Fish protein hydrolysates (FPHs) with different degrees of hydrolysis by treatment with alcalase, pronase, flavourzyme and trypsin and isolated peptide were prepared from Hwangtae (yellow dried pollack, Theragra chalcogramma). Hwangtae protein hydrolysate was fractionated according to the molecular weight into six major types of APO1 (1.3 kDa), APO2 (1 kDa), APO3 (<1 kDa), APACE (<1 kDa), APG1 (70 kDa) and APG2 (70 kDa) isolated from the hydrolysate using consecutive chromatographic methods. Soluble peptide were produced from Hwangtae and evaluated for their nutritional and functional properties. Some functional properties of FPHs were assessed and compared with those of egg albumin or the soybean protein. APO2 had the highest nitrogen solubility value (94.2%), emulsion capacity and emulsion stability of the Alaska Pollack peptide ranged from 12.4 to 39.5 (mL of oil per 200 mg of protein) and 44.0% to 77.5%, respectively. Highest and lowest fat adsorption values were observed for APG1 (9.9 mL of oil per gram of protein) and APO3 (3.8 mL of oil per gram of protein), respectively.
Silk sericin protein was hydrolyzed by seven proteolytic enzymes in order to examine the effectiveness of the hydrolysates in binding calcium. The amino acid nitrogen content of hydrolysates from Flavourzyme was higher than that for other enzymes, and its calcium binding capacity showed a dose-dependent increase. We examined the effects of calcium binding peptide from sericin hydolysates on the bioavailability of Ca-deficient rats. Three-week-old male rats were fed an Ca-deficient diet for three weeks. Rats were divided into four groups (DD: non-treated group on calcium deficient diet; DD+MC: milk-calcium treated group; DD+OC: organic calcium made using sericin hydolysates; and DD+IC: inorganic calcium ($CaCl_2$). After oral administration of calcium supplements for one week, the calcium content of the serum and liver were significantly higher in DD+OC ($101.7{\mu}g$/mL and $49.3{\mu}g$/mL) and DD+MC ($83.6{\mu}g$/mL and $42.8{\mu}g$/mL) than DD ($86.3{\mu}g$/mL and $43.4{\mu}g$/mL). The alkaline phosphatase (ALP) content in the treated groups was significantly lower than DD, but no significant difference among groups was shown. Aspartate aminotransferase (AST) levels did not show any significant difference between groups. Alanine aminotransferase (ALT) levels were significantly reduced compared to the DD group. In conclusion, binding calcium to peptides from sericin hydrolysates seems to improve its bioavailability, and to hasten the cure of calcium deficiency in experimental rats.
Kim, Da Young;Yoo, Jung Sik;Cho, Yoon Ah;Yoon, Ho Sik;Kim, Cheol-Hyun
한국축산식품학회지
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제41권4호
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pp.687-700
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2021
This study performed to evaluate the applicability of functional dairy food materials by comparing the calcium solubilization ability and anti-inflammatory effects of hydrolyzed casein protein. Commercial enzyme (Alcalase®; Neutrase®; Protamex®; Flavourzyme®) was added to the 10% casein solution to prepare the casein hydrolysates. Samples obtained every hour [1:200 (w/v)]. According to results of measuring the degree of hydrolysis (DH), all of four enzymatic hydrolysates increased rapidly from 30 to 40 min, and after 150 min, there were no change. Protamex® and Neutrase® had the highest DH compared to others enzymatic hydrolysates. After that, peptides obtained throughout a preparative liquid chromatography system. In the calcium solubility experiments, neutrase fraction (NF) 4 and NF7 showed similar activities with casein phosphopeptide (CPP). In vitro cell experiments showed that no cytotoxicity except for NF6. Also, the production of nitric oxide (NO) inhibited as the concentration of fraction samples increased. The cytokine (IL-1α, IL-6, and TNF-α) production was lower than lipopolysaccharide (+) group significantly. Therefore, the possibility of anti-inflammatory activity found in the hydrolyzed samples. According to the above experiments, NF3 and Protamex Fraction (PF) 3 selected. Amino acids selected throughout an AccQ-Tag system. As a result, 17 species of amino acids and several species of unknown amino acids identified. Both fractions had the highest content of phenylalanine. This study identified the potential of biologically active and functional peptides derived from casein that affect the food and dairy industry.
참기름 제조의 부산물인 참깨박의 활용도를 높이기 위하여 효소 처리에 의한 참깨박 불용성 단백질의 추출 조건을 조사하였다. 단백질 분해효소인 Alcalase, Flavourzyme, Neutrase, Protamex의 처리 결과를 대조구와 비교한 결과 Protamex가 고형분과 단백질 함량 증가에 효과적이었다. Protamex의 반응 조건(50 ℃, pH 6.0)에서 효소의 사용량은 탈지 참깨박의 1%, 효소반응시간은 3시간이 적당하였다. 효소 처리 효율을 향상시키기 위하여 참깨박을 열처리하면, 열처리 온도가 증가할수록 추출되는 단백질 함량은 증가하였으며 110이상에서는 미미하게 증가하였다. 세포벽 분해효소(Tunicase)와 단백질 분해효소의 병용처리가 단백질 가용화에 미치는 효과를 조사한 결과, 단백질 분해효소를 처리한 다음에 세포벽 분해효소를 처리하는 것이 가장 효과적이었다. 열처리(110 ℃, 10분) 후 Protamex와 Tunicase를 순차적인 처리로 단백질 함량이 열처리와 효소처리하지 않은 대조구의 약 3.6배(9.85→35.58 mg/mL), 열처리만 실시한 대조구의 약 2.2배(15.83→35.58 mg/mL) 증가하였다.
This study aimed to obtain high Fischer's ratio oligopeptides from goat whey (HFO) and investigate antioxidant property of it. Hydrolysis of goat whey was done with the approach of sequential digestion of pepsin and flavourzyme. With the adsorption of aromatic amino acids by activated carbon, HFO with a Fischer's ratio of 27.070 and a molecular weight of 200-1,000 Da were obtained, and the branched-chain amino acids accounted for 22.87%. Then the antioxidant activity of HFO was evaluated. At the concentrations of 2.0 mg/mL and 0.50 mg/mL, HFO scavenged 77.27% and 99.63% of 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl and 3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate free radicals respectively. The scavenging rate of HFO against hydroxyl radicals reached 92.31% at the concentration of 0.25 mg/mL. Animal experiments demonstrated that HFO could moderate the changes of malondialdehyde, superoxide dismutase and glutathione peroxidase caused by CCl4-induced oxidative stress in vivo. This study indicated that HFO from goat whey was capable of oxidation resistance both in vivo and in vitro, which provided a scientific basis for the high-value processing and application of goat milk whey.
Farouq Heidar Barido;Puruhita;Bayu Setya Hertanto;Muhammad Cahyadi;Lilik Retna Kartikasari;Joko Sujiwo;Juntae Kim;Hack-Youn Kim;Aera Jang;Sung Ki Lee
Animal Bioscience
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제37권7호
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pp.1277-1288
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2024
Objective: This study was aimed to investigate the effect of fresh and dried hydrolyzed Cordyceps militaris (CM) mushroom with proteolytic enzymes; bromelain (CMB), flavorzyme (CMF), and mixture of bromelain: flavorzyme (CMBF) on quality properties of spent hen chicken. Methods: Mushroom extract (CME) were combined with three proteolytic enzyme mixtures that had different peptidase activities; stem bromelain (CMB), flavorzyme (CMF), and mixture of stem bromelain:flavorzyme (CMBF) at (1:1). The effect of these hydrolysates was investigated on spent hen breast meat via dipping marination. Results: Hydrolyzation positively alters functional properties of CM protease. in which bromelain hydrolyzed group (CMB) displayed the highest proteolytic activity at 4.57 unit/mL. The antioxidant activity had a significant increment from 5.32% in CME to 61.79% in CMB. A significantly higher emulsion stability index and emulsification activity index compared to CME were another result from hydrolyzation (p<0.05). Texture properties along with the shear force value and myofibrillar fragmentation index were notably improved under CMB and CMBF in fresh condition. Marination with CM mushroom protease that was previously hydrolyzed with enzymes was proven to also increase the nucleotide compounds, indicated by higher adenosine 5'-monophosphate (AMP) and inosine 5'-monophosphate (IMP) in hydrolysate groups (p<0.05). The concentration of both total and insoluble collagen remained unchanged, meaning less effect from CM protease. Conclusion: This study suggested the hydrolyzation of CM protease with bromelain or a mixture of bromelain:flavourzyme to significantly improve functional properties of protease and escalate the taste-related nucleotide compounds and texture profiles from spent hen breast meat.
온주밀감 및 당유자 진피 추출물의 추출수율은 탄수화물분해효소인 viscozyme 추출물과 단백질분해효소인 kojizyme 추출물에서 높았으며, 당유자의 효소 추출물들이 온주밀감에 비하여 높게 나타내었다. 총 폴리페놀 함량은 탄수화물분해효소인 ultaflo와 단백질분해효소인 alcalase 및 flavourzyme에서 높았으며, 온주밀감 추출물들이 당 유자에 비하여 높게 나타내었다. 총 플라보노이드 함량은 탄수화물분해효소인 ultaflo와 단백질분해효소인 alcalase 및 물 추출물에서 높았다. DPPH radical 소거활성은 온주밀감에 비하여 당유자의 효소 추출물에서 매우 높게 나타났으며, 탄수화물분해효소인 viscozyme과 단백질분해효소인 kojizyme에서 가장 높았다. 특히 viscozyme 추출물은 86% 이상의 매우 높은 활성을 나타내었다. Hydrogen peroxide 소거활성은 추출물의 농도가 증가됨에 따라 약간씩 증가하였으나, 2.0 mg/mL에서는 온주밀감 진피의 kojizyme 추출물을 제외하고는 91% 이상의 매우 높은 활성을 나타내었다. Alkyl radical 소거활성은 추출물의 농도가 증가됨에 따라 급격히 증가하였으며, 모든 효소 추출물들은 0.5 mg/mL 이상에서 매우 높은 활성을 나타내었다. Hydroxyl radical 소거활성은 추출물의 농도가 증가됨에 따라 급격히 증가하였으며, 모든 효소 추출물들은 다른 활성산소종들의 활성에 비하여 상대적으로 낮은 활성을 나타내었다.
제주 연안에 서식하는 해양 녹조류와 갈조류의 항고혈압 활성을 알아보기 위해 해조류로부터 메탄올과 물을 이용하여 상온($20^{\circ}C$)과 $70^{\circ}C$에서 각각 4가지 종류의 추출물을 제조하여 스크리닝하였다. 결과, 녹조류에서는 비교적 낮은 ACE 저해활성을 보였으나, 갈조류에서는 70ME 잇바디괭생이모자반, 말미역, 바위주름, 넓패, 톳, 다시마 및 70AE 감태에서 ACE 저해활성이 높게 나타났다. 또한 70AE 감태의 가수분해물은 $2.33{\sim}3.56{\mu}g/mL$의 $IC_{50}$값을 보여 매우 높은 ACE 저해활성을 확인할 수 있었다. 이는 해조류의 ACE 저해활성이 수용성 추출물뿐만 아니라 메탄올 추출물에서도 나타나는 것은 해조류 유래 fucoxanthin, phlorotannin 및 polyphenol계 화합물 등에 의한 영향도 있을 것으로 사료된다.
연어 훈제 가공품의 제조 중 부산물로 발생하는 연어 frame을 곰탕 유사 제품과 같이 보다 효율적으로 이용할 목적으로 연어 frame 엑스분의 제조를 시도하였고, 아울러 이의 특성을 시판 제품과 비교 검토하였다. 연어 frame 엑스분은 연어 frame에 대하여 12배의 가공용수를 가한고, 12시간 동안 열수추출하여, 원심분리 및 정용(추출을 위하여 사용한 가공용수의 25%로 정용)하여 제품화 하는 것이 가장 좋았다. 최적조건에서 제조한 연어 frame 엑스분은 중금속적인면에서는 안전한 범위이었고, 주 맛성분은 glutamic acid와 aspartic acid등이었다. 또한, 연어 frame엑스분의 주요 총아미노산은 glycine, proline 및 glutamic acid 등이었고, 칼슘과 인의 함량은 $1{\sim}2$인분 기준(시판 제품에서 $1{\sim}2$인용으로 시판되는 용량인 500mL 기준)에서 1일 권장량의 약 20% 및 18%에 해당하는 함량이었다. 연어 frame엑스분은 고혈압 억제능인 ACE 저해능은 거의 인정되지 않았으나, 이를 Flavourzyme으로 4시간 가수분해하는 경우 ACE 저해능$(IC_{50}=2mg/mL)$이 상당히 개선되었다. 그러나 연어 frame 엑스분의 고혈압 저해능을 기대하기 위하여는 적절한 가수 분해 조건의 구명이 동반되어야 하리라 판단되었다. 이상의 결과로 미루어 보아 연어 frame에 대하여 12배의 가공용수를 가하고, 12시간 동안 열수추출하여, 원심분리 및 정용(연어 frame에 대하여 3배에 해당하는 용량)한 다음 적절히 효소 가수분해하는 경우 곰탕 유사 제품의 베이스로 사용 가능하리라 판단되었다.
굴 효소 가수분해물은 굴을 alcalase, protamex, neutrase, flavourzyme, pepsin으로 각각 처리하였고, 이들의 ACE 저해활성을 측정하였다. ACE 저해활성은 가수분해 시간에 따라 증가 또는 감소하였으며, 그 중 10시간 이상 가수분해 처리한 PEH에서 가장 높은 ACE 저해활성을 나타내었다. PEH 가수분해물을 한외여과(30, 10 kDa) 하여 낮은 분자량의 분획물을 얻었다. 30 kDa와 10 kDa 이하 분자량 별 ACE 저해활성은 각각 $69.18{\pm}0.75$, $83.71{\pm}1.12$의 활성을 나타내었다. 이 결과 10 kDa 이하의 시료로부터 HPLC column (watchers 120 ODS-AP $250{\times}4.6$ ($5{\mu}m$))을 이용하여 각각의 활성 분획을 분취하여 얻은 6분획의 ACE 저해 활성은 29.56~85.85% 로 나타났다. 그 중 저해활성이 가장 높게 나타나는 B fraction의 아미노산 서열을 확인한 결과 Leu-Gln-Pro 임을 확인하였고, peptide합성하여 얻은 저해활성 농도($IC_{50}$)가 1.18 uM임을 확인하였다. 이러한 결과는 PEH를 이용하여 건강 기능성 식품의 개발에 도움이 될 수 있을 것으로 생각된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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