Kim, Wi-Sik;Ok, Ha-Na;Kim, Do-Hyung;Kim, Heung-Yun;Oh, Myung-Joo
Journal of fish pathology
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v.24
no.3
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pp.237-245
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2011
Disease survey was conducted to investigate the cause of high mortality in 23 farms of eel, Anguilla japonica, during the period from 2000 to 2010. Seven kinds of fish pathogens were confirmed in the tested fish, which included: Pseudodactylogyrus sp. (infection rate: 65.5%, 19/29 samples), aquabirnavirus (ABV, 62.5%, 15/24 samples), Edwardsiella sp. (44%, 11/25 samples), anguillid herpesvirus 1 (AngHV1, 16.7%, 2/12 samples), Heterosporis sp. (10.3%, 3/29 samples), Vibrio sp. (8%, 2/25 samples), Trichodina sp. (3.4%, 1/29 samples). The rate of single infection was 44.8% (13/29 samples), while 62.1% (18/29 samples) showed mixed type of infection with 2 to 5 different pathogens. The most predominant mixed infection were Pseudodactylogyrus sp.-Edwardsiella sp. (10.3%, 3/29 samples), Pseudodactylogyrus sp.-ABV (10.3%, 3/29 samples), Edwardsiella sp.-ABV (6.9%, 2/29 samples). Infection by the above infectious parasites, bacteria and virus was confirmed in tested eels of juvenile to adult sizes that were cultured at $25{\sim}30^{\circ}C$ in almost the examined farms.
Kim, Min-Sun;Park, So-Hyun;Kim, Dong-Hwi;Heo, Moon-Soo
Journal of Life Science
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v.24
no.8
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pp.880-886
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2014
In this study, we isolate and identify bacteria from seawater collected from Jeju coast, to evaluate the antimicrobial activity against the fish pathogenic bacteria. 14 bacterial strains were isolated and identified using physiological, biochemical and molecular tools. Antibacterial activity of all the 14 isolates were screened against four major fish pathogens namely, two Gram-positive: Streptococcus iniae, Streptococcus parauberis and two Gram-negative: Vibrio anguillarum, Edwardsiella tarda. Results revealed that among the 14 isolates, MK-11 was found to have antibacterial activity against S. iniae, S. parauberis, V. anguillarum Particularly, S. iniae was susceptibility with the MIC value of $250{\mu}g/ml$. The biochemical and physio-chemical results reveal that MK-11 had the sugar-alcohol disassemble ability of the D-sorbitol and D-mannitol. Also the utilization of the yeast extract, sorbitol and di-potassium phosphate were noted to be high. The optimum culture condition such as pH and temperature was recorded as pH 6.0, $25^{\circ}C$ and along with 1% NaCl which differs from the previous reports particularly in nutrient resolutions. As results of the analysis of 16S rDNA sequences, MK-11 show the high similarity with Paenibacillus polymyxa, P. jamilae, P. brasilensis 99.78%, 99.43%, 99.39%, repectively. Hence, in the present study, the isolated Paemibacillus sp. MK-11 from Jeju seawater possesses the antibacterial activity against fish pathogens and it could be used as a new antibiotic agents against the gram positive fish pathogens.
Khan, Raees;Lee, Myung Hwan;Joo, Haejin;Jung, Yong-Hoon;Ahmad, Shabir;Choi, Jinhee;Lee, Seon-Woo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.25
no.4
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pp.511-520
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2015
Triclosan, the widely used biocide, specifically targets enoyl-acyl carrier protein reductase (ENR) in the bacterial fatty acid synthesis system. Although the fish pathogen Aeromonas salmonicida subsp. salmonicida exhibits triclosan resistance, the nature of this resistance has not been elucidated. Here, we aimed to characterize the triclosan resistance of A. salmonicida subsp. salmonicida causing furunculosis. The fosmid library of triclosan-resistant A. salmonicida subsp. salmonicida was constructed to select a fosmid clone showing triclosan resistance. With the fosmid clone showing triclosan resistance, a subsequent secondary library search resulted in the selection of subclone pTSR-1. DNA sequence analysis of pTSR-1 revealed the presence of a chromosomal-borne fabV-encoding ENR homolog. The ENR of A. salmonicida (FabVas) exhibited significant homology with previously known FabV, including the catalytic domain YX(8)K. fabVas introduction into E. coli dramatically increased its resistance to triclosan. Heterologous expression of FabVas might functionally replace the triclosan-sensitive FabI in vivo to confer E. coli with triclosan resistance. A genome-wide search for fabVas homologs revealed the presence of an additional fabV gene (fabVas2) paralog in A. salmonicida strains and the fabVas orthologs from other gram-negative fish pathogens. Both of the potential FabV ENRs expressed similarly with or without triclosan supplement. This is the first report about the presence of two potential FabV ENRs in a single pathogenic bacterium. Our result suggests that triclosan-resistant ENRs are widely distributed in various bacteria in nature, and the wide use of this biocide can spread these triclosan-tolerant ENRs among fish pathogens and other pathogenic bacteria.
Edwardsiella tarda predominantly causes edwardsiellosis in fish at high temperature, but is rarely isolated from water when water temperature is low. However, E. tarda is viable but nonculturable (VBNC) in low water temperature, but it can be revived when water temperature rises and cause disease to fish. Therefore, in order to prevent disease, it is very important to identify pathogens that are in the VBNC state in environmental water. In this study, E. tarda cells in the VBNC state were detected by the ethidium monoazide (EMA)-PCR method using the low-temperature oligotrophic sea water microcosm obtained by inoculation of E. tarda at a concentration of $10^8CFU/ml$. In order to distinguish between live and dead bacteria in E. tarda, each sample was treated with EMA at different concentrations, photoactivated with a 500 W halogen lamp, and PCR was performed with E. tarda specific primer. At the concentration of $10^7CFU/ml$ bacterium, DNA amplification was observed only in the live cells when treated with $60{\mu}g/ml$ of EMA, and smaller amounts of live cells could be distinguished from dead cells by adjusting the EMA concentration. In addition, the VBNC cells of E. tarda in the oligotrophic low temperature seawater microcosm were estimated to be in the range of $10^4{\sim}10^5CFU/ml$ by EMA-PCR. Therefore, it is possible to detect VBNC cells that will act as potential pathogens in environmental water using EMA-PCR method, and quantitative confirmation using concentration change is also possible.
Eung Jun Lee;Lyu Jin Jun;Young Juhn Lee;Yeong Eun Oh;Sung Hyun Kim;Heung-soe Kim;Ye Ji Kim;Joon Bum Jeong
Journal of fish pathology
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v.37
no.1
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pp.89-96
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2024
Kudoa septempunctata, a myxozoan parasite, usually presents without any signs and primarily infects adult fish. The invasive diagnostic methods, such as tissue biopsy, can identify pathogens, but cause economic losses because they require killing the fish. In this study, we conducted a monitoring of four fish farms located on Jeju Island, to investigate the potential for non-invasive diagnosis of K. septempunctata using hyperspectral cameras. It provides spectral information from R000_B000_G000 to R255_B255_G255 for a total of 3,282 olive flounder (Paralichthys olivaceus). Each object is imaged with 2,000 data points, allowing comprehensive spectral analysis by comparing images obtained from negative control objects to positive control objects. Noticeable differences were observed in the brightness or pallor of the positive control images. This suggests the potential utility of hyperspectral imaging as a non-invasive diagnostic tool for detecting K. septempunctata infections in fish populations.
Olive flounder (Paralichthys olivaceus) is an important aquaculture fish species in Jeju Island, South Korea. Due to the intensification of flounder fish farming, huge amounts of chemical antibiotics are used against several fish diseases. This has many harmful side effects on fish, as well as human consumers. Hence, an alternative to chemical antibiotic agents is needed for disease control. In this study, three strains of rhizobacteria (BRH433-2, TRH415-2, and THJ609-3) were isolated from the rhizosphere of plants. Assays of their antibacterial activity against fish pathogens, such as S. iniae, S. parauberis, V. anguillarum, and E. tarda, were performed with untreated broth culture (without cell separation), supernatant, and precipitated pellets separated by centrifugation. Among these, the cell suspension prepared from the precipitated pellet showed significant antimicrobial activity when compared with that of the untreated broth culture and centrifugal supernatant. These results indicate that the three isolated rhizobacterial strains exhibit antibacterial activity. Analysis of the 16S rDNA sequences of the BRH-433-2, THJ609-3, and TRH415-2 strains showed the highest similarity to Burkholderia gladioli (99.5%), Pseudomonas baetica (97.7%), and P. koreensis and P. baetica (98.4%), respectively. We suggest that the strains hold promise in disease management of fish.
Kim, Ji-Hoon;Kim, Se-Bong;Hwang, Hye-Jin;Kim, Young-Mog;Lee, Myung-Suk
Journal of Food Hygiene and Safety
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v.31
no.5
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pp.380-385
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2016
The object of this study was to evaluate antibacterial activity of edible seaweed extracts against marine bacterial pathogens including Edwardsiella tarda, Streptococcus iniae, Streptococcus parauberis, Vibrio anguillarum, Vibiro harveyi and Vibrio scophthalm, which are associated with human or fish infectious disease. Ecklonia cava methanolic extract showed a strong and broad spectrum antibacterial activity against marine bacterial pathogens used in this study. Among solvent-soluble fractions of the E. cava extract, the ethyl acetate (EtOAc) soluble fraction showed the strongest antibacterial activity against marine bacterial pathogens tested in this study with MIC in the range of $128-256{\mu}g/mL$. Furthermore, HPLC analysis revealed that the soluble fraction contains abundant dieckol, a phlorotannin compound, compared to other solvent soluble fractions, suggesting that phlorotannins including dieckol would be a key antibacterial agent against marine bacterial pathogens.
Aquatic animal raised in hatcheries play an important role in supplying seedling to stock enhancement and seed quality, especially, seed health is the key factor for survival in the field after release and for stocking effectiveness. We have inspected the hatchery-reared seeds of 33 marine species and 12 freshwater species for legally designated diseases in stock enhancement program in 2010. Results showed that abalone was the most abundant as 20.0% in the marine species group and then sea cucumber (15.6%), olive flounder (8.4%), rockfish (6.7%), black sea bream (6.3%) and swimming crab (6.1%) were followed. Crucian carp was the most abundant as 19.4%, and then eel (11.8%), Korean bullhead (10.9%), mandarin fish (10.8%), melanian snail (8.4%), catfish (7.7%) were followed in the freshwater species group. The total number of inspection cases for eight pathogens in this study were 2,105 and disqualification cases were 30 by detection of aquatic animals pathogens such as koi herpesvirus (KHV), red sea bream iridovirus (RSIV), white spot syndrome virus (WSSV) or viral haemorrhagic septicemia virus (VHSV).
The antimicrobial effects of ten isothiocyanates (ITCs) present in cruciferous vegetables and radish root hydrolysate were investigated against pathogenic bacteria from olive flounder. Minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) were measured against two gram-positive bacterial strains (Streptococcus parauberis, S. iniae) and four gram-negative bacterial strains (Edwardsiella tarda, Vibrio ichthyoenteri, V. harveyi, Photobacterium damselae) by using a broth microdilution technique. The antibacterial activity of ITCs was in the order sulforaphane > sulforaphene > phenylethyl ITC > erucin > benzyl ITC > iberin > I3C > allyl ITC > phenyl ITC > hexyl ITC. The susceptibility of fish pathogens to ITCs was in the order of V. harveyi > E. tarda > P. damselae > S. parauberis > S. iniae > V. ichthyoenteri. Antimicrobial activity (MIC) of radish root hydrolysate was 0.250 mg/mL against S. iniae, 0.438 mg/mL against S. parauberis, and 0.500 mg/mL against both E. tarda and V. harveyi. The aliphatic ITCs were potent inhibitors of the growth of fish pathogens, followed by aromatic ITCs and indolyl ITC. The presence of a double bond in the chemical structure of ITCs decreased antibacterial activity, while ITCs with a thiol (-S-) group and a longer carbon chain increased antibacterial activity. These results suggest that ITCs have strong antibacterial activities and may be useful in the prevention of fish pathogens.
In this study, carp edemavirus disease and herpesviral hematopoietic necrosis were examined in carp (Cyprinus carpio) and crucian carp (Carassius auratus) imported from China. From August 2016 to May 2017, 100 carp and 300 crucian carp were examined. There were no clinical symptoms in all the tested fish, and no internal or external parasitic infections were identified except for the detection of Argulus sp. in one leather carp. Carp edema virus disease was examined by PCR in C. carpio, but all were negative. In C. auratus, herpesviral hematopoietic necrosis was tested by PCR and 4 out of 300 were positive. The results of this study are expected to be useful as basic data for conducting risk analysis on the relevant organisms and counterpart countries or for designating new pathogens for quarantine.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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