International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제20권1호
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pp.7-12
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2010
To determine the optimal isolation conditions of the entomopathogenic fungi from soil, we compared their growth characteristics with non-entomopathogenic fungi on agar media containing various concentrations of cooper (II) chloride ($CuCl_2$) or dodine. The result showed that dodine medium is more selective, and the optimal concentration of dodine is determined with $50{\mu}g$/ml. We could isolate several putative entomopathogenic fungi from soil using this, and identify them using ITS analysis. As a result, 64% fungi were identified as typical entomopathogenic fungi. This selective medium may be useful to the rapid and simple isolation of entomopathogenic fungi from soil.
Cordyceps militaris specimens were continuously collected by Entomopathogenic Fungal Culture Collection (EFCC), Kangwon National University from different mountains, national parks and recreation parks of Korea from 1986 to 2002, mainly from late May to October of each year. Dry specimens of C. militaris along with their isolates have been preserved in EFCC. Fruiting of C. militaris was induced from single ascospore isolates as well as their combinations in brown rice medium. Fruiting experiments showed that combinations of single ascospore isolates produced fertile fruiting bodies, but single isolates could not produce any fruiting bodies. It was shown that two isolates of the opposite mating types were required to produce fertile stromata. However, combinations of the same mating type isolates produced no fruiting body, showing that C. militaris is a bipolar, heterothallic fungus.
Effects of various preservation periods and subcultures on fruiting body formation of Cordyceps militaris were investigated using EFCC C-10995 single ascospore strains. Fruiting body formation by original strains was profuse when preserved at $4^{\circ}C$ for $5{\sim}6$ months. Fruiting from subcultures was stable till second to sixth subcultures, after which it decreased sharply. The more the colony color of subcultures changed, the less the fruiting bodies formed. Liquid inoculum preparation of single ascospore strains in the same or separate broths did not affect fruiting body formation. Similarly, two strains C-10995-3 and C-10995-6 in different numbers during liquid inoculum preparation produced similar fruiting bodies.
Insects constitute the largest and most diverse group of animals in the world. They also serve as the hosts or nutrient sources for an immense assemblage of pathogens, parasites, and predators. More than 700 fungal species from 100 genera have adopted an entomopathogenic lifestyle. Although entomopathogenic fungi were studied as only biocontrol agents against a variety of pests in various countries, it has been recently focused their additional roles in nature. They are antagonists to/against plant pathogens, endophytes, and possibly even plant growth promoting agents. The potential antimicrobial effect against fungal plant pathogens by an isolate of entomopathogenic fungi including Beauveria bassiana, Lecanicillium spp., and Isaria fumosorosea have been reported since late 1990s, but wasn't reported pathogenicity of the isolate against pests. Later, a Canadian Lecanicillium sp. isolate and L. longisporium isolated from Vertalec$^{(R)}$ showed simultaneous control effect against both aphid and cucumber powder mildew. Therefore, the antimicrobial activities of 342 fungi isolates collected from various regions and conditions in Korea were evaluated against plant pathogenic fungus Botrytis cinerea using dual culture technique on agar plate. As a result, 186 isolates (54.4%) shown the antifungal activity against B. cinerea. The culture filtrates of selected fungi completely suppressed the growth of the microorganisms, indicating that suppression was due to the presence of antimicrobial substances in the culture filtrate. Mode of action of these fungi against insect involves the attachment of conidia to the insect cuticle, followed by germination, cuticle penetration, and internal dissemination throughout the insect. During infection process, secreted enzymes, proteinous toxins, and/or secondary metabolites secreted by entomopathogenic fungi can be used to overcome the host immune system, modify host behavior, and defend host resources. Recently, secondary metabolites isolated from entomopathogenic fungi have been reported as potential bioactive substances. Generally, most of bioactive substances produced by entomopathogenic fungi have reported low molecular weight (lower than 1,000 g/mol) as peptide and, in contrast the high molecular weight fungal bioactive substances are rare. Most substances based on entomopathogenic fungi were shown antimicrobial activity with narrow control ranges. In our study we analyzed the antimicrobial substances having antagonistic effects to B. cinerea. Antimicrobial substances in our fungal culture filtrates showed high thermostability, high stability to proteolytic enzymes, and hydrophilicity and their molecular weights were differed from substance. In conclusion, entomopathogenic fungi showed pathogenicity against insect pests and culture filtrate of the fungi also shown to antimicrobial activity. In the future, we can use the entomopathogenic fungi and its secondary metabolites to control both insect pest control and plant pathogenic fungi simultaneously.
본 논문에서는 국내 산림 지역의 토양에서 서식하는 곤충병원성 진균을 insect-baiting 방법을 이용하여 분리하고자 하였으며, 곤충병원성 진균과 토양의 물리적, 화학적 특성과의 관계를 분석하고자 하였다. 국내 산림 지역 5곳을 선정하여 토양을 채집하였으며, 채집된 토양에서 총 42 분리주를 분리하였다. 그 중 Beauveria bassiana (42.9%)와 Metarhizium anisopliae (45.2%)가 주로 분리되었으며, 특히 M. anisopliae의 분포는 토양의 총 질소량(g/kg)과 유기물 함량(%)에 따라 달라지는 것이 확인되었다. 국내 산림 지역의 토양은 낮은 pH를 보였으며(pH 4-5), 전체 분리주 중에서 미사질 양토(silt loam)에서 50% 이상이 분리되었다. 본 연구의 결과는 통하여 토양의 물리적, 화학적 특성과 곤충병원성 진균의 분포 및 다양성과의 관계를 이해하는데 도움이 될 것으로 판단된다.
The present study was carried out to explore the Cordyceps species and other entomopathogenic fungal flora around Kathmandu Valley and a few high altitude locations of Nepal. In this paper, we report eight Cordyceps species as new to Nepal: C. gracilis, C. ishikariensis, C. liangshanensis, C. martialis, C. militaris, C. pruinosa, C. sphecocephala and C. tricentri. We also mention a few allied genera such as Beauveria, Hirsutella and Paecilomyces from Nepal. Further collections from different ecological regions of Nepal will show the richness of entomopathogenic fungal floral diversity of Nepal.
곤충이 곰팡이병에 감염되는 것을 흔히 볼 수 있고, 대부분은 이들에 대해 감수성을 나타내고 있다. 최근 살충제 저항성이 문제가 되면서 곤충병원성 곰팡이를 이용한 모기 방제에 대한 연구가 더욱 주목을 받고 있고, Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae, Lagenidium giganteum와 같은 병원성 곰팡이를 모기 방제에 사용하기 위해 노력 중이다. 이 총설에서는 말라리아, 뎅기열, 사상충, 황열병 등을 옮기는 모기들의 방제에 사용되는 곤충병원성 곰팡이를 정리하고 이들의 활용방안을 논하였다.
곤충병원성 사상균을 이용한 솔잎혹파리의 효과적인 방제법을 개발하기 위하여, 병원성이 강한 균주를 전국 산림토양으로 부터 분리.동정하고, 병원성 검정을 통하여 유효 곤충병원 사상균을 선발코자 하였다. 솔잎혹파리 다발 지역을 중심으로 전국으로 부터 233개 지역의 토양시료를 채취하여, Beauverla속 29균주, Paecilomyces속 2균주를 분리하였다. 분리된 균주는 위상차현미경 및 주사전자현미경으로 형태를 관찰하였다. 아울러 토양 분리 균주를 솔잎혹파리 유충에 대해 병원성을 검정한 결과, Beauveria 속 SFB-168-2가 82.9%로 높은 병원성을 나타내어, 솔잎혹파리 방제를 위한 유효병원 사상균으로 선발하였다.
In vitro fruiting bodies were produced from ten different isolates of Condyceps militaris EFCC C-5736, EFCC C-5941, EFCC C-5976, EFCC C-6040, EFCC C-6849, EFCC C-7268, EFCC C-7342, EFCC C-7992, EFCC C-8027 and EFCC C-8549. Single ascospores were isolated from in vitro grown fruiting bodies and used for fruiting body production in brown rice medium by both intra-strain crossing and out-crossing. Length and dry wt. of stromata grown in vitro were measured. Strains producing highest dry wt. of stromata were selected. Both intra-strain crossings and inter-strain crossings of single ascospore strains were found to produce profuse fruiting bodies of C. militaris.
A survey for entomopathogenic nematodes was conducted throughout the nine provinvrd and within three city limits during the summer of 1990 and 1991. Six of the nine provinces and one of the three cities were positive for entomopathogenic nematodes. Out of the total 499 soil samples, 23(4.6%) were positive for entomopathogenic nematodes with 19(3.8%) containing Steinernema and 4(0.8%) containing Heterorhabditis. Heterorhabditis bacteriopora and three distinct groups of Steinernema species were idintified. One groups was indentified as S. carpocapsae, another S. glaseri and the other S. monticola based on cross breeding studies. Positive sample sites in each habitat includes 15 of the 415(3.6%) from forests including regrowth areas with shrubs, 1 of the 27(3.7%) from turfgrass including golf courses and parks, 3 of the 24(12.5%) from agricultural fields, 2 of the 16(12.5%) along riparian areas, and of the 17(11.8%) near the seashore. We advocate that more surveys be conducted for entomopathogenic nematodes before commercial sources of nematodes are widely applied which may obscure the naturally-occurring nematodes. A key to Steinernema is provided for the identification.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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