The sex steroid hormone estradiol-$17{\beta}(E_2)$ mediate their biological effects on development, differentiation and maintenance of reproductive tract and other target tissue through gene regulation by nuclear steroid receptors. Although the importance of $E_2$ in many physiological process has been reported, but little is known about the effects of $E_2$ on primary cultured chicken hepatocyte. therefore, in the present study, we have examined the effect of $E_2$ on cell proliferation and it's related signal cascades. $E_2$ increase $[^3H]$-thymidine incorporation in time-(${\leq}8hr$) and dose-($10^{-10}M$)dependent manner and treatment of $E_2$ increased the phosphorylation of p44/43 MAPKs(p44/42 mitogen-activated protein kinase) and JNK(c-Jun N-terminal kinase) in a time dependent manner. In addition, PD98059(p44/42 blocker, $10^{-5}M$), SP600125(JNK blocker, $10^{-6}M$) blocked the estrogen-induced increase in $[^3H]$-thymidine incorporation. In conclusion, $E_2$ stimulates the proliferation of primary cultured chicken hepatocytes and this action is mediated by p44/42 MAPKs and JNK signal transduction pathway.
본 연구의 목적은 외인성 Estradiol(E)에 의해 발현되는 LH surge가 다른 농도의 Progesterone (P)에 억제되고, 그 기전이 E의 존재에 의해 더욱 강화된다는 것을 증명하는 것이다. 선행된 연구에서 E의 존재하에 LH surge는 P의 농도에 의해 LH surge 발현 시간은 점진적/유의성 있게 억제된다는 것을 확인했다. 이런 결과를 토대로 난소가 제거된 Shiba 염소를 이용하여 인위적으로 난포기(Non-P), 아황체기(Low-P), 기능성황체기(High-P)의 P 농도 및 Estradiol (E) 농도를 유도하였다 (Day 0: P와 E 이식일). 스테로이드 호르몬의 농도를 알아보기 위해 매일 혈액을 채혈하였으며, Day 7에 각 그룹의 P 농도를 유지하기 위한 packet과 E 처치용 capsule를 동시에 제거하였다. 또한 Day 7에 P와 E의 농도변화를 세밀하게 조사하기 위해 12시간 동안 1시간 간격으로 채혈 후 검사하였다. LH surge 분비패턴은 P packet 제거 후 13시간부터 E를 3-6 ${\mu}g/h$ 농도로 36시간 동안 주입하고, 52시간 동안(E 주입 4시간 전부터 주입 후 48시간) 2시간 간격으로 채혈을 실시했다. 그 결과, 모든 3그룹의 염소는 LH surge가 발현되었지만 그 발현시간은 Low-P와 High-P 그룹에서 유의성 없는 발현시간 차를 나타내었다. 즉, 각각의 선행된 P 농도 (Non-P, Low-P, High-p) 그룹은 외인성 Estradiol에 의한 LH surge 발현을 조절하는데 있어서 E의 존재가 중요하며, E는 GnRH/LH surge-generating 시스템에 작용하는 P의 억제적 효과를 더욱 강화시키는 것으로 생각되었다.
Lee, Sung-Eun;Park, Byeoung-Soo;Kim, Hye Jin;Lee, Eun-Woo;Yum, Jong Hwa
대한의생명과학회지
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제19권2호
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pp.147-152
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2013
17-${\beta}$-hydroxysteroid dehydrogenase type 1 ($17{\beta}$-HSD type 1) mediates the reaction of $17{\beta}$-estradiol (E2) production from estrone (E1). Inhibitory effects of curcuminoids on $17{\beta}$-HSD type 1 activity were investigated to find a lead compound for treating estrogen-dependent diseases including breast cancer. Among curcuminoids, demethoxycurcumin showed potent inhibitory effect ($IC_{50}=2.7{\mu}M$) on mouse $17{\beta}$-HSD type 1. Curcuminoids also displayed their inhibitory effects on the production of $17{\alpha}$-estradiol which is a carcinogenic metabolite produced by the enzyme. Bisdemethoxycurcumin ($IC_{50}=1.3{\mu}M$) showed potent inhibitory effect on the $17{\alpha}$-estradiol production by chicken $17{\beta}$-HSD type 1. Curcuminoids did not inhibit ERE transcriptional activity with and without E2. Taken together, curcuminoids can be used for treating and preventing E2-dependent diseases via inhibition on $17{\beta}$-HSD type 1 activity.
A competitive type immunoassay method for 17$\beta$-estradiol(E2) based on the idiotypic anti-idiotypic antibody and time-resolved fluorescence is described. The anti-idiotypic antibody(Ab2) produced to E2 binding site of the primary idiotype antibody (Ab1) was labelled with europium and was allowed to compete with E2 standards or serum sample for the binding sites of Ab1 which was bound to 2nd antibody captured ontothe surface of microtitre plates. Fluorescence measured by time-resolved fluorometer was inversely proportional to the concentration of E2 over the range 5~500pg/well. The sensitivity of the assay was 5pg per well which was compatible with that ofradioimmunoassay using the same Ab1 and 3H-E2 as a tracer. One great advantage of this method described here was to enable antibodies to be labelled instead of haptens, and thus makes it easier to develop sensitive and robust immunoassay systems specially for haptens.
본 연구는 rotifer Brachionus rotundiformis의 유성생식을 유도하기 위해 효과적인 매개물질로 몇 가지 성 steroid hormone (serotonin, progesterone 및 ${\beta}$-estradiol)을 선정하여 농도별(Low, 30 mg/L 및 High, 300 mg/L)로 내구란 생산효과를 6일 동안 배양하면서 조사하였다. 배양 3일째 ${\beta}$-estradiol ($E_2$) 처리구가 다른 실험구에 비해 유성생식률이 20.6%로 가장 높게 나타났다. 배양 6일째 내구란 생산수(106 개)도 동일한 결과를 보였으며 다음으로는 serotonin이 높게 나타났다. 더하여, 위 스테로이드 호르몬이 몇 가지 유성생식관련 유전자의 발현에 미치는 영향에 대해 조사한 결과, NrbP, SRY, Cyclin 및 MrpmB 유전자가 처리한 모든 hormone에 대해 up-regulation되는 경향을 보였다. 결과를 종합해보면, B. rotundiformis의 내구란 생산에 가장 효과적인 steroid hormone은 ${\beta}$-estradiol인 것으로 판단되며 유성생식 관련 유전자로 NrbP, SRY, MrpmrB 및 Cyclin을 제안할 수 있다. 차후 효과적인 내구란 생산을 위한 $E_2$의 최적 처리농도규명에 관한 추가 연구가 필요할 것으로 판단된다.
A common used endpoint in bioassays testing the estrogenicity of chemicals including endocrine disruptors is the induction of egg yolk Precursor vitellogenin in male fish. Two marine fishes (Sebastes schlegeli and Paralichthys olivaceus) were exposed to the 17$\beta$-estradiol(E2) to determine the vitellogenin production. Vitellogenin was measured in fish blood using SDS-PAGE and Densimetry. Results showed that exposure to E2 caused vitellogenin in male fish. Especially, vitellogenin levels in young fish were about 4 times higher than in adult fish, which means young fish are more sensitive to E2 exposure. And plasma vitellogenin in fish increased related to E2 concentration and exposure duration.
The experiment was conducted to study the effect of GnRH administration at induced estrus on pituitary and ovarian response in buffalo heifers. Eight Murrah river buffaloes of 12 to 13 months of age were treated with $PGF_{{2}{\alpha}}$ and eCG combination. GnRH (Fertagyl) 200 ug was injected (iv) at estrus in four heifers (treated group) while saline (2 ml, iv) was injected in remaining four heifers (control group). Blood was collected through jugular catheter to estimate plasma FSH, LH and estradiol level. The pretreatment plasma FSH, LH and estradiol values ranged from $8.46{\pm}1.97ng/ml$ to $12.31{\pm}1.30ng/ml$, $0.87{\pm}0.21ng/ml$ to $1.19{\pm}0.29ng/ml$ and $19.09{\pm}2.38pg/ml$ to $20.24{\pm}1.00pg/ml$ respectively. The plasma estradiol concentration elevated significantly (p<0.05) within 24 hr after eCG administration and reached its peak levels of $154.09{\pm}17.28pg/ml$ and $181.95{\pm}31.82pg/ml$ at estrus in respectively treatment and control groups. The plasma FSH and LH concentrations did not increase during follicular development after eCG administration while initial significant (p<0.05) increases in both plasma FSH and LH concentrations occured within 5 and 10 min, reaching peak levels of respectively $110.06{\pm}23.56ng/ml$ and $13.15{\pm}3.13ng/ml$ within 90 min after GnRH injection was detected. A sharp and significant decline in plasma estradiol concentration ($59.27{\pm}8.78pg/ml$) associated with synchronized ovulation within 24 hours after GnRH injection was recorded. The observation suggest that the hypophysis of prepubertal buffaloes treated with eCG have gonadotrophins awaiting the releasing factor to evoke release of gonadotrophin during the follicular phase to induce synchronized ovulation.
산란유도용 암컷 친어 뱀장어를 확보하기 위한 목적으로 estradiol-$17{\beta}$ (E2)의 적정 투여 시기 및 농도를 조사하였다. 실뱀장어 단계(평균 체중 0.16 g, 평균 전장 6.2 cm)에 있어서 E2함유 배합사료를 5개월간 경구투여에 따른 자성화 유도율을 조사한 결과 대조구(10%)에 비해 E2를 경구투여한 실험구인 저농도 E2 투여구(10 mg/kg diet)에서는 70%, 고농도 E2 투여구(25 mg/kg diet)에서는 90%로 높게 나타났다. 또한 어린 뱀장어 단계(치만 단계; 평균 체중 2.6 g, 평균 전장 13.2 cm)에 있어서도 E2함유 배합사료를 4 개월간 경구투여에 따른 자성화 유도율은 대조구(20%)에 비해 E2 투여 실험구(25 mg/kg diet)에서는 60%로 높게 나타났다. 한편 E2 농도에 따른 자성화 유도율의 두드러진 차이는 없었지만, E2 경구투여 시기에 따른 자성화 유도율은 치만단계 보다 실뱀장어 단계에서 높게 나타났다. 그러나 대조구와 E2 경구투여구에 있어서 성장률의 유의적인 차이는 없었다. 따라서 본 연구에 의해 극동산 뱀장어 치어기에 E2 경구투여로 성제어가 가능하였으며, 자성화 유도율은 E2 농도 보다 투여 시기에 의존하는 것으로 추측되었다.
$estradiol-17\beta$${E_2}$에 노출된 미성숙 조피볼락의 혈장 내 vitellogenin (VTG), alkaline-labile protein phosphorus (ALPP), calcium (Ca), glutamate pyruvate transaminase (GPT) 및 hepatosomatic index (HSI)의 일시적인 변화가 조사되었다. 70% 에탄올에 녹여진 ${E_2}$ (5 mg/kg B.W.)를 조피볼락 치어의 복강에 주사한 후 0, 1, 3, 6, 9, 12 및 15일에 혈장이 수집되었다. 전기 영동상에서 주사 후, 3일째 약 170 kDa의 위치에 염색성을 나타내는 VTG 밴드가 검출되었다. 밴드의 염색성은 6일째 더욱 강하게 나타났지만, 시간의 경과와 더불어 흐려져 15일째에는 노출 전 처럼 VTG 밴드가 관찰되지 않았다. 혈장 내 ALPP와 Ca는 1일째부터 급격히 증가했으며 VTG 변동과 유사하게 6일째 가장 높은 농도를 나타낸 후, 시간의 경과와 더불어 점점 감소해 15일째는 노출 전과 유사한 값을 나타내었다. GPT는 투여 1일부터 급격히 증가해 3일에 최고치를 나타낸 이후 시간의 경과와 더불어 감소하는 경향을 나타냈으며 HSI의 경우도 1일째부터 증가해 3일째에 가장 높은 수치를 나타낸 후, 점점 감소해 ${E_2}$ 투여전과 유사한 수치를 나타내었다. 이들 결과로 E2에 노출 된 이후 조피볼락의 혈장 내 ALPP, Ca, GPT 및 HSI는 혈장 VTG와 유사한 증․감을 나타내는 것을 알 수 있었다. 따라서, ALPP, Ca, GPT 및 HSI는 VTG와 더불어 연안 생태계 내에서 외인성 ${E_2}$ 노출에 대한 생물학적 지표로서 사용 가능할 것으로 판단되어진다.
This work was conducted to investigate the effect of bisphenol A (BPA) on estradiol (E2) 2-and 4-hydroxylase activities in the liver, kidney and lung tissues of male and female rats. After intraperitoneal administration of BPA to male and female rats for 4 days at 0, 10, and 50 mg/kg, the conversion of the substrate for hepatic and extra-hepatic enzyme activities was measured by GC/MSD. The result showed decreases of body and organ weights at 50 mg/kg BPA of male and female rats. Male hepatic E2 2-hydroxylase activity was inhibited by 68% at 10 mg/kg and by 82% at 50 mg/kg BPA. Female hepatic E2 2-hydroxylase activity was decreased by 46% at 10 mg/kg and by 56% at 50 mg/kg to the control. E2 4-hydroxylase was inhibited by 57 and 57% at 10 mg/kg and 54 and 78% at 50 mg/kg in liver of female and male, respectively. The urinary excretion rate of 2-hydroxyestradiol (2-OHE), androsterone and testosterone in urine of female rats with 50 mg/kg BPA were decreased significantly. The results showed that 50 mg/kg BPA was decreased E2 2-and 4-hydroxylase activities in liver, but not in other tissues. The urinary excretion rates of 2-OHE, androsterone and testosterone were also decreased. In liver, estrogenic enzyme activity were higher in male than female. These results suggest that BPA can disrupt estrogen metabolism by suppressing E2 2-and 4-hydroxylase activities in the liver of male and female rats.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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