Identification of salmonellosis-infected commercial poultry flocks has become a pivotal component of efforts to reduce incidence of egg-associated transmission of S. enteritidis and S. typhimurium to humans. As a basic study for sanitary control of S. enteritidis and S. typhimurium, main food-borne pathogenic bacteria in eggs produced by domestic hens, commercial egg samples were tested for specific antibodies to whole cells of S. enteritidis and S. typhimurium and outer membrane protein(OMP) of S. typhimurium by ELISA to detect infection of S. enteritidis and S. typhimurium in various groups of hens. When the antibody titers of yolks from three commercial brand eggs were tested after diluting in the ratio from 1:100 to 1:1,600 with double dilution method, ELISA values of the specific antibodies could be shown as differences in dilution patterns by comparing with negative control egg. When the antibody titers of the yolks from two commercial brand eggs were tested after diluting in the ratio of 1:200 and 1:1,000, ELISA values of specific antibodies were different among same brand eggs. When the antibody titers of yolks from five eggs sampled randomly from twenty one commercial brand eggs were tested after diluting in the ratio of 1:1,000, ELISA value of the specific antibodies were shown generally high. ELISA values of 28.5, 30, and 28.5% of yolks from 21 brand eggs were shown low and similar to negative control egg in antibody titers to whole cells of S. enteritidis and S. typhimurium and OMP of S. typhimurium, respectively. The results demonstrated that ELISA test of egg yolk antibody could provide a highly sensitive indicator to detect contamination of S. typhimurium and S. enteritidis in poultry, and could be used effectively to reduce incidence of S. typhimurium and S. enteritidis infection in poultry.
The purpose of this study is to observe purification and properties of osteopontin(OPN) from bovine milk. The purification of osteopontin from bovine milk was performed by using ion-exchange and hydrophobic chromatography. SDS-PAGE analysis revealed that the protein migrated at Mw. 60,000. NH2-terminal sequence analysis of the first seven amio acids revealed the protein to be identical to that previously reported for bovine OPN. 35-wk-old chickens, including 3 Single Comb White Leghorn (SCWL), were used to produce egg yolk antibody(IgY) against OPNas a antigen. However, the anti-OPN antibody activities determined by ELISA. Immunological assy of OPN in milk was performed using radial immunodiffusion test based on the standard curve of pure OPN. The radial precipitation lines of four different milk samples indicated that the concentrations of OPN in the milk samples were within the range of 31.7 to 39.7${\mu}g$/ml. On inhibition with OPN on precipitation of calcium phosphate, OPN was slightly higher than casein phosphopeptide(CPP) and poly-glutamic acid.
Vitellogenins(VTGs) are the precursor of egg-yolk proteins in most oviparous species from invertebrates to vertebrates. In oviparose vertebrates, VTGs are synthesized in the liver and transported through the blood to oocytes. In female fish, concentrations of plasma VTG increase rapidly at onset of vitellogenesis in the normal reproductive cycle. Male fishes also possess the gene for VTG, but plasma concentrations of the protein typically remain small, presumably due to low levels of endogenous estrogens. However, exposure of males to exogenous estrogenic mimics can result elevated. Therefore, the VTG in fish can be used as a useful biomarker for appropriate tools of endocrine disrupting compounds effects. In this studies, we prepared the test methods that can measure the plasma VTG level in the gobies that live in polluted area with mimic estrogen. For the purpose, we purified VTG of floating goby(Chaenogobius annularis) and prepared specific monoclonal and polyclonal antisera to yolk protein, then developed a sandwich competitive ELISA system for measurement of plasma VTG levels. Validation for the ELISA system using monoclonal and polyclonal antibodies against VTG was tested. The absorbance curve of serial dilutions of serum from vitellogenic female was paralleled to the standard curve of VTG, but normal male was not paralleled. The developed sandwich ELISA system was measured for VTG levels in plasma of common goby(Acanthogobius flaviman) and javeline goby(A. hasta) as well as in plasma of floating goby(C. annularis).
During the rapid phase of gonadal development of the freshwater teleost, the catfish (Silurus asotus), the influence of hCG upon the inducement of final oocyte maturation and spawning was investigated electrophoretically and ultrastructurally. The electrophoretic patterns obtained were different in the presence and absence of some of the major or minor zones, because of the hormone level in catfish. The vitellogenin of hormone-treated fish was stained more intensively than that of sham-treated fish. These proteins showed some minor or main bands of egg extracts which migrated at positions corresponding to molecular weights of approximately 90,000. However, the thickness of electrophoretic band in molecular weight for hCG-treated fish was slightly lower than that for saline control. It seemed the plasma protein with molecular weight of approximately 45,000 in hCG-treated fish disappeared. In contrast to the control fish, the ovaries in the catfish treated with hCG shows a marked ultrastructural change under the electron microscope. No dilated profiles were seen in the granulosa cells of the mature oocyte before ovulation. After germinal vesicle breakdown (GVBD), the zona radiata interna (ZRI) becomes more compact, and there is a loss of all the processes from the pore canals. There is a wide space between the vitelline membrane and zona radiata. Also, during final maturation, the microvillar processes from the oocyte are seen no longer to penetrate deeply into the extracellular spaces of the overlying granulosa cells, and the reticulate patterns of the zona radiata interna becomes occluded, giving the zona radiata a more solid appearance. It has been possible to initiate 100% oocyte maturation in yolk granules and follicles in vivo by treatment with hCG and a high water temperature ($27^{\circ}C$). In hCG-treated fish, the percentages of successful artificial fertilization and hatching were maximal at 15 h after a single injection. It seems clear that a long acting preparation containing hCG can be successfully used in prespawning fish to advance the final events of gonadal maturation and initiate spawning. Further studies are necessary to evaluate the potential of hCG to either stimulate or inhibit the reproductive development of fish at other stages of the seasonal reproductive cycle.
This study was carried out to evaluate the effectiveness of anti-Helicobacter pylori IgY powder to suppress infection of Helicobacter pylori in humans. Hens were immunized with H. pylori to produce a specific anti-H. pylori IgY in their egg yolks, and then anti-H. pylori IgY Powder was used a sample after egg yolks were harvested The safety tests of anti-H. pylori IgY powder were conducted a acute and subacute toxicity test, The result was that the mice fed IgY powder were normal state on a acute and subacute toxicity test The effect of anti-H. pylori IgY powder was evaluated by urease breath test, Volunteers who tested positive for H. pylori using a $^{13}C-urea$ breath test were divided in two groups, one was administrated with anti-H. pylori IgY powder (11.2g/day) and natural extract mixture and the other was administrated with water soluble protein fraction (3.2g/day) of anti-H. pylori IgY powder, The results of clinical test in two groups were shown reduction of UBT value about 23 and 18 respectively. This result indicates that anit-H. pylori IgY is safety and can be used toy the effective supplement as an ingredient of functional food.
Huge amount of persimmon peels, which are byproducts usually arising after making dried persimmons from fresh persimmons, are generated in fall, every year. As the dry matter of persimmon peel contains carbohydrates over 80%, it could be a good candidate for feed. In this study, we evaluated the persimmon peel as a feed resource for a hen laying eggs. Persimmon peel has lower ratio of crude protein and fat composition while higher ratio of crude fiber composition compared to a basal laying hen feed. Feeding the persimmon peel by adding to the feed at the level of 2% or 5% did not affect the egg-laying rate from beginning to the peak of laying. In addition, feeding the persimmon peel did not affect the egg quality either, as the pH, Haugh unit, yolk color and shell thickness of the egg were not different from each other. The composition of amino acids and fatty acids were also almost same for each other, except for the linolenic acid which was slightly higher in the persimmon peel feeding groups. In conclusion, addition of persimmon peel to the feed up to 5% might be helpful to increase the income and reduce the waste produced from the agricultural byproduct.
This experiment was conducted to investigate the effects of drinking of Rhus tree-extract on laying performance and egg quality in hens. Four hundred eighty, 55-wk-old ISA brown, laying hens were divided into six groups, control, Rhus tree-extract 500 ppm, 1,000 ppm, 2,000 ppm, 3,000 ppm and 5,000 ppm. The hens were fed a supplemented drink containing Rhus tree-extract for 12 weeks. Egg production and egg mass increased by drinking Rhus tree-extract (p<0.05) and the feed conversion ratio also improved in Rhus tree-extract groups. Cecal numbers of Lactobacillus spp., E. coli and Salmonella were not different in treatments. Availability of protein and ash improved in the Rhus extract groups. The eggshell breaking strength and egg shell thickness were significantly increased in Rhus tree-extract 3,000 ppm and Rhus tree-extract 2,000 ppm groups compared to the other groups. Also, egg yolk color and Haugh unit were significantly improved by the dietary Rhus tree-extract (p<0.05).
Park, Sang Hyoun;Oh, Keon Bong;Ock, Sun-A;Byun, Sung June;Lee, Hwi-Cheul;Kumar, Suresh;Lee, Sung Gu;Woo, Jae-Seok
Journal of Embryo Transfer
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v.33
no.3
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pp.185-194
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2018
The aim of this study was performed to evaluate the effects of ice-binding protein from the arctic yeast Leucosporidium (LeIBP) supplementation on cryopreservation of boar sperm. The collected semen was diluted ($1.5{\times}10^8/ml$) in lactose egg yolk (LEY) and cooled at $5^{\circ}C$ for 3 h. The cooled semen was then diluted ($1{\times}10^8/ml$) in LeIBP containing LEY with 9% glycerol and maintained at $5^{\circ}C$ for 30 min. The semen was divided into six experimental groups (control, 0.001, 0.005, 0.01, 0.05 and 0.1 mg/ml of LeIBP). The straws were kept on above the liquid nitrogen ($LN_2$) vapors for 20 minutes and then plunged into $LN_2$. After thawing, computer-assisted sperm analysis was used for sperm motility and flow cytometry was performed to assess the viability, acrosome integrity (FITC-PSA/PI), ROS (DCF/PI), lipid peroxidation (BODIPY C11/PI) and apoptosis (Annexin V/PI), respectively. No significant responses were observed for sperm motility. However, sperm viability was significantly increased on 0.05 and 0.1 mg/ml of LeIBP groups compared to control (P < 0.05). In addition, acrosome integrity was significantly increases LeIBP groups (P < 0.05) and both ROS and lipid peroxidation level were lower in all LeIBP groups than those of control (P < 0.05). On the other hand, a significant higher apoptosis rate was observed in 0.05 and 0.1 mg/ml of LeIBP groups compared to control (P < 0.05). It can be assumed that a supplementation of LeIBP in boar sperm freezing extender is an effective method to increase the sperm qualities after cryopreservation.
Vitellogenesis, an important reproductive process in oviparous animals, includes the processes of hormonally regulated synthesis of yolk precursor protein, vitellogenin (Vg), and their deposition in ovarian oocytes as a vitellin which is an important energy source as well as buoyancy regulator of the egg. Vg genes consist of a gene family that encompasses a large number of lipoproteins and produce different Mr. Vg proteins in liver. The expression of Vg is largely dependent on the estrogen, and both reproductive cycle and temperature also influence Vg synthesis. Synthetic estrogens or estrogenic pollutants was sufficient to induce Vg in both sexes of oviparous vertebrates. Therefore, the estrogenic induction of vitellogenesis in male has been used for biological marker in the screening of estrogenicity of certain endocrine disrupting compounds and the monitoring the world-wide contamination of estrogenic compounds in wild life. In the studies on the biological hazard and influence of endocrine disrupting chemicals using the Vg induction in oviparous males, it is important to consider the reproductive cycle, zoogeography and biodiversity of the wild life animals in Korea.
A feeding trial was conducted to investigate the influence of feeding Lactobacillus reuteri culture (LR) on productive performance, intestinal microflora and availability in laying hens. Four hundred and eighty, Isa-Brown layers, 49 weeks of age, were fed diets supplemented with LR at the level of 0 (control), 0.1, 0.2, and $0.4\%$ of the diets for eight weeks. Egg production and egg weight were measured daily. Feed intake was weighed every two weeks. Egg quality was measured three times at the start, mid-term, and end of the experiment. Intestinal microflora were examined for Lactobacillus spp., E. coli and Salmonella at the end of the experiment. Overall egg production was the highest in $0.2\%$ LR (P<0.05), but that of $0.1\%$ or $0.4\%$ LR treatments did not significantly differ from that of control. Egg weight was significantly higher in LR feeding group than the control (P<0.05). Daily egg mass was significantly higher in $0.2\%$ and $0.4\%$ LR treatments compared to the control and $0.1\%$ LR (P<0.05). The number of jumbo and extra large eggs were increased in LR supplemented groups, especially in $0.1\%$ LR. Feed intake of layers fed LR supplemented diets tended to be lower than the control. However, feed conversion ratio significantly improved in LR supplemented groups (P<0.05). Availability of dry matter and crude protein improved significantly in $0.4\%$ LR treatment (P<0.05). But, those of ether extract and crude ash were not significantly different among treatments. Eggshell breaking strength and eggshell thickness were not significantly influenced by LR supplementation, and Haugh unit and yolk index were also similar to the control. Total number of Lactobacillus spp. in ileum and cecum fed LR supplemented diets were significantly higher than those of the control (P<0.05). There were no significant differences in intestinal E. coli and Salmonella in all treatments. Therefore, it is concluded that dietary supplementation of Lactobacillus reuteri culture can improve the laying performance, feed efficiency and intestinal Lactobacillus.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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