Shit-tzu견에서 발정 주기, 교배 적기 및 배란 시기를 정확하게 추정하기 위한 질 세포 검사를 확립하기 위하여 Shih-tzu 견 12두를 대상으로 발정 주기동안 질 세포 검사 및 estradiol-$17{\beta}$와 progesterone 농도를 측정하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 발정주기별 질 세포상의 특징적인 변화로서 발정 전기에는 무핵 세포와 적혈구, 발정기에는 표층 세포와 무핵 세포 및 적혈구가 주종을 이루는 세포였으며 발정 휴지기에는 소형 중간 세포와 대형 중간 세포, 무발정기에는 부기저 세포와 소형 중간 세포 및 백혈구가 주종을 이루는 세포이었다. 또한 CI는 발정 전기와 발정기에 높게 나타났으나, 발정 휴지기와 무발정기에는 감소하여 각 기간별 비교에서 발정 전기와 발정기에 유의성 있게 높았다. 발정주기 중 첫 수컷 허용일(Day 0)을 기준으로 하였을 때 CI는 발정 전기 개시일 전후인 Day -9에 $72.4{\pm}2.9%$, Day -4에 $84.0{\pm}3.9%$로 80% 이상으로 증가하였으며 Day 0에 $97.0{\pm}1.1%$로 증가하여 Day 2에는 $98.2{\pm}0.5%$로 최고치를 나타내었으며 CI가 80% 이상을 나타낸 기간은 Day -4에서 Day 6까지(11일간)이었고, 90% 이상을 나타낸 기간은 Day -1에서 Day 5까지(7일간)이었다. 또한 임신 Shih-tzu 견 12두에서 혈장 progesterone 농도가 최초로 4.0 ng/ml 이상으로 증가한 날을 기준(Day 0)으로 발정 주기 중 혈장 progesterone과 estradiol-$17{\beta}$ 및 CI의 관계를 살펴보면 estradiol-$17{\beta}$가 Day -2에 최고치를 나타내었고, CI가 Day -1에 최고치를 나타낸 후 Day 0에 혈장 progesterone 농도가 $5.2{\pm}0.3ng/ml$로 최초로 4.0 ng/ml 이상으로 증가하였다. CI가 최초로 80 % 이상으로 증가하여 지속한 날은 estradiol-$17{\beta}$ peak 5일전인 Day -7이었고, Day -7부터 Day 3까지 11일 동안 80% 이상으로 지속되었다. CI가 최초로 90% 이상으로 증가한 날은 estradiol-$17{\beta}$ peak 2일전인 Day -4이었으며, Day -4부터 Day 2까지 7일 동안 90% 이상으로 지속되었다. 이상의 결과를 종합하여 보면 Shih-tzu 견에서 첫 수컷 허용일(Day 0)을 기준으로 하였을 때 CI 최고치는 Day 2에 나타났으며 이 때가 최상의 교배 적기로 사료되며, 혈장 progesterone농도가 4.0 ng/ml 이상으로 증가한 날(Bay 0)을 기준으로 하였을 때부터 CI는 혈장 estradiol-$17{\beta}$ peak 후 1일째인 최고치를 나타내었고, CI peak 후 1일째인 Day 0에 혈장 progesterone 농도가 최초로 4.0 ng/ml 이상으로 증가하여 CI가 90% 이상으로 지속된 시기가 최상의 교배 적기임이 확인되었다. 따라서 혈장 progesterone농도 측정으로 정확한 배란 시기 및 교배 적기를 판정할 수 있으나, 시설비가 저렴하고 검사 방법이 간단한 질 세포 검사가 Shih-tzu 견에서 발정 주기, 교배 적기 및 배란 시기의 판정에 응용될 수 있음을 시사하는 결과라고 사료된다.
범가자미의 인위적인 번식제어를 목적으로 생식소 활성에 따른 혈중 vitellogenin (난황단백전구체)과 성 스테로이드 호르몬의 계절적 농도 변화를 조사하였다. 암컷에 있어서 혈중 vitellogenin의 농도는 난황축적이 활발한 11 월에 연중 최고치를 나타내다가 산란이 시작되는 12월에 감소하기 시작하면서 estradiol의 농도는 이 시기에 연중 최고치를 나타내었다(2.7ng/ml). 산란이 활발히 진행중인 1월에 혈중 estradiol 농도는 급격히 감소하여 5월까지 연중 매우 낮은 농도(0.2ng/ml)로 유지되었다. Testosterone도 estradiol과 유사한 경향을 보였다. 17$\alpha$-hydroxyprogesterone은 난소가 활성화되어 성장되는 시기를 제외하고는 뚜렷한 경향을 보이지 않았다. 수컷의 경우 testosterone과 11-ketotestosterone의 혈중농도는 12월에 최고치를 나타내었으며, 이 시기에 정자변태가 가장 활발하게 이루어지고 있음을 관찰하였다. 이후 완숙 및 방정기 (1월)에 이르러 이들의 농도는 급격히 감소하였다.
Eun- Young Min;Lee, Jung-Hoon;Kim, Dae-Jung;Kang, Ju-Chan
한국양식학회지
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제17권3호
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pp.161-166
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2004
The influence of TBTO (Tributyltin-Oxide) at a series of concentrations (0.52, 1.41 and 3.05 $\mu$g/L) for a period of 3 weeks on estradiol-17$\beta$, testosterone and cortisol levels in male Korean rockfish, Sebastes schlegeli was investigated. Compared to the stable concentration of estradiol-17$\beta$, plasma testosterone level was decreased significantly at the 3rd week after TBTO exposure in plasma of fish (>1.41 $\mu$g/L). The most profound physiological variation in TBTO exposed fish was a dramatic increase in plasma cortisol level at 3rd week. Conclusively, TBTO exposure caused increase level of cortisol as well as alteration of testosterone in the Korean rockfish. These results suggest that TBTO at environmentally relevant (nanomolar) concentrations disrupt endocrine secretions.
The functional expression of potassium $(K^+)$ channels has electrophysiologically been studied in bone cells from several species, however, their identity and regulation of gene expressions in bone cells are not well known. In the present study, to investigate how $K^+$ channel expressions are regulated by estrogen, we measured changes of transcript levels of various $Ca^{2+}$-activated ($K_{Ca}$) and ATP-sensitive $K^+$ channels in rat osteoblastic ROS 17/2.8 cells after treatment with estrogen. Application of 17${\beta}$-estradiol $(E_2)$ for 24 h and 48 h increased mRNA and protein expressions of inwardly rectifying $K^+$ channel (Kir) 6.2 and type 2 small conductance $K_{Ca}$ channel (SK2), respectively. Combined treatment of cells with 17${\beta}-E_2$ and ICI 182,780, a pure antiestrogen, suppressed 17${\beta}-E_2$-induced alterations of SK2 and Kir6.2 mRNA levels. In addition, treatment of cells with U0126, a specific inhibitor of extracellular receptor kinases (ERK)1/2, and SP600125, a specific inhibitor of c-jun N-terminal kinase (JNK) blocked the enhancing effects of 17${\beta}-E_2$ on SK2 and Kir6.2 protein expressions. On the other hand, blocking of p38 mitogen-activated protein kinase had no effect. Taken together, these results indicate that 17${\beta}-E_2$ modulates SK2 and Kir6.2 expressions through the estrogen receptor, involving ERK1/2 and JNK activations.
에스트로젠 수용체와 리포터 유전자인 ${\beta}-galactosidase$가 도입된 효모재조합검색시험법을 이용하여 DEHP와 DBP의 내분비계 장애작용을 검색하였다. 양성대조 시험물질로 $17{\beta}-estradiol$을 설정하여 DEHP와 DBP의 에스트로젠 활성을 비교분석 하였을 때, $17{\beta}-estradiol$의 경우 $10^{-9}M$에서 가장 활성이 높게 관찰되었다. DEHP의 경우 $10^{-10}M$에서 $10^{-7}M$까지 시험하였을 때 농도의존적으로 에스트로젠활성이 증가하였으며, $10^{-7}M$의 경우 가장 강력한 에스트로젠활성을 보였다. DBP의 경우 $10^{-9}M$에서 $10^{-6}M$까지 에스트로젠활성이 관찰되었다. DEHP와 DBP의 경우 최대활성화 대비 50% 이상의 활성도를 보이기 시작하는 농도가 $10^{-9}M$로 나타나서 비슷한 농도에서 에스트로젠 활성화가 이루어지는 것으로 추측할 수 있었다. 그러나, 에스트로젠 최대활성화 시의 농도를 비교해 보면 DBP가 DEHP보다 10배 낮은 농도에서 최대활성치가 관찰되었기 때문에 DBP가 DEHP보다 에스트로젠 작용에 더 민감하게 반응하는 것으로 판단할 수 있었다. 결과적으로 본 실험에 사용되어진 시험물질인 DEHP와 DBP는 효모재조합시험법에 있어서 에스트로젠 활성을 유도하는 것으로 판단되어지며 감수성에 있어서는 DBP가 DEHP보다 높은 것으로 여겨진다.
본 연구는 미경산돈의 첫 발정과 종부시 품종에 따른 체중, 연령, 체장, 체고, 흉위, 등지방 두께, estradiol-l7$\beta$, cortisol 그리고 progesterone 농도에 미치는 영향을 조사하여 앞으로 돼지 번식능력 향상을 위한 기초자료를 제공하고자 실시하였다. 본 연구에 공시된 듀록, 랜드레이스, 요크셔 미경산돈은 충남축산위생 연구소 산하 축산시험장에서 2000년부터 2002년까지 생산한 자돈을 선발하고 육성하여 이용하였다 미경산돈의 첫 발정과 종부시 듀록종이 랜드레이스종이나 요크셔종 보다 체중이 더 무거웠고 연령이 많았으며, 흉위도 컸다. 첫 발정과 종부시 체장은 품종간에 차이가 없었고, 체고는 듀록종과 요크셔종이 랜드레이스종에 비하여 높았다. 첫 발정시 등지방 두께는 요크셔종, 듀록종 그리고 랜드레이스종 순으로 얇았으며, 첫 종부시에는 차이가 없었다. 미경산돈의 첫발정시 혈청 estradiol-l7$\beta$의 농도는 랜드레이스종이 45.0 pg/ml로 요크셔종의 27.4pg/ml 이나 듀록종의 21.8 pg/ml 보다 높았으나 첫 종부시에는 18.5-31.9 pg/ml로 품종간에 차이가 없었다. 혈청 cortisol의 농도는 첫 발정과 종부시 듀록종이 랜드레이스종이나 요크셔종에 비하여 높게 나타나 품종간에 차이를 나타내었다. 혈청 progesterone의 농도는 첫 발정과 종부시 품종간에 차이가 없었다.
본 연구에서는 홍삼, 호로파, 민들레, 백수오, 남가새, 녹각상, 토복령, 호로파, 야관문 등의 8개 한약재의 에스트로겐 유사활성을 파악하고자 하였다. 이를 위하여 한약재의 열수- 및 에탄올-추출물을 제조하였고 in vitro 전사 활성 시험법을 이용하여 에스트로겐 유사활성을 검증하였다. 에탄올추출물에서는 홍삼, 백수오, 호로파, 야관문, 민들레가 에스트로겐 유사활성을 나타냈고, 열수출출물에서는 홍삼, 호로파, 백수오가 에스트로겐 유사활성을 나타냈다. 홍삼추출물은 $500{\mu}g/ml$의 농도에서의 활성은 열수추출물과 에탄올추출물 모두 $10^{-8}M$$17{\beta}$-estradiol의 활성보다 높은 활성을 보였고, 홍삼 에탄올추출물 $50{\mu}g/ml$과 백수오 에탄올추출물 $500{\mu}g/ml$에서의 활성은 $10^{-9}$와 $10^{-8}M$$17{\beta}$-estradiol에서의 활성 사이의 활성을 보였다. 이 연구를 통해 홍삼, 백수오, 호로파, 민들레 등을 이용한 식물성 여성호르몬 유사물질을 함유하는 기능성소재의 개발에도 기여할 수 있을 것이며 천연물 유래 여성호르몬 유사물질의 대량 탐색 등이 가능할 것이다.
The aim in this study was to obtain the basic data for estimation of optimal mating time and ovulation time by finding out the relationship between vaginal cytology and reproductive hormone profiles during the estrous cycle in 36 Korea Jin-do bitches. A characteristic features of vaginal cytology during the estorous cycle were the high proportion of superficial cell, anuclear cell and erythrocyte in proestrus, superficial cell, anuclear cell and erythroucyte in estrus, parabasal cell, small and large intermediate cell and leukocytes in diestrus, and parabasal cell and small intermediate cell in anestrus, respectively. Cornification index(CI) was the high proportion in proestrus and estrus, then it was decreaed in diestrus and anestrus. It indicated that the CI was significantly high proportion in proestrus and estrus in comparison with the other phases. Plasma progesterone concentration was below 1.0ng/ml at the first day of vulval bleeding in pregnant and non-pregnat bitches, and then it was increaed slowly. When Day 0 was timed from the day that plasma progesterone concentration was first increased above 4.0ng/ml, plasma progesterone concentrations at Day 0 in pregnant and non-pregnant above 4.0 ng/ml, plasma progesterone concentrations at Day 0 in pregnant and non-pregnant bitches were $5.2{\pm}0.3ng/ml and 5.7{\pm}0.5ng/ml$$46.5{\pm}3.3 ng/ml$ in pregnant bitches and at Day 20 with $39.8{\pm}0.1ng/ml$ in nonpregnant bitches. It indicated that plasma progesterone concentration was higher in pregnant bitches than in non-pregnant bitches. Hereafter plasma progesterone concentration was decreased steadily. At Day 63 which is parturition day, plasma progesterone concentration was decreased below 1.0ng/ml with $0.8{\pm}0.2ng/ml$ in pregnant bitches whereas in the non-pregnant bitches at Day 75 were decreased below 1.0ng/ml with 40.5{\pm}0.4ng/ml$. Plasma progesterone concentrations was maintained below 1.0ng/ml during anestrus in all of them. The plasma estradiol-17 $\beta$ concentration was increased above 1.0 pg/ml at the first day of vulval bleeding and it showed a peak Day-1 with 38.2 pg/ml. Thereafter it was sharply decreased after Day 0, which was the day that plasma progesterone concentration was first increase above 4.0ng/ml, and was maintained below basal levels. In relationship between CI and reproductive hormones, plasma estradiol-17 $\beta$concentration showed a peak at Day-3 and CI showed a peak at Day-1 which was the second day after plasma estradiol-17 $\beta$ peak, and plasma progesterone concentration was first increased above 4.0ng/ml at Day 0 which was the first day after CI peak. CI was first increased above 80% at Day-6 which was the third day before plasma estradio-17 $\beta$ peak and it was maintained above 80% between Days-6 and Day 3 during 10 days, and showed above 90% at Day-3 which was the day that plasma estradiol-17 $\beta$peak and was maintained above 90% between Day-3 and Day 3 during 7 days. In conclusion, ovulation in Koran Jin-do bitches occurred at the first day after CI peak, at the third day after plasma estradiol-17 $\beta$peak and the day when plasma progesterone concentration was first increased above 4.0 ng/ml. And it was estimated that the optimal mating time was the day when the CI was maintained above 90% and plasma progesterone concentration was between 3.0~8.0ng/ml. Therefore plasma progesterone concentration measurement was used for determination of an accurate ovulation time and the optimal mating time but also vaginal cytology, which is low-priced with equipment and is the simple examination method, was reliable method for estimating estrous cycle, optimal breeding time and ovulation time in Korea Jin-do bitches.
Kim, Mijie;Park, Yong Joo;Ahn, Huiyeon;Moon, Byeonghak;Chung, Kyu Hyuck;Oh, Seung Min
Environmental Analysis Health and Toxicology
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제31권
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pp.10.1-10.8
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2016
Objectives Aromatase inhibitors that block estrogen synthesis are a proven first-line hormonal therapy for postmenopausal breast cancer. Although it is known that standardized extract of Ginkgo biloba (EGb761) induces anti-carcinogenic effects like the aromatase inhibitors, the effects of EGb761 on steroidogenesis have not been studied yet. Therefore, the effects of EGb761 on steroidogenesis and aromatase activity was studied using a H295R cell model, which was a good in vitro model to predict effects on human adrenal steroidogenesis. Methods Cortisol, aldosterone, testosterone, and $17{\beta}$-estradiol were evaluated in the H295R cells by competitive enzyme-linked immunospecific assay after exposure to EGb761. Real-time polymerase chain reaction were performed to evaluate effects on critical genes in steroid hormone production, specifically cytochrome P450 (CYP11/ 17/19/21) and the hydroxysteroid dehydrogenases ($3{\beta}$-HSD2 and $17{\beta}$-HSD1/4). Finally, aromatase activities were measured with a tritiated water-release assay and by western blotting analysis. Results H295R cells exposed to EGb761 (10 and $100{\mu}g/mL$) showed a significant decrease in $17{\beta}$-estradiol and testosterone, but no change in aldosterone or cortisol. Genes (CYP19 and $17{\beta}$-HSD1) related to the estrogen steroidogenesis were significantly decreased by EGb761. EGb761 treatment of H295R cells resulted in a significant decrease of aromatase activity as measured by the direct and indirect assays. The coding sequence/Exon PII of CYP19 gene transcript and protein level of CYP19 were significantly decreased by EGb761. Conclusions These results suggest that EGb761 could regulate steroidogenesis-related genes such as CYP19 and $17{\beta}$-HSD1, and lead to a decrease in $17{\beta}$-estradiol and testosterone. The present study provides good information on potential therapeutic effects of EGb761 on estrogen dependent breast cancer.
It has been known that adrenal corticosteroids influence the expression of adrenomedullary catecholamine-synthetizing enzymes and also suppress the emission of axonal-like processes in cultured chromaffin cells. In the present study, it was attempted ta investigate the effect of 17${\alpha}$-estradiol on catecholamine(CA) secretion evoked by acetylcholine(ACh), DMPP, McN-A-343, excess K$\^$+/ and Bay-K-8644 from the isolated perfused rat adrenal gland. The perfusion of 17${\alpha}$-estradiol (10$\^$-6/ 10$\^$-4/M) me an adrenal vein for 20min produced relatively dose-dependent inhibition in CA secretion evoked by ACh (5.5 ${\times}$ 10$\^$-3/M), DMPP (10$\^$-4/M for 2min), McN-A-343 (10$\^$-4/M for 4min) and Bay-K-8644 (10$\^$-5/M for 4min), while did not affect the CA secretory effect of high K$\^$+/(5.6 x 10$\^$-2/M). Also, in the presence of 17${\beta}$-estradiol, CA secretion of ACh, DMPP and McN-A-343 without any effect on excess K$\^$+/-evoked CA secretion. However, in adrenal glands preloaded with 17${\alpha}$-estradiol (10$\^$-5/M) plus tamoxifen (10$\^$-5/M), which is known to be a selective antagonist of estrogen receptors (for 20min), CA secretory responses evoked by ACh, DMPP and McN-A-343 were considerably recovered as compared to that of 17${\alpha}$-estradiol only, but excess K$\^$+/-induced CA secretion was not affected.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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