한 부작용들이 나타나고 있다. 그래서 기존의 activity를 가진 nucleoside류의 sugar 부분에 새로운 base 즉, 5-ethoxymethyl uracil을 축합, 3'-azido-2',3'-dideoxy-5-ethoxy-methyl uridine, 2',3'-aideoxy-3'-fluoro-5-ethoxymethyl uridine과 2',3'-dideoxy-5-ethoxymethyl uridine들을 합성, 구조활성 상관관계를 검토하였다. 이들의 합성은 먼저 적절한 group으로 sugar의 -OH group을 보호한후 uracil류와 반응, uridine 유도체를 먼저 합성하였다. 각각의 uridine 유도체들의 5-위치에 ethoxymethyl group을 도입하기 위해 formalin과 반응시킨후 5-hydroxy-methyl group을 도입하고 산촉매 하에 ethanol과 반응, ethyl ether류를 합성하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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