• 생명과학회지
• /
• 제13권5호
• /
• pp.668-674
• /
• 2003

홍어를 발효하여 발효기간에 따른 항고혈압 효과를 조사하고 그에 따른 항고혈압성 물질을 분리하기 위해 GPC system을 사용하여 항고혈압 물질을 조 분리하였다. 항고혈압성 물질을 농축하기 위해 홍어 내장 및 가식부 열수 추출물을 대량 포집 하였다. 그리고 그에 따른 ACE 억제효과를 검색하였다. 즉, 홍어 가식 부의 ACE 저해 작용은 2% 첨가시 29%로, 다소 낮으나 상시 섭취될 수 있는 식품이란 측면에서 볼 때 그 유용성이 기대된다고 할 수 있으며 홍어 내장 열수 추출물의 ACE 저해 효과는 시료 2% 첨가의 경우 발효 0일째에 71.0%로 가장 높게 나타났다. 발효가 진행되면서 ACE 저해 효과는 감소하는 것으로 나타났다. 이러한 ACE 억제효과를 나타내는 성분을 추정하기 위하여 홍어 내장 열수 추출물의 일반성분과 원소분석을 실시한 결과 일반성분 중 순단백질이 58.7%로 가장 높게 나타났으며, 원소분석 결과 C, H, O, N의 성분비가 당류라기 보다는 peptide계인 것으로 나타났다. 또한, 질소화합물의 분석결과 ACE를 억제하는 기능성 peptide의 성분인 Tyr, Phe, Val, His 등이 가식부 보다 많아서 ACE를 억제하는 peptide를 함유하리라 예상되었다. ACE억제 물질을 조 분리하기 위하여 Sephadex G-25 column chromatography에 의해 분자량별로 분획한 결과, 분획물 들의 ACE 저해 효과는 분획물 B(111-160)의 농도 0.2%에서 67.8%로 가장 높은 ACE저해 효과를 나타내었다. 이상의 결과로 미루어 보아 홍어 내장 열수 추출물의 ACE 저해인자는 가열에 대하여 안정한 비교적 저분자의 peptide와 같은 물질이라고 추정할 수 있었다.

• BMB Reports
• /
• 제30권2호
• /
• pp.150-156
• /
• 1997

Tyrosinase was purified from Solanum melongena by ammonium sulfate precipitation, Sephadex G-150 and DEAE-Sephacel column chromatography. The molecular weight of the purified tyrosinase was approximately 88,600 daltons with 805 amino acid residues. The amino acid composition showed the characteristic high contents of glycine, glutamic acid and serine residues. The enzyme had high substrate specificity towards (+)-catechin. The $K_m$, value for L-DOPA was 20.8 mM. L-ascorbic acid, ${\beta}-mercapto-ethanol$, sodium diethyldithiocabamate, KCN and $NaN_3$ had strong inhibitory effects on enzyme activity. Sodium diethyldithiocabamate was a competitive inhibitor of the enzyme with a $K_i$ value of $5.2{\times}10^{-2}\;mM$. The optimum pH of the enzyme was 9.0 and the optimum temperature was $65^{\circ}C$ with L-DOPA as a substrate. In addition, the activity was enhanced by addition of $Ca^{+2}$ or $Cu^{+2}$, but decreased in the presence of $Fe^{2+},Fe^{3+}$ and $Zn^{2+}$ ions.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
• /
• 제7권3호
• /
• pp.167-173
• /
• 1997

Everted membrane vesicles of Helicobacter pylori were prepared and the membrane-resided ATPases were characterized. For comparison, Escherichia coli membrane ATPases and hog gastric mucosal H,K-ATPase were employed. ATPase assay revealed that the composite enzyme pool was relatively low in specific activities, below 1/10 times than that found in E. coli. According to their inhibitory specificities, most of the ATPase pool appeared to belong to the P-type ATPase, sensitive to vanadate but not to azide. The enzyme pool was extraordinarily resistant against treatment by N,N'-dicyclohexylcarbodiimide (DCCD). Certain monovalent cations, e.g., $K^+$ or $NH_4^{+}$ stimulated the whole enzyme pool only in the presence of $Mg^{2+}$. On the contrary, $Ni^{2+}$ and $Zn^{2+}$ increased enzyme activity rather effectively without the aid of $Mg^{2+}$. Under a defined condition employed, H. pylori cells could retain the membrane ATPase pool to the extent of $17{\%}$ at pH 3.2. Moreover, its activity was most stable in acidic conditions (pH 5.4-6.4). However, cytoplasmic or peripheral ATPase pools were hardly detected under acidity (below pH 4.6).

• Applied Biological Chemistry
• /
• 제48권1호
• /
• pp.65-69
• /
• 2005

St. John's wort를 성인병 예방을 위한 기능성 식품소재로 이용하기 위하여 추출물의 생리활성효과를 조사하였다. 추출물의 phenol 함량은 열수추출물이 $237.4{\pm}13.2\;{\mu}g/ml$였으며, 알콜추출물은 $246.0{\pm}10.5\;{\mu}g/ml$로 알콜추출물의 phenol 함량이 다소 높게 나타났다. 추출물의 항산화효과는 DPPH가 열수추출물과 알콜추출물이 각각 95.02%, 95.24%로 높게 나타났고, antioxidant protection factor는 알콜추출군이 PF 1.78정도로 지용성물질에 대한 항산화력도 높은 것으로 확인되었으나 열수추출물의 경우 지용성 물질에 대한 항산화력이 거의 없었다. Helicobacter pylori에 대한 추출물의 항균활성은 열수추출물의 경우 clear zone이 나타나지 않았으며 알콜추출물의 경우 $100\;{\mu}g/ml$과 $150\;{\mu}g/ml$의 농도에서 각각 11 mm와 13 mm의 clear zone이 관찰되어 저해활성이 높은 것으로 판단되었다. Angiotensin converting enzyme 저해효과는 열수추출군에서만 19.15%의 angiotensin converting enzyme에 대한 저해력을 나타내어 고혈압의 예방 효과는 비교적 낮았다. Xanthin oxidase에 대한 억제효과는 열수추출물이 84.79%, 알콜추출물이 100%의 완벽한 저해효과를 나타내어 xanthin oxidase에 대한 높은 저해를 관찰할 수 있었다. 이러한 결과로 St. John's wort는 Helicobacter pylori에 대한 항균제, 항산화제 및 anti-gout 소재로의 개발이 기대되었다.

• 한국산학기술학회논문지
• /
• 제17권1호
• /
• pp.152-158
• /
• 2016

글루탐산염(Glutamate)은 척추동물의 중추신경계에서 중요한 흥분성 신경전달물질 중의 하나이다. 글루탐산염의 대사를 조절하는 사람 글루탐산염 탈수소 효소(hGDH)는 정신분열증(schizophrenia) 환자의 대뇌에서 발현이 증가한다는 연구들이 있었다. 본 연구에서는 정신분열증과 연관된 항정신성약물인 haloperidol, risperidone, (${\pm}$)-sulpride, chlopromazine hydrochloride, melperone, (${\pm}$)butaclamol, domperidone, clozapine에 의한 hGDH의 효소활성변화를 확인하고자 하였다. 우선, 유전자 재조합을 통해 hGDH 동종효소 hGDH1, hGDH2를 합성하였다. 합성된 hGDH1과 hGDH2에 대한 항정신성약물의 억제효과를 효소검사법(enzyme assay)을 통해 확인한 결과, haloperidol, (${\pm}$)-sulpride, melperone, clozapine에 의해 hGDH1과 hGDH2의 효소활성이 억제되었다. 또한, 단백질 인산화 효소 측정법(kinase assay)을 하여 haloperidol이 기질인 알파-케토글루타르산에 대하여는 비경쟁적 저해반응(noncompetitive inhibition)을, NADH에 대하여서는 반경쟁적 저해반응(uncompetitive inhibition)이 나타는 것을 확인하였다. 입체성 다른 자리 작동체(allosteric effector)인 L-leucine이 다른 정신병치료제에서는 hGDH2의 억제를 회복시켰지만 오직 haloperidol에서는 효소의 활성이 회복되지 않았다. 따라서 본 연구는 hGDH1과 hGDH2 에서 항정신성약물에 의한 효소활성 억제를 비교하여 확인하였으며, 중추신경계에서 haloperidol이 GDH 활성 조절과 함께 글루탐산 농도를 조절할 수 있다는 가능성을 제시한다.

• 한국응용약물학회:학술대회논문집
• /
• 한국응용약물학회 1995년도 춘계학술대회
• /
• pp.71-71
• /
• 1995

The succinic semialdehyde dehydrogenase which is one of the key enzyme of GABA shunt in CNS has been purified from bovine brain homogeneously for the first time. The molecular mass of the native enzyme was estimated to be approximately 110,000 on gel filtration, The subunit molecular mass was determined by SDS-PAGE to be 54,000. These results indicate that the enzyme is a dimeric protein made up to identical subunits. Chemical modification studies of the enzyme suggest that the critical lysyl, connected with catalytic activity of the enzyme, The binding of IAF-SSDH(enzyme tagged with fluoreceine) to GABA transaminase which catalyzes the degradation of GABA was monitored by steady emission anisotropy. The changes of fluorescence anisotropy by interactions between two enzymes suggest that the formation of enzyme cluster must be invoved in the regulation of GABA concentration in brain tissues. The inhibitory effects of some antiepileptic and anticonvulsant drugs on the enzyme were also examined.

• 한국수산과학회지
• /
• 제43권6호
• /
• pp.648-653
• /
• 2010

This study was performed to investigate the inhibitory activity of Sargassum thunbergii (ST) against ${\alpha}$-amylase and elucidate the availability of ST extract as a functional food agent. To test the inhibitory activity of ST against ${\alpha}$-amylase, porcine pancreatic ${\alpha}$-amylase and potato starch were used as substrates. It was revealed that ST crude ethanol extracts have high ${\alpha}$-amylase inhibitory activity. Subsequently, ST crude ethanol extract was separated into five partition layers by solvent extraction: n-hexane, chloroform, ethyl acetate, butanol, and water. Chloroform and n-hexane fractions showed higher inhibitory activities than did acarbose (positive control). To confirm the changes in enzyme inhibitory activity by physical treatments, ST crude ethanol extract was subjected to heat, pH, and ${\gamma}$-irradiation treatments. In all heat treatments with the exception of one ($121^{\circ}C$, 15 min), the inhibitory activity was increased compared with the untreated group. With regard to pH stability, ST extract showed no significant changes at pH 4.6, but somewhat decreased inhibitory activity was revealed at pH 2, 8, and 10. On the other hand, ST ethanol extract was stable under ${\gamma}$-irradiation under all conditions (3.20 kGy). In summary, ST ethanol extract can be used in the food industry as a natural ${\alpha}$-amylase inhibitor.

• 한국식품과학회지
• /
• 제28권1호
• /
• pp.34-39
• /
• 1996

메밀(날 메밀, 볶은 메밀, 찐 메밀)에서 추출, 분리한 crude hemicellulose, alcohol-insoluble hemicellulose, residue 및 고분자 가용성 다당류(분자량 10 KDa 이상)와 저분자 가용성 다당류(분자량 10 KDa 이하)가 in vitro에서 췌장의 소화효소 활성에 미치는 영향을 조사하였다. 다당류-효소액을 $37^{\circ}C$에서 5분간 반응시킨 후 다당류를 제거하고 여액의 소화효소 활성을 측정함으로써 다당류가 소화효소의 활성에 미치는 영향을 조사하였다. 메밀의 crude hemicellulose, alcohol-in-soluble hemicellulose, residue는 ${\alpha}-amylase$ 활성을 저하시켰으며, 고분자 수용성 다당류와 저분자 수용성 다당류는 ${\alpha}-amylase$ 활성을 저해하지 않았다. 또한, 저분자 수용성다당류를 제외한 모든 다당류는 lipase의 활성을 감소시켰다. Crude hemicellulose, alcohol-insoluble hemicellulose, residue와 고분자 수용성 다당류는 trypsin과 chymotrypsin 활성을 현저히 저하시켰으나 저분자 수용성 다당류는 이들의 활성을 약간 감소시키는 것으로 나타났다.

• Archives of Pharmacal Research
• /
• 제19권6호
• /
• pp.480-485
• /
• 1996

Brain GABA transaminase is inactivated by preincubation with antidepressant/antipanic drug pheneizine (${\beta}$ethylphenylhydrazine) (mixing molar ratio 10:1) at pH 7.4. The reaction of enzyme with phenelzine was monitored by absorption and fluorescence spectroscopic methods. The inactive enzyme was fully reconstituted by addition of cofactor pyridoxal-5-phosphate. This result implies that the blocking of 1 mol of pyridoxal-5-phosphate per enzyme dimer is needed for inactivation of the enzyme. The time course of the reaction is significantly affected by the substrate .alpha.-ketoglutarate, which afforded complete protection against the loss of catalytic activity. The kinetic studies shows that phenelzine reacts with the cofactor of enzyme with a second-order rate constant of $2.1{\times}10^3M^{-1}s^{-1}$. It is postulated that the antidepressant/antipanic drug phenelzine is able to elevate the neurotransmitter GABA levels in central nervous system by inhibitory action on GABA degradative enzyme GABA transaminase.

• Biomolecules & Therapeutics
• /
• 제7권4호
• /
• pp.385-389
• /
• 1999

The injibitory effect of Bacillus licheniformis AJ isolated from genitourinary normal flora as a new probiotics on the growth of diarrheal pathogens was studied. This B. licheniformis AJ inhibited the growth of E.coli O-157. Salmonella typhi and Shigella sonnei as well as the infectivity of rotavirus. However, it did not inhibit the growth of Helicobacter pyloriand human intestinal bacteria although it inhibited the harmful enzyme activity of human intestinal bacteria. B. licheniformis AJ seems to excret heat-lable growth-inhibitory protein, bacteriocin, into the media. These results suggest that B. lichenoformis AJ could be used as a new type of probiotics.