• 대한미생물학회지
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• 제11권1호
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• pp.33-48
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• 1976

The practical significance of using a selective enrichment procedure for detecion and enumeration of salmonella is well recognized. There are still various selective enrichment media has been communly used. Early years selenite broth was recomnended as an enrichment media for the isolating of salmonella. Hajna introduced a modified tetrathionate broth and demonstrated the greater efficiency to compare with the previous enrichment media. Raj also described that the new medium called dulcitol selenite enrichment and has been found to be very satisfactory, especially general implication in food poisoning. Authors tried to compare these 3 enrichment media for isolating salmonella. 1. When salmonella strains were inoculated $1{\sim}10^6$ cells per tube to these 3 enrichment media, mostly similar results were obtained between selenite broth and DS broth. In these 2 enrichment broth were showed $10^7/ml-10^8/ml$ cells of all tested salmonella strains. But in the case of TT broth it was found that the growth was $10^3/ml{\sim}10^4/ml$ cells for tested strain. 2. When E. coli, Proteus, Citrobacter were inoculate $10{\sim}10^6$ cells per tube to these 3 enrichment media. It was suggested that DS broth was showed more inhibitory action than that of selenite broth. TT broth showed high inhibition to these 3 organisms tested. 3. It was generally known that the incubation time is influenced to the frequency of salmonella detection. For this tendency, DS broth and selenite broth were showed similar results within 24 hrs to 48hrs incubation to the test. But DS broth showed more inhibitory action to E. coli and Proteus than that of selenite broth. 4. When $1{\sim}10$ cells were inoculated(per tube) to these 3 enrichment media, DS broth was found to be more sensitive than that of selenite broth.

• 한국식품영양과학회지
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• 제40권12호
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• pp.1787-1792
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• 2011

연구는 식품으로부터 Shigella spp.를 분리하기 위해서 현재 사용되고 있는 증균배지를 대상으로 증균성능을 비교하였다. GN broth, Shigella broth, SF broth, SC broth 총 4개의 증균배지를 비교하였다. S. sonnei에 대해 각 접종 수준에 대한 성장은 Shigella broth에서 $10^1$ cfu/mL 낮은 수준의 존재 시에도 성장이 확인되었다. 분리배지에서 거의 구분이 되지 않는 Morganella spp.에 대한 증균은 Shigella broth를 사용할 경우 성장이 저해되었다. 식품을 대상으로 한 S. sonnei의 증균성능은 돼지고기에서 GN broth와 SF broth가 높은 증균능력을 보였으며 소고기에서는 GN broth에서의 증균능력이 높게 나타났으나 Shigella broth에서 증균능력이 높지 않았다. 실험에 사용된 배지는 식품 종류에 따라 증균되는 특성이 상이하므로 식품에서 Shigella spp.를 분리하고자 할 경우 우선적으로 식품 특성을 고려하여 증균배지를 선택하는 것이 바람직할 것으로 생각되었다.

• 한국식품저장유통학회지
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• 제23권6호
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• pp.759-764
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• 2016

본 연구의 목적은 가금류에서 문제가 되고 있는 살모넬라 신속검출을 위해 광학현미경 기반 이미징 시스템 적용에 앞서서 냉장온도로부터 손상된 살모넬라를 증균시키기 위한 최적의 배지를 선정하는 것이다. 대표적인 식중독 유발균주인 S. Typhimurium과 S. Enteritidis를 닭에 도말 하였고 $4^{\circ}C$에서 24시간 동안 저장한 후 BPW, LB, BHI, UPB, NB, 그리고 TSB 배지와 BG, RV, SC, SB 그리고 TBS 선택배지에 각각 6시간 동안 배양하였다. 배양 후, 2시간마다 살모넬라 균수를 측정하였고 그 결과 BHI와 BG를 선택되었다. 최종적으로 최적의 배지 선택을 위해 다양한 농도의 살모넬라를 닭에 각각 도말 후 6시간 동안 배양하면서 균수를 변화를 측정하였다. 그 결과 BHI가 냉해로부터 손상된 살모넬라를 증균시키기 위한 가장 최적의 배지로 선정되었으며 본 연구의 결과는 광학현미경 기반 이미징 시스템을 활용한 신속검출법 적용을 위한 증균배지로 이용될 것이다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제24권6호
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• pp.647-651
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• 1996

The development of an enrichment method for the rapid and effective identification of Salmonella spp. in sewage or food was studied. As a growth factor for Salmonella, 10 mM cyclic adenosine monophosphate (cAMP) in trypticase soy broth with 0.6% yeast extract (TSBYE) increased cell number five-folds and 0.6% yeast extract in selenite broth increased cell number ten-folds of control. Bile salts in selenite broth was tested for the selection of S. enteritidis in a mixture with Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Lactobacillus plantarum and Escherichia coli. The latter four strains were effectively inhibited at 0.1% bile salt. A two-step culture method was used to enrich Salmonella spp.; a primary-enrichment and secondary- enrichment culture. At a primary-enrichment step, selenite broth with 0.6% yeast extract and 10 mM cAMP was used, and at a secondary-enrichment step, 0.1% bile salt was additionally used. Culture times of a primary- enrichment and a secondary-enrichment step were 8 hr and 6 hr, respectively. In this procedure, cell number increased from 10$^{0.3}$ to 10$^{8.5}$ with inhibition of other strains within 14 hr. In the case of an initial cell concentrarion as low as 10$^{-2}$ cfu/ml, a cell number increased to 10$^{7}$ cfu/ml by using a 10 hr primary-enrichment and 6 hr secondary-enrichment procedure.

• 대한수의학회지
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• 제9권1호
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• pp.63-69
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• 1969

건강도쇄돈(健康屠殺豚)의 장간막임파선(腸間膜淋巴膳)과 분(糞)(대장내용물(大腸內容物))으로부타 살모넬라균(菌)의 분리방법(分離方法)을 비교연구하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 비교적 다른 세균에 의한 오염도(汚染度)가 낮은 장간막임파선(腸間膜淋巴膳)을 검사하였을 경우, 증균배지(增菌培地)로서는 tetrathionate broth(TB)가 selenite broth(SB) 보다 살모넬라균(菌) 분리율(分離率)이 월등히 높았으며, 선택배지(選擇培地)로서는 brilliant green agar (BG)가 SS agar(SS) 보다 역시 월등히 높았다. 2. 여러가지 장내세균(腸內細菌)에 의한 오염도(汚染度)가 높은 분(糞)을 검사하였을 경우에는, 살모넬라균(菌)의 분리율(分離率)에 있어서 증균배지(增菌培地)로 사용한 TB와 SB의 우열(優劣)을 인정할만한 차이를 보지 못하였으며, 선택배지(選擇培地)로 사용한 BG와 SS의 성적도 비슷하였다. 증균배지(增菌培地)나 선택배지(選擇培地)를 어느 한가지 배지(培地)만 사용한 경우보다는 두가지 배지(培地)를 동시에 같이 사용함으로써 살모넬라균(菌)의 분리율(分離率)이 크게 높았다. 3. Brilliant green McConkey broth 를 증균배지(增菌培地)로 사용하였을 경우에는 장간막임파선(腸間膜淋巴膳)과 분(糞)의 두 가지 재료중 어느것이나 TB 보다 살모넬라균(菌)의 분리율(分離率)이 훨씬 낮았다. 분(糞)을 brilliant green McConeky agar 에 직접 배양(培養)하는 방법은, TB나 SB에 증균배양(增菌培養)을 한 뒤에 BG나 SS의 증균배지(增菌培地)를 사용하는 방법보다 또한 훨씬 분리율(分離率)이 낮았다. 4. TB 및 SB의 증균배양시간(增菌培養時間)은 $37^{\circ}C$에서 24, 48 및 72 시간(時間)등 세가지를 비교해본 결과 장간막임파선(腸間膜淋巴膳)은 48 시간(時間) 배양(培養)했을 때에 살모넬라균(菌)의 분리율(分離率)이 가장 높았으나 분(糞)은 24 시간(時間)배양했을 때에 가장 분리율(分離率)이 높았다.

• Journal of Dairy Science and Biotechnology
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• 제41권3호
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• pp.103-112
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• 2023

This study aimed to assess the effectiveness of 10 different pre-enrichment methods using Real-Time polymerase chain reaction (PCR) in support of the FDA method. When the initial Cronobacter spp. (Enterobacter sakazakii) inoculation was 7.2 CFU/g, the Ct values were observed in the following order: 21.37 (Enterobacteriaceae enrichment [EE] broth), 21.95 (brain heart infusion [BHI]), 22.72 (tryptic soy broth [TSB]), 23.02 (violet red bile lactose [VRBL]), 22.31 (TSB-0.1% sodium pyruvate [SP]), 23.43 (distilled water [DW]), 24.34 (phosphate buffered saline [PBS]), 24.95 (nutrient broth [NB]), 25.82 (TSB-0.6% yeast extract [YE]), and 28.27 (violet red bile glucose [VRBG]). For an inoculation of 1.82% CFU/g of Cronobacter spp. (E. sakazakii), the Ct values were recorded in this sequence: 20.34 (EE broth), 22.16 (TSB-0.6% YE), 22.37 (BHI), 22.71 (VRBL), 22.88 (TSB), 23.01 (DW), 23.19 (NB), 23.79 (TSB-0.1% SP), 24.66 (VRBG), and 24.70 (PBS). Finally, when the inoculum of Cronobacter spp. (E. sakazakii) was 0.182 CFU/g, the Ct values followed this order: 21.93 (VRBL), 23.07 (TSB-0.6% YE), 23.31 (DW), 23.47 (PBS), 23.70 (BHI), 24.14 (TSB-0.1% SP), 25.14 (TSB), 29.00 (VRBG), 31.55 (EE broth), and were undetected in the case of NB. Consequently, these results indicate that there were no significant differences among the 10 different pre-enrichment broths. Future studies should focus on exploring pre-enrichment broths that can improve the limit of detection at very low Cronobacter spp. (E. sakazakii) concentrations and enhance the selective recovery of Cronobacter spp. (E. sakazakii) under acid, antibiotic, cold, and heat damage conditions.

• 미생물학회지
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• 제47권1호
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• pp.87-91
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• 2011

본 연구에서는 분말 식품에서 real-time PCR과 배지배양법을 사용하여 Cronobacter spp.를 검출하는 방법이 비교검증 되었다. 조제분유, 이유식, 미숫가루에 Cronobacter를 인위적으로 접종시킨 후, 식품공전의 방법에 따라 멸균증류수와 Enterobacteriaceae enrichment (EE) broth에서 각각 1, 2차 증균배양 하였으며, Druggan-Forsythe-Iversen에 선택배양하여 Cronobacter를 검출하였다. Real-time PCR은 멸균증류수 및 EE broth에서 1 ml을 채취한 후 DNA를 추출하여 시행하였다. 실험결과 모든 식품에서 배지배양법과 real-time PCR간에는 통계학적 유의차가 존재하지 않았다(p>0.05). 한편 모든 실험회차에서 real-time PCR 수행 시, 1차 증균액인 멸균증류수에서의 양성검출율이 2차 증균액인 EE broth에서보다 높았는데, 이는 2차 증균액 내의 구성성분 중 일부분이 real-time PCR의 반응을 저해했기 때문으로 사료된다. 연구결과를 종합해 볼 때, 1차 증균 후, real-time PCR을 통해 Cronobacter를 검출하는 방법은 정확한 민감도를 보이면서도 시간과 노동력을 절감할 수 있는 효과적인 방법으로 사료된다.

• 한국식품과학회지
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• 제48권4호
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• pp.323-328
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• 2016

본 연구는 non-O157 EHEC의 혈청형별 증균 및 선택배지에서의 분리 조건 및 비교 시험을 하여 최적의 검출 방법을 제시하고자 하였다. EC medium with MUG broth, BRILA broth, mTSB broth with novobiocin 3종의 증균배지 성능 및 배양 조건의 비교 결과 EC-MUG 증균배지를 $42^{\circ}C$에서 24시간 배양하면 EHEC의 효율적인 증균이 이루어질 수 있을 것이라 생각된다. ENDO agar, Chromocult agar, TBX agar, CHROMagar$^{TM}$ STEC medium 4종의 선택배지에 가장 효과적인 배지를 확인결과 TBX agar가 검출율이 가장 높았으나 1종의 배지를 사용했을 경우 다양한 EHEC 혈청형 균를 검출 하기는 어렵다고 생각된다. 그러므로 EHEC를 효과적으로 검출하고자 할 경우 TBX agar와 보완이 가능한 그 외의 배지를 사용하여야 효과적인 검출이 가능할 것으로 생각된다. 또한, 각 배지가 혈청형에 따른 분리효율이 다르므로 본 연구 결과를 참조하여 가장 적합한 배지를 선택 해야 할 것으로 보인다. 향후 non-O157 EHEC의 적절한 기질을 사용하여 다양한 혈청형을 모두 검출 할 수 있는 효율적인 배지의 개발이 필요하다고 생각된다.

• 대한임상검사과학회지
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• 제46권4호
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• pp.140-142
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• 2014

To evaluate the recovery rates to increase toxigenic C. difficile, the selective enrichment broth culture methods were compared with commonly used cytotoxin assays and toxigenic culture. First, the enrichment culture, using the selective medium broth for 2 to 5 days, was performed and then, toxigenic C. difficile was confirmed by C. difficile toxin gene-specific PCR after being cultured on C. difficile selective agar. The sensitivity of C. difficile from the enrichment culture (100%) was higher than that of C. difficile selective agar culture (93.8%), while positive predictive values (PPV) were low; 72.7% (16/22) and 88.2% (15/17). PPV of the enrichment culture are not high. Recently, combinations of C. difficile selective agar culture, C. difficile A & B assays, glutamate dehydrogenase, and nucleic acid amplification method are widely used. The enrichment culture was disadvantageous in PPV, turn-around time, and cost. So, what we performed is not considered as a common method of diagnosis of C. difficile-associated diarrhea.

• 대한수의학회지
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• 제14권2호
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• pp.243-252
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• 1974

The experiment was performed in order to investigate the applicability of the rapid detection of salmonellae in various animal-origin foods by means of the direct fluorescent antibody technique. Egg, sausage and chicken were inoculated with various concentrations of Sal.paratuphi A, Sal. paratyhi B and Sal. thompson, and the fluorescent antibody technique was applied and compared with the conventional cultura method for the sensitivity of detection of the organisms. Two methods were employed in the fluorescent antibody technique; the direct smear method in which the smear being made directly from the specimens, and the enrichment smear method in which the smear being made from the enrichment broth. The effect of various enrichment time (1,5,8,11 and 13 hours) in tetrathionate broth on the detection of salmonellae in the fluoresent antibody technique was also studied. The results obtained were summarized as followings; 1. Of the three methods, the enrichment smear method of fluorescedt antibody technique was highly effective as cultural method for the detection of salmonella organisms. 2. Direct smear method of fluorescent antibody technique was effective as two other methods $5{\times}10^4$ organisms presented in 50 g(ml) of specimens. This method may not be applicable when the specimens contained $5{\times}10^2$ or less organisms. 3. Of the three specimens, the recovery rate of Salmonella organisms from egg was slightly higher than that of sausage and chicken. 4. In fluorescent antibody technique and cultural method, the specimens inoculated with Sal. thompson were found to be higher detection rate than the specimens inoculated with Sal. paratyphi A, 5. The optimum enrichment time of Salmonella organisms in tetrathionate broth on the detection by fluorscent antibody technique was found to be 11 hours or longer when the specimens of egg, sausage and chicken were inoculated with approximately 500 organisms. The longer enrichment time was the higher detection rate up to 11 hours tested.