Chitinase activities from Shumard oak tissues were determined to study changes in chitinase activities related to water stress. The enzyme extracted in sodium acetate buffer (0.1M, pH 4.5) was assayed by a colorimetric method. In addition, the fungal hyphae of Hypoxylon atropunctatum in xylem tissues of oak were observed through scanning electron microscopy. The enzyme in oak tissues was mainly endochitinase, and optimum pH for enzyme activity was 5. Specific chitinase activities from both of stems held under high relative humidity (ranges of 0.63-1.11 pKatal/$\mu\textrm{g}$ of protein) and stems held under low relative humidity (ranges of 0.41-0.99 pKatal/$\mu\textrm{g}$ of protein) were significantly increased following fungal inoculation with H. atropunctatum. However, there was no significant difference in chitinase activities between tissues held under high and low humidities, which might be due to fungal chitinase. Scanning electron microscopy showed holes in fungal hyphae in the xylem tissues of stems held under high humidity but not in the stems held under ow humidity, suggesting that hyphae might be hydrolyzed by plant hydolases such as chitinase.
A variety of important roles for branched-chain amino acids in metabolic regulation has been suggested. Branched-chain $\alpha$-keto acid dehydrogenase(BCKAD) complex is a rate limiting enzyme in branched-chain amino acid metabolism. The purpose of this study was to examine the effects of exercise on the activity and activity state of branched-chain $\alpha$-keto acid dehydrogenase in rat hert and liver thssues. Forty-eight Sprague-Dawley rats were assigned into three experimental groups : sedentary control, exercised, or exercised-rested. Submaximal exercise(running) for two hours significantly increased basal activity without a change in total activity in both tissues, with a concomitiant increase in activity state of the enzyme complex. At 10 min post-exercise, heart enzyme activity significantly decreased, though not to the control level, while liver enzyme activity remained unchanged. These data suggested that the exercise-induced increase in branched-chain $\alpha$-keto acid decarboxylation in rat tissues may not be the result of enzyme synthesis, but rather is due to increased activity of the BCKAD.
Present study aims to study antioxidant enzyme activity due to turbidity change in various tissues of Carassius auratus. As for the changes of antioxidant enzyme activity in tissues of C. auratus pursuant to the raising period under 50, 100, and 150 NTU with turbid water levels, there was no great difference between 50 NTU and 100 NTU compared to a control (0 NTU), however, it demonstrated a relatively noticeable difference at 150 NTU high turbid water level. When considering the antioxidant capacity in tissues of C. auratus in terms of DPPH free radical scavenging activity, there was shown a high activity in gill and liver tissues, therefore, it is thought that there appears a non-enzymatic antioxidant reaction when C. auratus is reared under the condition of highly turbid water. As for the enzymatic antioxidant reaction of antioxidant enzyme activity got increased as turbid water level went higher in order of 50, 100, 150 NTU, and the activities of superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), and glutathione-s-transperase (GST), increased in all tissues except for an integument, up to 20th day when it was started to be reared, and they showed a gradual decrease as time passed by. However, since the activity of glutathione reductase (GR) and glutathione peroxidase (GPX) is very low in almost all tissues, it is thought that the role of those enzymes would be quite ignorable in the course of antioxidant process.
The branched-chain ${\alpha}$-keto acid dehydrogenase (BCKAD) complex is a rate limiting enzyme which catalyzes the oxidative decarboxylation of branched-chain ${\alpha}$-keto acids. Numerous studies have suggested that BCKAD is subject to covalent modification in vitro via phosphorylation and dephosphorylation, which are catalyzed by a specific kinase and phosphatase, respectively. The biggest difficulty in the assay of BCKAD activity is to arrest the interconversion between the active and inactive forms. BCKAD activity was determined from fresh rat heart and liver tissues using homogenizing and assay buffers containing inhibitors of phosphatase and kinase. The results suggest that a radiochemical assay using ${\alpha}$-keto[1-$^{14}C$]-isovalerate as a substrate for the enzyme can be applied as a reliable method to determine in vitro enzyme activity with arrested interconversion between the active and inactive forms of the BCKAD complex.
Choe, Young-Sik;Lee, Ji-Hoon;Jo, Soo-Geun;Park, Kwan Ha
Fisheries and Aquatic Sciences
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v.19
no.10
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pp.45.1-45.5
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2016
As a novel strategy to remove ${\beta}$-lactam antibiotic residues from fish tissues, utilization of ${\beta}$-lactamase, enzyme that normally degrades ${\beta}$-lactam structure-containing drugs, was explored. The enzyme (TEM-52) selectively degraded ${\beta}$-lactam antibiotics but was completely inactive against tetracycline-, quinolone-, macrolide-, or aminoglycoside-structured antibacterials. After simultaneous administration of the enzyme with cefazolin (a ${\beta}$-lactam antibiotic) to the carp, significantly lowered tissue cefazolin levels were observed. It was confirmed that the enzyme successfully reached the general circulation after intraperitoneal administration, as the carp serum obtained after enzyme injection could also degrade cefazolin ex vivo. These results suggest that antibiotics-degrading enzymes can be good candidates for antibiotic residue depuration.
Kim, Dae-Hee;Jeong, Chang-Hwa;Nam, Yoon-Kwon;Min, Kwang-Sik;Kim, Dong-Soo
Journal of Aquaculture
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v.9
no.4
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pp.445-452
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1996
Endogeneous activities of ${\beta}-galactosidase$-like enzyme in various tissues from several finfishes and shellfishes were examined by histochemical analysis based on X-gal staining and by fluorimetric measurement using 4-methylumbelliferyl-${\beta}$-D-galactoside (4-MUG). Species used in this study were 3 freshwater fishes, mud loach (Misgurnus mizolepis), common carp (Cyprinus carpio) and tilapia (Oreochromis niloticus) ; 3 marine fishes, olive flounder (Paralichthys olivaceus), stone flounder (Kareius bicoloratus) and marbled sole (Limanda yokohamae) ; and 4 shellfishes, abalone (Haliotis discus hannai), Pacific oyster (Crassoskra gigas), pearl oyster (Pinctada fucata martensii) and ark shell (Anadara broughtonii). The activities of ${\beta}-galactosidase$-like enzyme in all finfishes examined were significantly different among species, with the wide variations between tissues in a species. In general, the tissues such as kidney, intestine and liver were ones which showed the significantly higher values in 4-MUG fluorimetry and deeper staining patterns in X-gal analysis compared to other tissues. On the other hand, serum and muscle revealed the significantly lower activities than others did, regardless of species. Shellfishes were also found to have endogenous activities of ${\beta}-galactosidase$-like enzyme which were significantly varied depending on both species and organs in a species. Hepatopancreas from all shellfishes examined showed the deepest pattern in X-gal staining and also the highest value in 4-MUG analysis, while activities of ${\beta}-galactosidase$-like enzyme in adductor muscles and mantle muscles from all shellfish species in this study except Pacific oyster were negligible : Pacific oyster had the significant activity of this enzyme in muscle tissues. Putative endogenous lacZ fragment was amplified from both finfishes and shellfishes by polymerase chain reaction (PCR). The molecular size of PCR products was about 510 bp, and there was no difference in size among species examined.
The purpose of this study was to probe the influences of krill (Euphausia superba) meal with NaF oral administration on a dose-effect relationship between fluoride levels of krill meal and serum enzyme activity such as alkaline phosphatase (ALP), aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT), and lactate dehydrogenase (LDH) in rats fed experimental diets for 5 weeks. There were no significant decreases in the activities of ALP, AST, ALT, and LDH in sera among krill meal diet groups (KF10, KF20, KF30). However, these groups were significantly (p<0.05) lower enzyme activities than normal diet (ND) plus NaF 10 mg group (NF). The fluoride levels of serum and organ tissues (liver, brain, heart, lung, kidney) in NaF 10 mg groups (NF, KF10, KF20, KF30) were significantly increased by adding krill meal in comparison with normal diet group. The results indicate that a difficult to found toxicity to the tissues from krill meal diet groups.
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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2003.10a
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pp.90.2-91
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2003
In commercial greenhouses, senescent flower petals or flowers of vegetables such as tomato, strawberry, hot pepper and zucchini squash were blighted to be removed from fruits within five days after spraying of Trichoderma harzianum YC459 (TORY), a biocontrol agent for the gray mold rot of vegetables caused by B. cinerea The mechanism for selective colonization of senescent floral tissues by T. harzianum YC459 was elucidated using fresh and senescent (Hays and 14days after flowering, respectively) floral tissues of zucchini squash (Cucurbita moschata Duchesne). The spores of T. hrzianum YC459 were produced more on agar and liquid culture media supplemented with 5% dry powder of senescent floral tissues than fresh tissues during 15days. Mycelial growth was also much better in the media with senescent tissues than with fresh tissues. Enzyme activities of amylase, polygalacturonase and cellulase in the liquid media which might be involved in the colonization of tissues by T. harzianum YC459 were compared. The activities of three enzymes were much higher in the media with senescent floral tissues than with fresh floral tissues reaching to the maximum during 9 to 12days of incubation. Based on the results, the removal of senescent floral tissues, a possible inoculum source of the pathogen, may be another mechanism for biocontrol of gray mold rot of vegetables by T. harzianum YC459.
We assessed the effect of Se-methylselenocysteine (MSC) treatment, at a dose of 0.75 mg/rat/day for 1 or 2 weeks, on the activities of antioxidant systems in Sprague-Dawley rat tissues. Significant changes in glutathione and antioxidant enzyme activities, with different patterns among tissues, were evidenced. Glutathione content and its reduction state in the liver, lung, and kidney were elevated upon MSC treatment, whereas they were significantly lowered in the spleen. Among the tissues exhibiting glutathione increase, there were different enzymatic responses: $\gamma$-glutamylcysteine ligase activity, the rate-limiting enzyme in the glutathione synthesis pathway, was increased in the liver, whereas the activities of the enzymes associated with glutathione recycling, namely, glutathione peroxidase, glutathione reductase, and glucose 6-phosphate dehydrogenase, were significantly increased in the lung and the kidney. The superoxide dismutase activity was decreased in all tissues upon MSC treatment, whereas catalase activity was increased in all tissues but the liver. Lipid peroxidation level was transiently increased at 1 week in the lung and the kidney, whereas it was persistently increased in the spleen. The increase was not evident in the liver. The results indicate that the MSC treatment results in an increase in the antioxidant capacity of the liver, lung, and kidney principally via an increase in glutathione content and reduction, which appeared to be a result of increased synthesis or recycling of glutathione via tissue-dependent adaptive response to oxidative stress triggered by MSC. The spleen appeared to be very sensitive to oxidative stress, and therefore, the adaptive response could not provide protection against oxidative damage.
The present study aimed to investigate the level of accumulated heavy metal in various tissues of Carassius auratus after exposure to Cadmium (Cd), histologically and physiologically. After treating C. auratus with Cd, the accumulated Cd in gill tissues was detected to be of the highest content, and showed the lowest content in integument tissues. Also, Cd content increased in a time dependent manner and showed the highest accumulation in the tissues exposed for 20 days. Antioxidant enzyme activities showedhigher activity in the gill and integument than in the kidney and liver tissues. In the case of SOD, antioxidation activity of SOD in all Cd exposed tissues was higher than in unexposed tissues. The activities of SOD and CAT also became higher after Cd exposure. Gill tissues exposed to Cd showed an increased number of mucous cells between lamella in a time dependent manner. In addition, the gills showed morphological changes such as edema, exfoliation of epithelial cells, and fusion of the secondary lamellae. Also, exposure to Cd for 20 days had an effect on gill tissues, causing membrane damage in the mitochondria and nucleus. In kidney tissues, atrophied glomerulus was observed, and the empty space in Bowman's capsule was wider.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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