For the investigation of the properties of aqueous fibroin solution, the variation of molecular weight by agregation of silk, morphology and difference of molecular weight at pI value was investigated. The distribution of molecular weight investigated using gel filtration chromatography and formation of aggregates were confirmed by using Field emission scanning electron microscope. The precipitation of fibroin solution at its pI value was compared by molecular weight distribution and the formation of fibroin aggregated were investigated. The aggregation kinetics were investigated at various condition.
This study was conducted to examine the changes in the molecular structure and physiological activities of silk fibroin by gamma irradiation. The results of gel permeation chromatography and sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis showed that the molecular weight of fibroin was increased depending upon the irradiation dose. Secondary structure of fibroin determined by using circular dichroism revealed that the ratio of $\alpha$-helix was increased up to 10 kGy and then decreased depending upon the irradiation dose. Whereas, the ratio of $\beta$-sheet, $\beta$-turn, and random coil were decreased and then increased with an alteration in the $\alpha$-helix secondary conformation. The 2.2-diphenyl-1-picryl-hydrazil (DPPH) radical scavenging activity of fibroin was increased by gamma irradiation at 5 kGy, but was decreased above 10 kGy depending upon the irradiation dose. Also, the inhibition activities of tyrosinase and melanin synthesis of fibroin were increased by gamma irradiation. These results indicated that gamma irradiation could be used as an efficient method to make fibroin more suitable for the development of functional foods and cosmetics.
This study aimed to develop a novel bioactive hybrid xerogel consisting of silk fibroin /$SiO_2-CaO-P_2O_5$ by sol-gel process at room temperature. Scanning electron microscopy (SEM), FT-IR Spectroscopy, pore measurement, mechanical property testing, in vitro bioactivity test and cytotoxicity assay were performed to characterize the xerogel for bone tissue engineering application. We have found that the xerogel possessed excellent pore structures and mechanical property. Once immersed in a simulated fluid (SBF), the xerogel exhibited profound bioactivity by inducing hydroxyapatite layers on its surfaces. The cell toxicity study also demonstrated that there was little toxic to MC3T3-E1 cells. These results indicate that silk fibroin /$SiO_2-CaO-P_2O_5$ hybrid xerogel potentially could be used as a bone tissue engineering material.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.3
no.1
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pp.1-6
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2001
Silk protein has been investigated by many researchers to apply to biomedical field. We reviewed biomedical applications of silk protein such as matrix of wound dressing and drug delivery system. Since silk fibroin/ poly (ethylene glycol) (PEG) semi-interpenetrating polymer networks showed good mechanical properties and wound healing phenomena, it can be used as wound dressing materials. Sericin nanoparticles pre- pared by conjugation with PEG and silk protein/ poloxamer mixture gel are expected to become a deliv- ery as matrix for hydrophobic drug.
It has been known that the silk degumming treated by hot alkali solution is easy to handle but is liable to yield poor-quality silk due to the degree of degumming loss, incomplete-degumming or over-degumming. Therefore, many studies have been carried out on the silk degumming by enzyme in order to improve the quality of silk. However, no attention has been paid to the physicochemical analysis of enzymatic degummed silk. In this paper, two different degumming methods, soap and enzymatic, are compared in aqueous solution state of silk fibroin. The results can be summarized as follows: There was no significant difference between two solutions on the bases of polarizing microscopy, TEM observation and SDS-PAGE. Spherulite of silk fibroin was not observed in polarizing microscopy, however the leaf-shape fibril structure was developed upon solidification. The size of spherulites of silk fibroin in TEM observation were 30~120nm with a wide range of size distribution. The intrinsic viscosity of enzymatic degummed fibroin solution was lower than that of soap degummed solution. This can be explained that the silk fibroin was more degraded by enzymatic degumming method compared with the soap degumming method. SDS-polyacrylamide gel electrophoresis showed that the fibroin molecule was composed of large component of molecule weight above 50 kd and small component of molecule weight about 20 kd. There was no difference in crystallinity between two degumming methods on the bases of results of DSC thermograms and IR spectra.
Antheraea yamamai silk fibroin powder was prepared by treatment with HCl. The prepared A. yamamai fibroin hydrolysate was characterized by gel filtration chromatography, amino acid analysis, X-ray diffractometry, circular dichroism analysis, differential thermal analysis, and thermogravimetry. The average molecular weight of A. yamamai powder was about 430 and the major amino acids composed of the powder were Ala and Ser. According to XRD analysis, A. yamamai silk powder showed sharp diffraction peaks at $2{\theta}=20.34^{\circ}\;and\;31.5^{\circ}$. CD spectrum showed a peak around 220 nm and a should 215 nm, assigned to ${\alpha}-helix\;and\;{\beta}-sheet$ structure, respectively. DSC and TGA showed that the maximum degradation temperature of powder was around $250{\sim}270^{\circ}C$. Moreover, no harmful heavy metal was contained in the A. yamamai silk fibroin hydrolysate.
Changes of silk protein compositions of average molecular weight (Mw) and free amino acid composition to different solubility conditions were studied by SDS-polyacrylamide electropholesis, gel permeation chromatography (GPC), and free amino acid analysis method. We can not detected average molecular weight distribution of different hydrochloric acid (HCl) conditions as SDS-polyacrylamide method, but as using GPC method, molecular weight distribution of 2N-HCl, 1N-HCl and 0.5N-HCl (3 hrs at $110^{\circ}C$ treated) are confirmed Mw 800, 1,500 and 3,700, respectively. The average molecular weight of calcium chroride and calcium chloride-enzyme treated samples are shown Mw 46,800 and 12,500, respectively. The degree of hydrolysis and the composition of the free amino acid in the fibroin hydrolysates effected significantly composition of free amino acids of the fibroin powder. The increase of the degree of hydrolysis and ratio of free amino acids and oligopeptides were found to be directly related to the concentration of hydrochloric acid and treatment of enzyme, resulting in the increase of water solubility.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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