• 제목/요약/키워드: enzymatic method

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시판 우유 중 콜린 함량조사 (Choline Contents Survey in Commercial Milks)

  • 정원철;김영일;손호영;김석;이후장
    • 한국식품위생안전성학회지
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    • 제23권4호
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    • pp.338-342
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    • 2008
  • 콜린은 정상적인 세포벽의 기능, 아세틸콜린의 합성, 지질의 운송, 그리고 매칠기의 공급원으로서 중요한 유기화합물이다. 콜린의 보충이 콜린성 신경세포의 활성을 통해 학습 및 기억력 향상에 효과가 있다는 연구 보고를 토대로, 시중에서 시판되는 많은 우유제품 속에 콜린 함유량을 증가시켜 뇌를 좋게 하는 기능성 식품으로 판매되고 있다. 따라서 본 연구에서는 효소측정법을 이용하여, 시중에서 판매되고 있는 전유와 첨가우유들을 5개 회사의 제품을 대상으로 콜린의 함량을 분석하였다. 콜린의 표준용액을 이용하여 구한 표준곡선은 0.00316의 기울기와 0.998의 $r^2$ 값을 나타내었다. 회수율은 89.8-97.6%로 양호한 값을 나타내었다. 분석한 우유에서의 콜린함유량은, 전유에서는 14.56-15.19 mg/100 g이었고, 첨가우유에서는 4.11-11.50 mg/100 g을 나타내었다.

Column-switching HPLC를 이용한 성장기용 조제식 중 비타민 $D_3,\;K_1$의 동시분석 (Simultaneous Determination of Vitamin $D_3\;and\;K_1$ in Infant Formula by Column-switching High Performance Liquid Chromatography with UV Detection)

  • 곽병만;안장혁;장치훈
    • 한국식품과학회지
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    • 제37권6호
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    • pp.1024-1027
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    • 2005
  • 본 연구에서는 성장기용 조제식 중에 영양강화를 위해 첨가하는 비타민 $D_3$$K_1$의 함량측정을 위해 lipase를 이용하여 효소 가수분해 후 유기용매로 비타민을 추출하여 동시에 분석하는 신속분석법을 위와 같이 수행하였다. 추출된 비타민을 전처리 컬럼에서 2번의 switching time을 설정하여 농축컬럼에 홉착시킨 후 gradient mode로 2가지 이동상으로 분석컬럼에서 각각의 성분을 모두 분리하여 동시에 검출하는 방법을 사용하였다. 시료로 사용된 성장기용 조제식은 표기함량보다 다소 높게 분석되었으나, 국제표준인증물질을 시료로 사용하여 본 연구의 실험방법에 의해 측정된 값은 인증된 표준값내의 결과를 보여주었다. 따라서, 비타민 $D_3$ 또는 $K_1$을 강화한 분유, 이유식 등의 분말 유제품 중에서 함량을 측정하고자 할 때 한정된 장비와 인력으로 각각의 2가지 실험방법을 수행하기가 어렵거나 시간단축이 필요한 경우, 본 연구에서 수행한 실험방법과 같이 시료전처리를 간단하고 신속하게 수행할 뿐만 아니라 역상컬럼과 column-switching HPLC에 의해 비타민 $D_3$ 또는 $K_1$을 동시에 분석함으로써 보다 효율적인 분석을 진행 할 수 있을 것으로 사료된다.

탈지미강 단백질의 가수분해 및 분해물의 특성 연구 (Proteolysis of Defatted Rice Bran Using Commercial Proteases and Characterization of Its Hydrolysates)

  • 김창원;김현석;김병용;백무열
    • 산업식품공학
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    • 제15권1호
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    • pp.41-47
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    • 2011
  • 쌀부산물인 탈지미강을 상업적으로 사용되는 8가지 protease를 최적화된 조건에서 단일 혹은 혼합 처리하여 수용성 단백질을 분리하였다. 이렇게 분리된 단백질을 Lowry, Kjeldahl 그리고 Gravimetric method 등 총 3가지 방법으로 분석을 한 결과 Protamex, Alcalase, Protease N이 가장 높은 분해율을 나타냈다. 3가지 방법에서 모두 Protamex, Alcalase, Protease N이 가장 높은 분해율을 나타내었고, Gravimetric method의 경우 다른 두 분석방법인 Lowry, Kjeldahl method에 비해 더 높은 단백질 함량을 보였다. 또한 위의 단일처리결과를 바탕으로 3가지 protease를 혼합하여 처리하였을 때 단일효소처리에 비해 상승효과가 나타나는 것을 알 수 있었는데, 이것은 protease의 경우 가수분해 할 수 있는 특정 peptide 혹은 amino acid가 있는데 각각의 protease가 분해하지 못하는 peptide 혹은 amino acid를 서로 분해해줌으로써 상승효과가 나타난 것으로 생각된다. 효소처리를 하여 얻어진 단백질의 사이즈를 알아보기 위해 SDS PAGE를 한 결과 어떠한 밴드도 형성이 되지 않았고 이는 분해된 단백질이 marker의 최소 사이즈인 15 kDa보다 작기때문인 것으로 생각된다. 따라서 일반 단백질보다 사이즈가 작은 polypeptide나 amino acid로써 분해된 것을 뜻하고 실제로 섭취하였을 때는 신체에서 생성되는 단백질 분해효소인 trypsin이나 chymotrypsin의 분해 없이도 쉽게 흡수 할 수 있을 것이라 판단된다. 또한 효소의 종류가 많을수록 총 아미노산의 함량이 높아짐으로써 식품첨가물로써 활용도가 높은 단백질가수분해물로 분해되었음을 확인할 수 있었다.

A Product Inhibition Study on Adenosine Deaminase by Spectroscopy and Calorimetry

  • Saboury, Ali Akbar;Divsalar, Adeleh;Jafari, Ghasem Ataie;Moosavi-Movahedi, Ali Akbar;Housaindokht, Mohammad Reza;Hakimelahi, Hosain
    • BMB Reports
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    • 제35권3호
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    • pp.302-305
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    • 2002
  • Kinetic and thermodynamic studies have been made on the effect of the inosine product on the activity of adenosine deaminase in a 50 mM sodium phosphate buffer, pH 7.5, at $27^{\circ}C$ using UV spectrophotometry and isothermal titration calorimetry (ITC). A competitive inhibition was observed for inosine as a product of the enzymatic reaction. A graphical-fitting method was used for determination of the binding constant and enthalpy of inhibitor binding by using isothermal titration microcalorimetry data. The dissociation-binding constant is equal to $140\;{\mu}M$ by the microcalorimetry method, which agrees well with the value of $143\;{\mu}M$ for the inhibition constant that was obtained from the spectroscopy method.

폐기물 활용을 위한 종합적 처리방법의 김치쥬스 발효 향상 (Improvement of Kimchi Juice Fermentation by Combined method for Chinese Cabbage Waste Utilization)

  • 전윤기;윤석권;김우정
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제26권5호
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    • pp.794-799
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    • 1997
  • The effective fermentation methods of Kimchi juice for utilization of outer layer of Chinese cabbage, an waste of Kimchi industry were studied. The Kimchi juice prepared with brining and grinding the waste of Chinese cabbage and addition of spices was fermented at $25^{\circ}C$. Addition of 5$^{\circ}C$15% fermented Kimchi juice of pH 5.4 at initial stage and pH 4.4 at middle state resulted in a significant increase in fermentation rate and solid content after 12 hours of fermentation. The combined method of enzymatic hydrolysis(0.1% viscozyme) of the brined and ground cabbage and addition of 2.0% NaCl, 1.0% sucrose and 10% fermented juice of pH 5.4 first and 4.4 during fermentation, respectively resulted in more rapid fermentation. The solid concentration was 5 times higher than control at maximum point and acidic and total flavor intensity were also significantly high.

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세균의 Methionyl-tRNA Synthetase를 저해하는 새로운 항생물질의 스크리닝 (Screening of New Antibiotics Inhibiting Bacterial Methionyl-tRNA Synthetase)

  • 곽진환;조영준;송난규
    • 약학회지
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    • 제45권3호
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    • pp.245-250
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    • 2001
  • Aminoacyl tRNA synthetases of bacteria are known as potential targets for new anti-microbial agents. To isolate new inhibitors of bacterial methionyl-tRNA synthetases from natural sources, a new target-oriented screening system using whole cells which are over-expressing a target enzyme was developed. Approximately 8,000 culture broths of microorganisms from soils were tested by this screening system. Among them, ten culture broths was found to contain inhibitory activity against methionyl -tRNA synthetases of Escherichia coli. For the validation of the screening system, this new method was compared with in vitro enzymatic method. Seven out of 10 culture broths showed inhibitory activity against methionyl-tRNA synthetases of E. coli. This result showed that the new screening system was comparable to the enzyme assay. Thus we believe that our screening system as a new method can be applied for the screening of new antibiotics inhibiting bacterial methionyl-tRNA synthetases from natural products.

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분광광도계를 이용한 L-tyrosine과 L-DOPA 혼합물의 분석방법 (Assay Method of L-tyrosine and L-DOPA Mixture Using Spectrophotometer)

  • 김지현;유영제
    • KSBB Journal
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    • 제5권2호
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    • pp.191-194
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    • 1990
  • Tytosine은 방향족 아미노산이고, L-DOPA는 orth위치에 수산화기를 하나 더 가지는 tyrosine유도체이다. L-DOPA는 효소에 의하여 tyrosine으로부터 전환되어 생성할 수 있는데 반응액에서 두 물질을 분리, 분석하는 것은 상당히 어렵다. 본 논문에서는 두 아미노산 혼합물을 UV/VIS spetrophotermeter를 이용하여 동정함으로써 두 물질이 구분되는 두 파장을 결정하였고 두 파장에서 혼합물의 흡광도를 측정함으로써 농도를 정량하는 분석 system을 확립하였다. 이 방법은 사료에 아무런 전처리가 필요없으므로 손쉽고 간단하게 분석에 사용할 수 있다.

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A Simple Enzymatic Method for Quantitation of 2'-Fucosyllactose

  • Seydametova, Emine;Shin, Jonghyeok;Yu, Jiwon;Kweon, Dae-Hyuk
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제28권7호
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    • pp.1141-1146
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    • 2018
  • 2'-Fucosyllactose (2'-FL) is one of the most important human milk oligosaccharides and has several health benefits for infants. The levels of 2'-FL in breast milk or samples from other sources can be quantified by high-performance liquid chromatography. However, this method cannot be used for simultaneous detection of the target compound in numerous samples. Here, we developed a simple method for quantifying 2'-FL in a microplate format. The method involves two steps: (i) release of $\text\tiny{L}$-fucose from 2'-FL by ${\alpha}$-(1-2,3,4,6)-$\text\tiny{L}$-fucosidase and (ii) measurement of NADPH formed during the oxidation of $\text\tiny{L}$-fucose by $\text\tiny{L}$-fucose dehydrogenase. This method enables measurement of up to 5 g/l 2'-FL in 50 min using a 96-well microplate. The efficiency and simplicity of the proposed method make it suitable for the analyses of a large number of samples simultaneously.

인삼조직에서 Catalase Activity측정에 관한 새로운 Method (A New Method on the Measurement of Catalase Activity of Panax ginseng C.A. Meyer Tissues)

  • 양덕조;채쾌;윤재준;이성종;이애라
    • Journal of Ginseng Research
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    • 제9권2호
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    • pp.154-162
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    • 1985
  • We report a newassay method on the measurement of the catalase activity, whose utilzation value is considered to be remarkable in the field of plant biochemistry. We named this method as a De-Coupling method. The essence of de-coupling method is the separation between the enzyme reaction and the indicator reaction. The optimum condition of the enzyme reaction was found to be following: on addition of 1 ml of substrate (H2O2: 20mM) to the fixture of the crude extract of enzyme (volume: 0.2 ml) and the ammonium phosphate buffer (volume: 1.8 ml; 0.93 M phosphate, 1.6M NHB, 2.5 M methanol, pH 7.0). After 30, 60 and 90 seconds of the enzyme reactions are proceeded, the reactions are terminated by 25% of tai-chloro-acetate (final concentration of 5%), respectively. The precipitated materials by tai-chloro-acetate was removed by the centrifugation (2000g, 10minutes). Formaldehyde produced in the enzymatic reaction was reacted with 2ml of acetylacetone (60mM). The indicator reaction -(HANTSCH REAKT10N)- in which lutidine is formed, was proceeded for 60 minutes at $25^{\circ}C$.

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연속효소반응장치의 최적반응조작설계 (Optimal Operation Design of Continuous Enzymatic Reactor System)

  • Namkoong, Shik
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제2권2호
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    • pp.63-77
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    • 1974
  • 가장 복잡한 반응기구를 갖은 효소반응의 예로서, 생성물에 의한 비길항 및 길항 2중조해를 입는 효소반응의 경우에 대하여 연속효소반응장치의 반응 조작을 Pontryagin의 연속형최대원리에 의하여 연구하여 얻은 최적설계법을 보고하였다. 설계예로서 유두영 등의 보문에 발표된 반응속도에 관한 data를 사용하여 합성 Penicilline의 중간체인 6-APA 합성반응공정의 경우를 다루었다.

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