From the rachis of Cedrela sinensis A. Juss., methyl gallate, quercitrin, bis-(p-hydroxyphenyl)ether, adenosine, isoquercitrin, rutin, (+)-catechin and (-)-epicatechin were isolated and characterized by spectral data.
전통발효 식품으로부터 젖산균을 분리하고, ${\beta}$-glucosidase, ${\beta}$-glucuronidase, ${\beta}$-xylosidase, ${\beta}$-galactosidase, ${\beta}$-arabinofuranosidase, ${\beta}$-arabinosidase, ${\beta}$-arabinopyranosidase 등 생물전환과 관련된 유용 효소활성을 조사하였다. 효소활성 평가를 통하여 선발된 9점의 젖산균 발효에 의한 epigallocatechin-3-gallate(EGCG), epigallocatechin(EGC), epicatechin gallate(ECG), 및 epicatechin(EC)의 함량 변화를 조사하였다. 배추 김치에서 분리된 Leuconostoc mesenteroides MBE1424로 명명된 균주는 발효에 의하여 카테킨 중 EGC의 함량을 약 60% 증가시켰으며, 배양온도 $40^{\circ}C$에서 가장 우수한 비성장속도를 나타내어 기존에 보고된 균주보다 상대적으로 내열성이 우수한 것으로 판단되었다. Leuconostoc mesenteroides 균주는 녹차 추출물의 생물전환에 필요한 유용한 효소계를 보유하고 있는 것으로 추정되었다.
녹차를 천일염과 혼합하여 발효시킨 후 항균활성을 가지고 있고 셀룰라제가 없는 균종을 첨가하여 발효시킨 실험에서 녹차만을 발효시켰을 경우보다 천일염을 첨가하여 발효시킨 모든 시료에서 카테킨류인 EGC, EC, EGCG, ECG의 추출량이 증가하였고, 발효 일에 따른 분석에서는 EGC(epigallocatechin), ECG(epicatechin gallate), EC(epicatechin), EGCG(epigallocatechin gallate)모두에서 2일째와 3일째 높은 추출량이 검출되었다. 또한 발효균을 첨가하여 발효시켰을 경우 Paenibacillus spp에서는 모든 카테킨류(EGC, EC, EGCG, ECG)의 추출량이 증가하였고, Bacillus amyloliquefaciens에서는 EGC와 EC는 감소하고 EGCG와 ECG는 증가하였으며, Bacillus pumilus, Bacillus subtilis는 모든 카테킨류(EGC, EC, EGCG, ECG)에서 감소하였다. 위와 같은 실험의 결과에서 녹차에 천일염과 Paenibacillus spp를 함께 3일 동안 발효시킨 결과에서 가장 많은 카테킨류가 추출되었다.
약용 식물로부터 여러 효소의 저해제를 탐색 하였다. 한국산 우롱차엽으로부터 80%의 아세톤 추출물을 Sephadex LH-20, MCI-gel, Fuji gel 등을 사용하여 분리하였고 이 화합물은 Anisaldehyde 및 $FeCl_3$에 붉은색과 청색을 나타내었다. 이 화합물의 유도체화에 의한 기기분석 결과에서 상부는 -(-)epicatechin로 하부는 -(-)epigallocatechin 3-O-gallate 결합된 dimeric proanthocyanidin 종류인, $epicatechin-(4{\beta}{\rightarrow}8)-epigallocatechin{\;}3-O-gallate$로 화학 구조가 결정되었다. Xanthin oxidase 저해 효과에서는 $50{\;}{\mu}mole$에서 62%의 저해를 보여주어 앞으로 통풍 예방 기능성 식품 신소재로서의 이용이 가능하다는 것을 확인하였다.
본 연구는 녹차를 열수로 추출하여 LDL에 대한 항산화 활성을 연구한 결과이다. 녹차 1.25 g에 열수 500 ml를 가하여 추출한 후 다시 500 ml를 가하여 재추출하였으며 이를 증발, 건조한 결과 추출액의 건물량은 4.67 mg이었다. 녹차잎의 함량이 1.25%가 되도록 조절한 녹차에는 항산화 활성이 강한 polyphenol 화합물중 (-) epicatechin gallate 54.1%, (-) epicatechin gallate 26.2%, (-) epigallocatechin 10.7%, (-) epicatechin 이 7.0% 및 catechin이 1.8% 함유되었다. Low density lipoprotein (LDL)의 산화에 있어서 LDL은 $CuSO_4$ 존재하에서 macrophage와 배양시켰더니 빠르게 산화를 일으켰다. 그러나 $5\;{\mu}M\;CuSO_4$ 매개 LDL의 산화에 50 및 $100\;{\mu}g/ml$ 농도의 GTE를 넣어 배양하면 거의 완전히 산화를 억제하였다. $5\;{\mu}M\;CuSO_{4}$ 존재하에서 산화시킨 LDL의 전기영동 이동거리는 native LDL보다 높았다. 또 50 및 $100\;{\mu}g/ml$ 농도의 GTE는 J774, human monocyte derived macrophags 및 vascular endothelial cells에서 유도되는 LDL의 산화를 억제하였다. $CuSO_4$ 및 cell 유도에 의하여 산화되는 LDL은 native LDL보다 더욱 많은 양이 human macrophage에 의하여 분해되고 GTE는 macrophage에 의한 $^{125}I-LDL$의 산화를 강력히 억제하였다. 그리고 GTE는 cell 매개 LDL의 macrophage에 의한 축적 또는 분해를 억제하였다. LDL을 $5\;{\mu}M\;CuSO_4$, 존재하에서 산화시킬 때 GTE를 50 및$100\;{\mu}g/ml$ 농도로 넣어 배양하면 공액 dienes의 생성이 억제되고, 또한 Oxid LDL macrophage derived human monocytes에서도 축적이 억제되었다.
Kwon, Jin Gwan;Jung, Yeon Woo;Seo, Changon;Hong, Seong Su;Lee, Ji Eun;Shin, Hyun Tak;Jung, Su Young;Choi, Chun Whan;Kim, Jin Kyu
한국자원식물학회:학술대회논문집
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한국자원식물학회 2019년도 춘계학술대회
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pp.100-100
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2019
This study attempted to establish a High Performance Liquid Chromatography (HPLC) analysis method for the determination of (-)-epicatechin gallate as a part of the quality control for the development of functional cosmetic materials from Penthorum chinense Pursh extracts. HPLC was performed on a Unison US-C18 column ($4.6{\times}250mm$, $5{\mu}m$) with a gradient elution of 0.05% (v/v) trifluoroacetic acid (TFA) and methyl alcohol at a flow rate of 1.0 mL/min at $30^{\circ}C$. The analyte was detected at 280 nm. The HPLC method was performed in accordance with the International Conference on Harmonization (ICH) guideline (version 4, 2005) of analytical procedures with respect to specificity, precision, accuracy, and linearity. The limits of detection and quantitation were 0.11 and 0.33 mg/mL, respectively. Calibration curves showed good linearity (r2 > 0.9999), and the precision of analysis was satisfied (less than 0.6%). Recoveries of quantified compounds ranged from 99.51 to 101.92%. This result indicates that the established HPLC method is very useful for the determination of marker compound in P. chinense Pursh extracts.
Antibacterial activities of the major phenolic components from Camellia sinensis L. were investigated against several pathogenic microorganisms including Gram-positive strains like Staphylococcus aureus ATCC 29213 and Streptococcus pyogens 308A; and Gram-negative strains like Escherichia coli ATCC 25922, Escherichia coli 078, Pseudomonas aeruginosa 9027, and Enterobacter cloacae 1321E. The MIC values demonstrate that both (-)-epicatechin and (-)-epigallocatechin were more considerably toxic against Staphylococcus aureus ATCC 29213 than the other two catechins like (-)-epicatechingallate and (-)-epigallocatechin-3-gallate. (-)-Epicatechingallate and (-)-epigallocatechin-3-gallate were most inhibitory against Escherichia coli ATCC 25922. As a result, (-)-epicatechin showed predominant antibacterial activities among tea varieties. The contents of major polyphenolic components such as four catechins, theaflavin, and quercetin were different according to fermentation processes. The total contents of four catechins were ranged from 13.81 to 1.33%, with (-)-epigallocatechin-3-gallate being dominant among tea varieties; theaflavin was found the characteristic pigment in fully-fermented black tea.
본 연구는 낙지다리(Penthorum chinense Pursh) 추출물을 기능성 화장품소재로 개발하기 위해 (-)-epicatechin gallate를 지표성분으로 선정하고, 품질관리를 위해 High Performance Liquid Chromatography (HPLC)를 이용하여 분석법을 개발하였다. 분석에 사용된 칼럼은 Unison $US-C_{18}$ ($4.6{\times}250mm$, $5{\mu}m$, Imtakt, USA)을 사용하여 0.05% (v/v) trifluoroacetic acid (TFA)와 메탄올을 이동상 조건으로 컬럼 온도는 $30^{\circ}C$ 에서 유속은 1.0 mL/min 로 검출파장은 280 nm에서 검출하였다. International Conference on Harmonization (ICH) 가이드라인(version 4, 2005)을 근거로 하여 특이성, 직선성, 정밀성, 정확성, 검출한계 및 정량한계를 분석하여 분석방법을 검증하였다. 검출한계 및 정량한계는 각각 0.11 mg/mL 및 0.33 mg/mL로 나타났으며, 검량곡선은 상관계수값이 0.9999로 양호한 직선성을 보였고, 정밀성 분석결과도 0.6% 이하로 확인하였다. 또한, 회수율은 99.51 ~ 101.92% 범위로 정확성이 있음을 알 수 있다. 따라서, 본 분석법은 낙지다리 추출물의 지표성분의 분석법은 적합한 시험법임이 검증되었다.
(-)-Epigallocatechin-3-gallate (EGCG), a mai or tea catechin has been shown to have many interesting biological activities. In the present study, we studied the effects of green tea catechins, EGCG metabolites, and black tea theaflavins on accumulation of EGCG in HT-29 human colon cells. Intracellular levels of [$^3H$]-EGCG were not changed significantly in the presence of other tea catechins including (-)-epicatechin, (-)-epigallocatechin, and (-)-epicatechin-3-gallate. EGCG methyl metabolites and EGCG 4"-glucuronide did not affect cellular levels of [$^3H$]-EGCG. Black tea theaflavins and theasinensin A (TsA), an EGCG oxidative dimer, however, significantly decreased cellular accumulation of EGCG in HT-29 cells by 31-56%. This decrease was more pronounced when cells were incubated in the presence of theaflavin-3',3"-digallate (TFdiG) or TsA. When EGCG was added separately from TFdiG or TsA, the accumulation of EGCG in HT-29 cells was also significantly decreased regardless of when TFdiG or TsA was added during the uptake study (p<0.01). The results suggest that theaflavins and TsA may interrupt EGCG absorption through the gastrointestinal epithelium.
A molecular imprinted polymer (MIP) using (+)catechin ((+)C) as a template and acrylamide (AM) as a functional monomer was prepared. Acetonitrile was used as the porogen with ethylene glycol dimethacrylate (EGDMA) as the crosslinker and 2,2'-azobis(isobutyronitrile) (AIBN) as the initiator. The adsorption isotherms in the MIP were measured and the parameters of the equilibrium isotherms were estimated by linear and nonlinear regression analyses. The linear equation for original concentration and adsorpted concentrations was then expressed, and the adsorption equilibrium data were correlated into Langmuir, Freundlich, quadratic, and Langmuir Extension isotherm models. The mixture compounds of (+)C and epicatechin (EC) show competitive adsorption on specific binding sites of the (+)catechin-MIP. The adsorption concentrations of (+)C, epicatechin (EC), epicatechin gallate (ECG), and epigallocatechin gallate (EGCG), on the (+)catechin-molecular imprinted polymer were compared. Through the analysis, the (+)catechin-molecular imprinted polymer showed higher adsorption ability than blank polymer which was synthesized molecular imprinted polymer without (+)catechin. Furthermore, the competitive Langmuir isotherms were applied to the mixture compounds of (+)C and EC.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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