The purpose of this study was typing the plasmid mediated extended spectrum ${\beta}-lactamases$ produced by enteric bacteria isolated from rivers in Pusan. Six strains of Eschericha coli and fifteen strains of Klebsiella pneumoniae transferred their plasmid mediated extended spectrum ${\beta}-lactamase$ genes to the recipient strain Eschericha coli J53 $Azid^{R}$. The plasmid mediated extended spectrum ${\beta}-lactamase$ genes were sequenced directly after PCR and the types were determined by the BCM Search Launcher and GenBank nucleotid database. Determined types of the plasmid mediated extended spectrum ${\beta}-lactamases$ were TEM-52 and SHV-12. TEM-52 was isolated from both Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae. However SHV-12 was isolated from Klebsiella pneumoniae only. The results indicated that the plasmid mediated extended spectrum ${\beta}-lactamase$ producing bacteria spreded over the area of clinical to the nature in Korea.
The production of extended-spectrum ${\beta}$-lactamases ($ESBL_S$) of the TEM or SHV type by bacterial pathogens is a major threat to the use of the clinically important expanded-spectrum cephalosporins. The characterization of the SHV ESBLs producing Klebsiella pneumoniae strains present in clinical isolates is time-consuming processes. We describe here in the development of a novel system, which consists of a real time PCR. We found 11 K. pneumoniae strains to be presumptive strains ESBLs producers by clinical and laboratory standards institute (CLSI) guidelines. The double disk synergy test showed 8 ESBL positive and conventional PCR showed 10 SHV ESBL positive, which were K. pneumoniae strains isolates. By real time PCR analysis, SHV gene in 11 of 11 strains were identified. When sequencing analysis was compared with real time PCR, both analysis were presented 99% similarity. In this study, we used a rapid, sensitive, and specific real-time PCR (RT-PCR) method for detection of the assay SHV ESBL producing K. pneumoniae strains in clinical isolates.
Weldhagen Gerhard F.;Kim, Bok-Hee;Cho, Chan-Hwi;Lee, Sang-Hee
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.16
no.11
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pp.1837-1840
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2006
Because there are no unified nomenclature systems for either GES-type or IBC-type extended-spectrum ${\beta}-lactamases$ (ESBLs), we propose a unified and definitive nomenclature system for GES/IBC-type ESBLs. This proposed nomenclature update is greatly helpful in two points: (i) it would not confuse microbiologists studying GES-type ESBLs, fundamentally preventing misleading nomenclature of these antibiotic resistance genes, and (ii) the definitive renaming of GES/IBC-type ESBLs can help some researchers to correctly designate new GES-type ESBLs such as novel enzymes identified trom some nationwide surveys.
To develop a rapid and reliable single-tube-based PCR technique for detection simultaneously the quinolone resistance qnrA, qnrB and qnrS genes. After multiple alignment, primers were designed to detect known qnr variants. I was used for A total of 43 extented-spectrum ${\beta}$-lactamases (ESBLs) producing Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae isolated from university hospital were tested for screening, as with qnr genes. In optimized conditions, all positive controls confirmed the specificity of the PCR primers. Out of 43 isolates, qnrA genes were detected 19 (44.2%), qnrB genes 5 (11.7%), qnrS genes 15 (34.9%) and 8 (18.6%) isolates were not detected. I report here a fast and reliable technique for rapid screening of qnr positive strains to be used for epidemiological surveys.
Song Jae Seok;Jeon Jeong Ho;Lee Jung Hun;Jeong Seok Hoon;Jeong Byeong Chul;Kim Sang Jin;Lee Jung Hyun;Lee Sang Hee
Journal of Microbiology
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v.43
no.2
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pp.172-178
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2005
To determine the prevalence and genotypes of $\beta$-lactamases among clones of a metagenomic library from the cold-seep sediments of Edison seamount (10,000 years old), we performed pulse-field gel electrophoresis, antibiotic susceptibility testing, pI determination, and DNA sequencing analysis. Among the 8,823 clones of the library, thirty clones produced $\beta$-lactamases and had high levels of genetic diversity. Consistent with minimum inhibitory concentration patterns, we found that five ($167\%$) of thirty clones produced an extended-spectrum $\beta$-lactamase. 837- and 259-bp fragments specific to bla$_{TEM}$ genes were amplified, as determined by banding patterns of PCR amplification with designed primers. TEM1 was the most prevalent $\beta$-lactamase and conferred resistance to ampicillin, piperacillin, and cephalothin. TEM-116 had a spectrum that was extended to ceftazidime, cefotaxime, and aztreonam. The resistance levels conferred by the pre-antibiotic era alleles of TEM-type $\beta$-lactamases were essentially the same as the resistance levels conferred by the TEM-type alleles which had been isolated from clinically resistant strains of bacteria of the antibiotic era. Our first report on TEM-type $\beta$-lactamases of the pre-antibiotic era indicates that TEM-type $\beta$-lactamases paint a picture in which most of the diversity of the enzymes may not be the result of recent evolution, but that of ancient evolution.
The emergence of extended spectrum ${\beta}$-lactamase producing bacteria is causing very serious problems in Korea. Although there have been many reports about these bacteria Isolated from patients and clinical specimens, there is no report of extended spectrum ${\beta}$-lactamase producing organisms isolated from natural environment in Korea. This study was conducted to investigate the biological characteristics and extended spectrum ${\beta}$-lactamase types of eighteen strains of extended spectrum ${\beta}$-lactamase producing Klebsiella pneumoniae and Escherichia coli isolated from a slaughterhouse in Pusan in Korea during 2002 to 2004. Extended spectrum ${\beta}$-lactamases were identified by double-disk synergy test, conjugation, isoelectric focusing values and gene sequencing. Eight strains of Klebsiella pneumoniae and two strains of Eschericha coli were isolated kom pigs and transferred extended spectrum ${\beta}$-lactamase genes to recipient Escherichia coli J53 (sodium azide resistant and ceftazidime senstive) strain by conjugation. The conjugants of extended spectrum ${\beta}$-lactamase genes were alignments and translated to amino acids by BCM and NCBI blast. Eight conjugants of Klebsiella pneumonae were typed TEM-52, and two strains of Escherichia coli, SHV-12, but CMY-1 type were not detected in this study.
The production of extended-spectrum ${\beta}$-lactamases ($ESBL_S$) is the main mechanism of bacterial resistance to third-generation cephalosporins and monobactams, whose prevalence varies depending on the different geographical areas. In the last years it has increased notably to the point of being considered a health problem of great importance. The characterization of the ESBLs producing Klebsiella penumoniae strains present in clinical isolates is time-consuming. I describe here the development of a new system, which consists of a multiplex PCR. I found 51 K. pneumoniae strains to be presumptive strains ESBLs producers by clinical and laboratory standards institute (CLSI) guidelines. The double disc synergy test showed 47 positive K. pneumoniae, which were K. pneumoniae isolates. All ESBLs producing K. pneumoniae strains were resistant to antibiotic amikacin, gentamicin and ciprofloxacin. By multiplex PCR analysis, $bla_{TEM}$ gene in 17 strains 44 $bla_{SHV}$ genes and $bla_{CTX}$ genes in 33 strains were identified. In this study, the multiplex polymerase chain reaction (PCR) assay was a good method to detect and differentiate ESBLs producing K. penumoniae strains in clinical isolates.
Background: Extended-spectrum ${\beta}$-lactamases(ESBL) are enzymes that confer resistance to oxyimino-${\beta}$-lactams as well as to penicillins and cephalosporins. Strains of Klebsiella pneumoniae and Escherichia coli that produce ESBL have been increasingly prevalent in many countries. The purpose of this study was to investigate the ESBL production rate of K. pneumoniae and E. coli at the in Yeungnam University Medical Center. Materials and Methods: Thirty-one isolates of K pneumoniae and twenty-five isolates of E. coli were examined for ESBL by double disk synergy test, using 20/$10{\mu}g$ ticarcillin/clavulanic acid and $30{\mu}g$ oxyimino-${\beta}$-lactam(ceftazidime, ceftaxime, ceftriaxone and aztreonam) disks. Results: Fifty-two percent of K. pneumoniae and sixteen percent of E. coli isolates revealed double disk synergism. Majority of ESBL-producing strains(fifty-five percent) were isolated from patients in the intensive care unit. Conclusion: ESBL production of K. pneumoniae and E. coli were also common at the Yeungnam University Medical Center and pose a serious problem for antimicrobial therapy.
The emergence and dissemination of extended-spectrum ${\beta}$-lactamse (ESBL) producing Klebsiella pneumoniae isolates make it more difficult to treatment of bacterial infections. In our study, we detected ESBL genes and investigated antimicrobial susceptibility of K. pneumoniae isolates in Chungcheong province. In addition, clonality among the isolates was analyzed by repetitive element sequence (REP)-PCR. Twenty-one of 102 K. pneumoniae isolates produced CTX-M-14 and/or CTX-M-15 and showed high level (over 70%) resistance to third cephalosporins. CTX-M type ESBL producing K. pneumoniae strains isolated in our study showed diverse clonality and some of the isolates have been disseminated in the community. Enhancing infection control will be needed to prevent dissemination of the K. pneumoniae isolates. In addition, for more effective control of resistant bacteria it is considered necessary to monitor the database constructed through convergence of biological investigation and statistical analysis of antimicrobial resistance genes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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