• Mycobiology
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• 제31권4호
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• pp.191-195
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• 2003

Ethanol treatment method was attempted for the selective isolation of ethanol-tolerant fungi from two sites of rice paddy fields around Seoul area. The vertical and seasonal fluctuation of the fungal population were also investigated. The ethanol-tolerant fungi were Talaromyces stipitatus, T. flavus var. flavus, T. helicus var. major, Eupenicillium javanicum, Emericellopsis terricolor, Pseudourotium zonatum, Aspergillus flavus, Cladosporium cladosporioides, Penicillium frequentans, P. janthinellum, and P. verruculosum. The most dominant species isolated by this method was T. stipitatus. It was found that the numbers of fungal species and colony forming units(CFUs) of ethanol-tolerant fungi were higher in Ascomycota than in Deuteromycota. A particular tendency appeared the highest CFUs in autumn, but lower in spring and winter. T. stipitatus was the dominant species of ethanol tolerant microfungi. This result would suggest that membrane lipid composition of ethanol-tolerant fungi isolated from the soils may play on important role in the ethanol tolerance.

• 미생물학회지
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• 제29권2호
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• pp.136-142
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• 1991

The selection of ethanol-tolerant strains was applied to enrichment culture of YPD broth medium containing various concentrations of ethanol. Isolates were identified to be Saccharomyces cerevisiae, the others as S. dairensis, S. exiguus, S. telluris, Saccharomycodes ludwigii, Schwanniomyces occidentalis var. occidentalis and Zygosaccharomyces florentinus. Among isolates S. cerevisiae YO-1 was screened as having the highest ethanol tolerance and produced 18% (v/v) ethanol after 4 days fermentation. The change of fatty-acyl residues represents that a progressive decrease in fatty-acyl unsaturation and a proportional increase in saturation in phospholipids of yeast cells during fermentation affected the yeast viability. Supplementation ethanol to the cultures led to an increase of unsaturated fatty-acyl residues, especially $C_{16}$ or $C_{18}$ residues, along with a decrease in the proportion of saturated residues in cellular phospholipids. Increasing the amount of soy flour led to an increase in the maximum number of viable yeast cells and ethanol production. It was possible in 4 days to reach 21% (v/v) ethanol by adding 4% soy flour as source of unsaturated fatty-acyl residues to the fermentation medium. Soy flour not only increased yeast population but also enhanced the physiological properties of yeast cells to be ethanol tolerant in the anaerobic culture.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제2권3호
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• pp.226-229
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• 1992

An ethanol tolerant mutant was selected by successive transfers of Clostridium thermohydrosulfuricum ATCC 33223 into the media with progressively higher ethanol concentrations. The growth kinetics of the mutant were characterized under various growth conditions. Physiological differences such as enhanced growth, tolerance to various solvents, alteration of the optimum temperature and the ratio of end products during fermentation were noticed in the mutant.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제30권3호
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• pp.216-222
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• 2002

고농도의 ethanol을 갖는 청주를 생산하기 위하여 일본양조협회 Saccharomyces cerevisiae 10호 균주로부터 ethanol 내성 균주 Saccharemyces cerevisiae SE211균주를 분리하였다. 분리 균주는 10%(v/v) ethanol이 포함되어 있는 배지에서의 성장속도가 빨랐으며, 높은 ethanol 농도에서도 성장이 가능하였다 또한 ethanol내성, 내삼투압성, 내열성 등이 원균주에 비해 우수하였다. 선발균주의 세포막 성분을 분석한 결과 sterol, phospholipid의 함량은 원균주와 차이가 없었으나, 지방산의 조성비는 차이를 보였다 또한 분리균주는 외부자극에 대한 저항성을 나타내는 물질로 알려진 세포내 trehalose의 함량이 원균주에 비해 증가하였다 따라서 선발균주의 ethanol내성 및 ethanol배지에서의 높은 성장속도는 세포막의 fatty acid및 세포내 trehalose함량을 변화시키는 능력이 높은 것에 기인한다고 생각되었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제22권6호
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• pp.584-592
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• 1994

Several mutation procedures have been compared to obtain an ethanol-tolerant Saccha- romyces diastaticus strain secreting glucoamylase. These procedures include spontaneous mutation, EMS treatment, UV irradiation, and combination of EMS treatment and UV irradiation. All these methods were followed by adaptation of the yeast cells to gradually higher ethanol concentration. Among these procedures, the combined method of EMS treatment and UV irradiation gave the promising result, i.e. the ethanol tolerance of the yeast increased from 11.5%(v/v) to 14.0%(v/v). Respiratory deficient petite mutants of industrial and ethanol-tolerant yeast strains have been isola- ted and hybridized with haploid S. diastaticus strains. The resulting hybrids showed increased ethanol tolerance and starch-fermentability.

• 한국잡초학회지
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• 제15권3호
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• pp.214-223
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• 1995

본 실험은 경엽처리 제초제로 널리 사용되고 있는 Bentazon에 의한 옥수수의 생장저해량을 측정하여 옥수수 품종간의 내성 차이를 구명하고, 선발된 내성 및 감수성 옥수수 품종을 공시하여 효소활성 유기화합물 1,8-naphthalic anhydride, Ethanol, Phenobarbital로 처리한 후 Microsome을 얻은 다음, $^{14}C$-bentazon을 공시하여 TLC(Chloroform : Methanol : Amonium hydroxide = 13 : 7 : 1)와 LSC를 이용하여 Bentazon 불활성 분해효소 Bentazon 6-hydroxylase(B6H)를 측정하여 옥수수 품종간 내성기작를 밝히고자 수행되었다. 1. 생장반응에 의한 품종간 Bentazon의 내성정도는 GA 209, IK 2, DB 544, 수원 19호에서 강하게 나타났으며, KSS 3, KSS 4, KS 5, 만옥 2호에서는 감수성을 나타냈는데, 특히 3엽보다 4엽에서 더욱 뚜렷하였다. 2. 내성 품종인 수원 19호와 GA 209는 Bentazon 6-hydroxylase 활성이 감수성 품종인 단옥 2호와 KS 5에 비해 비교적 높은 경향을 보였다. 3. 내성 품종인 수원 19호와 GA 209 에서는 1,8-NA 0.5% 이상, Ethanol 2.5% 이상에서 B6H 활성이 높은 경향을 보인 반면, 감수성 품종인 단옥 2호와 KS 5에서는 1,8-NA 0.25% 이상, Ethanol 1.0, 2.5% 이상에서 B6H 활성이 낮은 경향을 보였다. 그리고, Phenobarbital은 2mM 에서 B6H 활성이 가장 높았으며, 내성 품종은 전반적으로 감수성 품종보다 약 2배정도 높은 활성을 나타냈다. 4. 내성 품종인 수원 19호와 GA 209에서는 1,8-NA, Ethanol, Phenobarbital 처리에서 모두 B6H효소 활성이 감수성 품종인 단옥 2호와 KS 5보다 높은 경향이므로 B6H효소에 의한 Bentazon의 히드록시 반응 불활성 대사가 빨리 일어나기 때문에 Bentazon에 내성을 나타낸 것으로 사료된다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제22권2호
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• pp.184-189
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• 2012

We sought to breed an industrially useful yeast strain, specifically an ethanol-tolerant yeast strain that would be optimal for ethanol production, using a novel breeding method, called genome reconstruction, based on chromosome splitting technology. To induce genome reconstruction, Saccharomyces cerevisiae strain SH6310, which contains 31 chromosomes including 12 artificial mini-chromosomes, was continuously cultivated in YPD medium containing 6% to 10% ethanol for 33 days. The 12 mini-chromosomes can be randomly or specifically lost because they do not contain any genes that are essential under high-level ethanol conditions. The strains selected by inducing genome reconstruction grew about ten times more than SH6310 in 8% ethanol. To determine the effect of mini-chromosome loss on the ethanol tolerance phenotype, PCR and Southern hybridization were performed to detect the remaining mini-chromosomes. These analyses revealed the loss of mini-chromosomes no. 11 and no. 12. Mini-chromosome no. 11 contains ten genes (YKL225W, PAU16, YKL223W, YKL222C, MCH2, FRE2, COS9, SRY1, JEN1, URA1) and no. 12 contains fifteen genes (YHL050C, YKL050W-A, YHL049C, YHL048C-A, COS8, YHLComega1, ARN2, YHL046W-A, PAU13, YHL045W, YHL044W, ECM34, YHL042W, YHL041W, ARN1). We assumed that the loss of these genes resulted in the ethanol-tolerant phenotype and expect that this genome reconstruction method will be a feasible new alternative for strain improvement.

• Applied Biological Chemistry
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• 제34권1호
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• pp.67-74
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• 1991

내당 내알콜성 균주인 S. cervisiae D1을 이용하여 알콜 발효를 할 때 ethanol 생산성을 증대시키기 위하여 발효시 $Ca^{2+}$을 첨가하여 발효에 미치는 영향에 관해서 연구한 결과 다음의 결론을 얻었다. 초기 glucose 농도를 400g/l로 하였을 때 $Ca^{2+}$에 의해 ethanol 생산성이 증가하였고 생균수도 증가하였으며 최적 첨가 농도는 0.8 mM이었다. 초기 glucose농도를 달리하고 발효하였을 때는 $Ca^{2+}$의 영향이 초기 glucose 농도가 높을수록 켰다. Ethanol 첨가에 의해 비증식 속도가 감소하였지만 $Ca^{2+}$을 0.8 mM 첨가시 비증식 속도의 저해가 감소되었다. 또한 ethanol을 첨가하지 많았을 때는 $Ca^{2+}$을 첨가한 경우와 첨가하지 않은 경우의 비증식 속도가 같았다. Ethanol 첨가 농도에 의해 사멸 속도가 증가하였으나 $Ca^{2+}$을 0.8 mM 첨가시 비사멸 속도가 감소하였다. Acidification curve에서도 ethanol 첨가시 final pH가 증가하였으나 $Ca^{2+}$을 0.8 mM 첨가하면 final pH가 감소하였다. 따라서 $Ca^{2+}$ 첨가시 ethanol에 대한 내성이 더 증가된다는 것을 알 수 있었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제23권6호
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• pp.723-729
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• 1995

A flocculating sugar tolerant yeast strain was isolated from fermenting Takju. This strain was identified as Saccharomyces cerevisiae CA-1 according to the Lodder's yeast taxonomic studies. The isolated yeast could grow in 50% glucose and in 7% ethanol in the YPD medium. It's optimal growth temperature, initial pH, shaking rate and initial glucose concentration for ethanol fermentation showed 35$\circ$C, 4.5, 150 rpm, 15%, respectively. Ethanol concentration was 63 g/l in 20% glucose after 24 hours, fermentation yield was 0.49 g-ethanol/g-glucose in 10% glucose after 24 hours and ethanol productivity was 3.09 g/l$\cdot $h in 10% glucose after 12 hours in batch fermentation. Repeated batch fermentation was possible for over 50 days and ethanol yield, ethanol productivity and substrate conversion rate were 0.39-0.50 g/g, 1.63-2.08 g/l$\cdot $h and more than 99%, respectively during these periods.

• Applied Biological Chemistry
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• 제34권1호
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• pp.61-66
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• 1991

내당 내알콜성 균주인 S. cerevisiae D1을 이용하여 알콜 발효를 할 때 ethanol 생산성을 증대시키기 위하여 발효시 soybean meal을 첨가하여 발효에 미치는 영향에 관해서 연구한 결과 다음의 결론을 얻었다. 알콜 발효시 soybean meal의 영향을 보면 초기 glucose 농도를 350g/1로 하였을 때 soybean meal첨가에 의해 ethanol 생산량이 증가하고 생균수도 증가하였으며 soybean meal 첨가 농도가 2%일 때보다 4%일 때 더 큰 중가를 보였다. Soybean meal을 water-soluble fraction과 lipidic fraction으로 분획 하여 첨가하였을 때는 water-soluble fraction은 whole-soybean meal과 거의 같은 ethanol 생산량의 증가를 보였지만 lipidic fraction은 거의 영향을 미치지 않았다. 초기 glucose 농도를 달레하고 발효하였을 때는 soybean meal을 4 % 첨가시 초기 glucose농도와 상관없이 ethanol 생산 속도가 증가하였다. Ethanol 첨가에 의해 glucose소비 속도가 감소하였고 soybean meal을 4% 첨가시 glucose소비 속도가 증가하였지만 ethanol을 첨가한 경우의 소비 속도를 첨가하지 않은 경우의 소비 속도에 대한 비율로 나타내면 soybean meal 첨가와 상관없이 같은 값을 나타내었다. 따라서 soybean meal 첨가시 ethanol 생산량이 증가하는 이유는 내알콜성 증가보다는 결집된 영양소를 보충해주기 때문이라고 추측된다.