Kim, Yeong-Dae;O, Myeong-Ju;Jeong, Tae-Seong;Jeong, Seong-Ju
Journal of fish pathology
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v.17
no.1
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pp.11-20
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2004
The present study compared purification methods of hen egg yolk immunoglobulin (IgY) from the hen immunized with Edwardsiella tarda. The purification of anti-E. tarda IgY was performed by four different methods, polyethylene glycol (PEG), chloroform polyethylene glycol (Chloroform-PEG), ammonium sulfate and purification kit. Purified IgY had heavy chain of 64 kDa and light chain of 27 kDa size. IgY purified from the hen immunized with E. tarda showed higher ELISA values and agglutination titers than those with IgY purified from the non-immunized hen as a negative control. In addition, purified IgY recognized similar E. tarda proteins to those with anti-E. tarda rabbit serum by western blotting. Purified IgY had an agglutination titer of 1:512 by PEG method and ammonium sulfate method, and 1:128 by chloroform-PEG method and purification kit. Moreover, PEG method was the most rapid method among the four different IgY purification methods. These results indicate that PEG method is effective purification method maintaining biological activity of the IgY.
Chick antibodies (IgY) raised against Streptococcus mutans (serotype c) were separated from egg yolk and their properties were investigated. The purity of IgY extracts prepared by the method of ${\lambda}-carrageenan$, $gammaYolk^{TM}$, and $EGGstract^{TM}$ was 20%, 46%, and 48%, respectively, and the yields of IgY extracts from a gram yolk were 11. 3 mg, 1.7 mg, and 1.8mg, respectively. Quantitative immunoprecipitation test showed that specific IgY content of crude IgY prepared by ${\lambda}-carrageenan$ method was 12.2%, which means that 0.85 g of crude IgY from an egg yolk (15 g) contains about 100 mg of specific IgY. When the reactivity of the specific IgY towards 3 caries-inducing strains (serotype: b, c, f) was examined, the strains cultured in sucrose-added medium showed higher reactivity (the orders were c(+), f(+), b(+)) than those cultured in sucrose-free medium. Heat and pH stability of specific IgY was good, for crude IgY contained 50% of antibody activity after heat treatment at $70^{\circ}C$ for 5 min and they were stable at pH $4{\sim}8$.
High-quality protein ingredients have been used in nursery diets, in spite of expensive ingredients, to minimize nutritional deficiency and disease problems. Recent dramatic increases in prices of protein products for nursery diets have exacerbated the challenge. Spray-dried egg may be a part of the solutions. Therefore, this review describes the value of spray-dried egg in nursery diets as a high-quality protein source. Spray-dried egg is egg by-product and is produced by only eggs without shell that are below the USDA Grade B standards. Spray-dried egg is an excellent nutrient source: 1) highly digestible, 2) excellent balance of amino acids, 3) rich content of fat, and 4) high metabolizable energy. These can be attributed to growth of nursery pigs. Beyond the provision of bioavailable nutrients, spray-dried egg also may provide specific physiological benefits. Spray-dried egg contains 1) immunoglobulin antibodies (IgY: IgG in egg yolk) that may attach to intestinal pathogens and excrete them and 2) lysozymes antimicrobial protein that can damage bacteria cell wall. Thereby feeding spray-dried egg may reduce concentration of intestinal pathogen and thus improve potential gut health or enteric disease resistance in nursery pigs. This is important for physiologically immature weaned pigs. Based on these benefits, spray-dried egg is believed to have the same benefits as spray-dried plasma protein and milk products in diets for nursery pigs. Therefore, it is suggested that spray-dried egg has a great potential as a valuable protein source in nursery diets.
TRAIL, tumor necrosis factor (TNF)-related apoptosis-inducing ligand belongs to one of important cytokine superfamilIES, tumor necrosis factor ($TNF{\alpha}$). TRAIL-2 receptor agonists activate several cell signaling pathways in cells in different manners and could lead to apoptosis or necrosis. Agonistic egg yolk antibodies like IgY which have been developed in a selective manner could activate TRAIL death receptors such as TRAIL-2 (DR5) and thus apoptosis signaling. We here investigated induction of apoptosis in human breast cancer cells (MCF7 cell line) by an IgY produced against an 21 aminoacid epitope of the human TRAIL-2 receptor. As the first step a small peptide of 21 aminoacids choosen from the extracellular domain of DR5 protein was produced with a peptide synthesizer. After control assays and confirmation of the correct amino acid sequence, it was injected to hens immunized to achieve high affinity IgYs. At the next step, the produced IgYs were extracted and examined for specificity against DR5 protein by ELISA assay. Subsequently, the anticancer effect of such IgYs was determined by MTT assay in the MCF7 human breast cancer cell line. The produced peptides successfully immunized hens and the produced antibodies which accumulated in egg yolk specifically recognized the DR5 protein. IgYs exerted significant toxicity and killed MCF7 cells as shown by MTT assay.
Yolk immunoglobulins (yIgG) from hen's egg were purified. To investigate the stability of yIgG to digestive enzymes, the changes of antigen binding activities (ABC) after in vitro proteolysis were examined by competitive ELISA. After 30 min exposure to pepsin, the ABC of yIgG was lost. However, comparing with native yIgG, the ABC of pepsin digested yIgG was decreased, but considerable amount of ABC was remained after 30 min exposure to pepsin in 50% saccharose solution. Therefore, the stability of yIgG to pepsin digestion was improved by the addition of saccharose to yIgG solution. The ABC of yIgG was considerably remained after exposure to trypsin and chymotrypsin for 8 hr. YIgG showed especially good stability to chymotrypsin proteolysis.
Objective: This study aimed to investigate the effects of dietary supplementation with Agaricus blazei polysaccharide (ABP) at varying concentrations on the performance, egg quality, blood biochemistry, intestinal morphology, and microflora of quail. Methods: The study involved a total of 2,700 Korean quails, which were randomly divided into three groups. The measured variables encompassed productive performance, egg parameters, carcass parameters, serum metabolites, immune response parameters, antioxidative properties, and gut microbiome. Results: The addition of ABP did not have a significant effect on average daily feed intake. However, it was found to increase the average daily egg weight and egg production rate, reduce the feed-egg ratio. There were no significant impacts on egg quality measures such as egg shape index, egg yolk index and color, egg yolk and protein content. However, ABP supplementation significantly increased the Hough unit (p<0.01) and decreased the rate of unqualified eggs (p<0.01). Regarding serum parameters, the inclusion led to an increase in total protein concentration (p<0.05) and a reduction in low-density lipoprotein cholesterol (p<0.05). There were no significant effects observed on immune indicators such as immunoglobulin A (IgA) and IgM. ABP supplementation increased the levels of serum antioxidant indicators, including glutathione peroxidase, total superoxide dismutase (p<0.05), and total antioxidant capacity colorimeter (p<0.05). Furthermore, ABP supplementation significantly elevated the intramuscular fatty acid content in quail meat. Additionally, ABP supplementation demonstrated a significant improvement in the diversity of gut microbiota and induced alterations in the composition of the gut microbiota. Conclusion: The findings of this study indicate that dietary supplementation of ABP enhanced production performance and antioxidant capacity while increasing the levels of polyunsaturated fatty acids in quail muscle.
Objective: Seaweeds could be an alternative and functional feed resource. The purpose of this experiment is to investigate the effect of dietary supplementation of Sargassum meal on laying performance and egg quality of layers. Methods: Two hundred 36-wk-old layers were divided into five treatment groups. Each treatment had four replicates with 10 hens per experimental unit. The corn-soybean meal basal diet was formulated as control group. Sargassum meals were included 0%, 1%, 2%, 3%, or 5% to diets for five treatment groups, respectively. Treatment groups were isocaloric-isonitrogenous diets. Laying performance and egg quality were measured for eight weeks. Results: Sargassum meal supplementation did not affect daily feed intake. Supplementation 1% to 3% of Sargassum meal in diets increased daily laying rate and egg mass compared with those from control group (p<0.05). Egg qualities among five groups were all similar. Supplementation of 3% Sargassum meal increased the lightness of egg yolk (p<0.05). Eggs produced from layers fed 1% and 2% Sargassum meal had a higher consumer's acceptability than the control group (p<0.05). In blood characteristics, contents of glucose, nitrogen, triiodothyronine (T3) and thyroxine (T4) increased as the increase of supplementation ratio of Sargassum meal (p<0.05). In serum antibody titers, supplementation of 2% Sargassum meal stimulated a higher immunoglobulin M (IgM) level than that from control group (p<0.05). However, IgM content of layers fed diets with Sargassum meal ≥3% were decreased (p<0.05). There was no difference in IgA and IgG titers among groups. Conclusion: Supplementation of 1% to 3% Sargassum meal has shown to increase egg laying rate and egg mass of Leghorn layers. However, high supplementation (5%) would negatively affect laying performance. In consideration of laying performance, egg quality, consumer responses, and blood antibody, supplementation of Sargassum meal was suggested 2% in the diet for layers.
To determine the concentration of Lactoperoxidase (LPO), an indirect enzyme-linked immunosorbant assay(ELISA) was developed. Anti-LPO egg yolk immunoglobulin(IgY) was transferred to egg yolk by immunizing of Brown hens with LPO. The titer of purified anti-LPO IgY was 1: 520,000. The immunological response of anti- LPO IgY with ${\alpha}$-lactalbumin, ${\beta}$-lactoglobulin, casein and lysozyme were evaluated, resulting that the anti-LPO IgY found to be a specific antibody toward LPO and no cross-reaction was observed against ${\alpha}$-lactalbumin, ${\beta}$-lactoglobulin, casein, and lysozyme in double immunodiffusion test and ELISA test. In indirect ELISA method, coating concentration of LPO and dilution rate of anti-LPO IgY was 0.25$\mu\textrm{g}$/mL and 1:8,000 respectively. Sensitivity in the standard curve of LPO was ranged from 0.01 to 1$\mu\textrm{g}$/mL using anti-LPO IgY.
Kim, Yesol;Shukla, Shruti;Ahmed, Maruf;Son, Seokmin;Kim, Myunghee;Oh, Sejong
Food Science of Animal Resources
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v.32
no.6
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pp.706-712
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2012
The present study was aimed to produce a chicken polyclonal antibody against Cronobacter muytjensii and to develop an immunoassay for its detection. Purification of anti-C. muytjensii IgY from egg yolk was accomplished using various methods such as water dilution and salt precipitation. As a result, sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis produced two bands around 30 and 66 kDa, corresponding to a light and a heavy chain, respectively. Indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay (IC-ELISA) was performed to determine the effectiveness of the chicken IgY against C. muytjensii. The optimum conditions for detecting C. muytjensii by indirect ELISA and checkerboard titration of the antigen revealed an optimum average absorbance at the concentration of 18 ${\mu}g/mL$, having ca. $10^8$ coated cells per well. The anti-C. muytjensii IgY antibody had high specificity for C. muytjensii and low cross-reactivity with other tested pathogens. In this assay, no cross-reactivity was observed with the other genera of pathogenic bacteria including Escherichia coli O157:H7, Salmonella Typhimurium, Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Enterobacter aerogenes, Salmonella Enteritidis and Listeria monocytogenes. In addition, detection of C. muytjensii in infant formula powder showed a low matrix effect on the detection curve of IC-ELISA for C. muytjensii, with similar detection limit of $10^5$ CFU/mL as shown in standard curve. These findings demonstrate that the developed method is able to detect C. muytjensii in infant formula powder. Due to the stable antibody supply without sacrificing animals, this IgY can have wide applications for the rapid and accurate detection of C. muytjensii in dairy foods samples.
Purpose: To evaluate the clinical and microbiological effects of the local use of egg yolk immunoglobulin against Porphyromonas gingivalis (anti-P.g. IgY) as an adjunct to scaling and root planing (SRP) in the treatment of moderate to severe chronic periodontitis. Methods: This was a randomized, placebo-controlled, double-blind trial involving 60 systematically healthy patients with moderate to severe chronic periodontitis. Subjects (n=20/group) were randomly assigned to receive SRP combined with subgingival irrigation of anti-P.g. IgY and anti-P.g. IgY mouthwash, subgingival irrigation of 0.2% chlorhexidine and 0.2% chlorhexidine mouthwash, or subgingival irrigation of placebo and placebo mouthwash for 4 weeks. Probing pocket depth, clinical attachment level, bleeding on probing, and the plaque index were evaluated at baseline and at 4 weeks. Subgingival plaque, gingival crevicular fluid, and saliva were simultaneously collected for microbiological analysis. Results: Our results showed that anti-P.g. IgY mouthwash was as effective as chlorhexidine at improving clinical parameters over a 4-week period. All the groups showed a significant reduction in levels of P.g. at 4 weeks. No significant difference was observed in the test group when compared to placebo regarding the reduction in the levels of P.g. Anti-P.g. IgY significantly suppressed the numbers of red complex bacteria (RCB) in subgingival plaque and saliva in comparison with placebo. No adverse effects were reported in any of the subjects. Conclusions: Within the limitations of the study, the present investigation showed that passive immunization with anti-P.g. IgY may prove to be effective in the treatment of chronic periodontitis due to its ability to improve clinical parameters and to reduce RCB. No significant differences were found between the anti-P.g. IgY and placebo groups in the reduction of P.g.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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