Different kinds of cytokinins and auxins were tested for both shoot induction and rooting in a rare species, Abeliophyllum distichum Nakai. BA in WPM medium was the most effective in shoot induction, whereas zeatin seemed to be the most suitable for shoot elongation. Kinetin, at the concentration of 2.0~5.0 mg/L showed an effect in shoot induction, but the effect was inferior to BA and zeatin. Rapid shoot elongation could be achieved when the cultures were maintained on the diffuse light condition (below 500 lux) regardless of cytokinin treatments. For in vitro rooting, IBA was investigated as the best type of auxin tested when half strength GD medium was incorporated. The frequency of rooting using the plant growth regulator and medium just mentioned above was revealed as approximately 90%. In addition, the survival rate of rooted plantlets was almost 100% in an artificial soil mixture.
When the leaves, roots and stem segments of seedling of Polygonatum odoratum were cultured on Murashige and Skoog medium with 2.0mg/l BAP, stem segments were the most efficient explants for adventitious shoot inductino. To observe the efficient combination of growth regulators on the adventitious shoot formation , stem segments were cultured on MS medium with various kinds of cytokinins (BAP, kinetin, zeatin). From this experiment, cytokinin treatement was prerequisite for theadventitious shoot formatino,especially BAP was the most effective. Auxin (NAA or IBA) in combination with cyotokinin highly enhanced the adventitious shoot formation. Twenty five percents of explants produced the adventitious shoots on medium with 2.0mg/l BAP solely, while 83% of explants produced the adventitious shoots on medium with 2.0mg/l BAP and 0.1mg/l IBA. Root formationform adventitious shoot was promoted after transfer to 1/2 MS medium supplemented with 0.1mg/l IBA and 0.5mg/l zeatin, thereafter the plantlets with shoots and roots were cultured on 1/2MS medium lacking growth regulators. When the stem segments were cultured to MS medium with 1.0mg/l 2,4 NAA and IBA , yellow and nodulous cali were formed from the stem segments which were developed into adventitious roots. These roots were actively grew after transferred to MS liquid medium lacking growth regulators.
Tran Trung Chanh;Nguyen Tan Huy;Nguyen Thu Ha;Khanh Le;Nguyen Huu Hoang
Journal of Plant Biotechnology
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v.50
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pp.108-114
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2023
In vitro conservation is one of the most effective strategies for rare plant protection, especially for orchid species. To maximize the success rates of in vitro explant establishment (stage I) in conservation programs, the application of tissue culture additives such as Plant Preservative MixtureTM (PPMTM) should be emphasized. In this study, we used Dendrobium thyrsiflorum Rchb.f. (1875) seeds and seedlings as a model for the evaluation of PPMTM's phytotoxicity in the meristematic tissues of epiphytic orchids. PPMTM had no observable inhibitory effect on protocorm, shoot, or root development when it was supplemented at 0.1%. PPMTM supplementation caused adverse effects on D. thyrsiflorum explants at concentrations > 0.2%. At high concentrations, young in vitro seedlings showed damage, especially at the root tissue level. Based on this model, supplementation of 0.1-0.2% PPMTM to culture media was successfully implemented to establish in vitro cultures of other rare orchid species in our conservation program.
This study was conducted to establish practical micropropagation of jujube cultivars ('Geumsumg', 'Bokjo') by axillary bud culture. The results are summerized as follows : 1. Addition of activated charcoal to half-strength Murashige and Skoog(MS) medium supplemented with 0.5mg/l benzylaminopurine(BAP) enhanced shoot and root growth. At 500mg/l activated charcoal level 'Geumsung' showed best result, and shoot length and the number of multiple shoot were 6.4cm and 10.0, respectively. At 1,000mg/l activated charcoal level 'Bokjo showed best result, and shoot length and the number of multiple shoot were 7.5cm and 12.4, respectively. 2. As indole-3-butyric acid(IBA) concentration increased, rooting and callus growth of microshoot were enhanced. The optimum IBA concentration for shoot elongation and multiplication was 1.0mg/l. 3. Growth responses of shoot-tip and axillary bud segments between two jujube cultivars were different. 'Geumsung' showed that axillary bud explants were about twice better than shoot-tip explants for shoot multiplication, but 'Bokjo' showed that shoot-tip explants mere better than axillary bud explants for shoot elongation and multiplication. 4. In acclimatization processes of plantlets produced in vitro, the survival of plantlets with only root primordia in soil medium was better than that of plantlets with several routs resulting in 97.8%. 5. In cutting of in vitro-derived microshoot, paclobutrazol was more effective than IBA, naphth-aleneacetic acid(NAA) and $Rooton^{(R)}$ in rooting and root growth.
In order to develop an efficient micropropagation technique for an endangered species, Stellera rosea N., stem node cultures were conducted on MS medium supplemented with cytokinins. Generally, BA was better than zeatin on shoot proliferation from stem nodes, whereas zeatin showed more effective on shoot elongation. In vitro rooting of shoots was achieved by application of an auxin pre-culturing method. Overall rooting rate was relatively low and differed depending on the culture period. Pre-culturing of shoots for 15 days at 1.0mg/L IBA revealed a slightly better rooting efficiency reaching 30% rooting rate than NAA. Root induction rate by NAA also varied with concentration of NAA and culture periods. Total 51% of the rooted plantlets survived on artificial soil mixture and grew normally without any distinct morphological variation. The results suggest that the endangered Stetllera plants are propagated via in vitro culture system, but still need to more study for the improvement of rooting and acclimatization of the plantlets in soil.
Lee, Na Nyum;Kim, Ji-Ah;Kim, Yong-Wook;Choi, Yong Eui;Moon, Heung Kyu
Journal of Plant Biotechnology
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v.42
no.3
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pp.228-234
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2015
Using either the apical or axillary bud of the endangered species Abeliophyllum distichum Nakai, we tested the effect of bud position and culture method on shoot proliferation and rooting. In shoot proliferation, the axillary bud explant was more effective than the apical bud and the effect was fostered by BA treatment, whereas no differences were observed in shoot elongation by the explant position. Spontaneous rooting was observed in the MS basal medium and resulted in conspicuous differences in the explant position : more than 80% in apical bud explant and 28% in axillary bud explant was achieved, respectively. The positional effects were also observed in BA pre-treatments: generally vertical culture method appeared to be better in shoot proliferation, growth, and rooting than that of the horizontal culture method regardless of the BA pre-treatment duration. The highest shoot multiplication was achieved through the vertical culture method with axillary bud explant, whereas the best shoot elongation and rooting was obtained using the vertical culture method with the apical bud explant. Apical bud explant was superior to axillary bud explant in ex vitro micro-cuttings and revealed a significant difference in shoot growth and root development. The above results suggest that explant position and culture method influence the efficiency of micropropagation for a rare and endangered plant Abeliophyllum distichum.
A series of studies were carried out to establish micropropagation system, using airlift bioreactors (ebb $\varepsilon$ flood type, 5 L), of Lilium oriental hybrid 'Casa Blanca'. The bulblets with swollen basal plate were formed from bulb scales, then proliferated to bulblet clusters with swollen basal plate. Finally normal bulblets were formed from the sections. Bulblet formation and proliferation with swollen basal plate were not accomplished entirely in liquid culture of 5 L airlift bioreactors, but leafy bulb scales grew vigorously. Bulblet clusters with swollen basal plate were proliferated by periodic immersion culture. Bulblet proliferation was not affected by light, but scale leaves grew under light. MS medium containing 2.0 mg/L benzyl adenine (BA) and 0.3 mg/L indole acetic acid (IAA) was favorable to the bulblet proliferation with swollen basal plate. In liquid culture of 5 L bioreactors, bulblets from bulblet sections with swollen basal plate grew vigorously on MS medium with 70 g/L sucrose. It was effective for bulblet growth to replace the new medium after 8 weeks in culture during 16 weeks of cultural period. 15 g injection of bulblet sections as a cultural material was suitable for bulblet growth in 5 L bioreactors.
Present study describes a method on the application of efficient tissue culture systems for the micro-propagation of juvenile and mature sawtooth oak(Quercus acutissima). Nodal segments with axillary buds were used as initial explant sources. WPM(Woody Plant Medium) was the best in growth and proliferation of shoot among the media tested. Although the single effect of zeatin revealed on two dorminant shoot elongation with normal growth until the elevation of levels up to 3.0mg/l, BAP($N^6$-benzyl amino purine) usually showed better response than zeatin on shoot multiplication and/or elongation. In addition, the incorporation of BAP and zeatin onto the culture media represents more effectiveness in shoot proliferation and its growth. Optimum concentrations of BAP and zeatin were 0.5 and 0.05~1.0mg/l, respectively. Ninety percent of the proliferated shoots was rooted on half-strength GD (Gresshoff and Doy, 1972) medium containing 0.5mg/l IBA(indole butyric acid) in 4 weeks after culture. More than 70% of the rooted plantlets survived after 5 months of transplanting into artificial soil mix containing equal amount of peatmoss and perlite. Among 27 plus tree clones which were grafted twice onto the juvenile rootstocks, only 4 clones revealed the possibility for shoot multiplication through tissue culture system. The capacity for the micropropagation using mature explant sources was highly depended on clonal differences compared with those of octet age. More than 90% of rooting ratio was obtained from the best responding clone. Among the 7 rooting media tested, GD medium was the best far rooting. The most effective rooting was obtained on half-strength GD medium containing 0.2 to 2.0mg/l IBA. More than 60% of rooted plantlets survived after 5 months of transplanting into the artificial soil mix.
To establish rapid micropropagation through organogenesis from apices-derived callus or direct adventitious shoot of three calla lily cultivars(Zantedeschia spp, cv. Sunlight, cv. Chiante, cv. Pink Persuation) were cultured on Murashige and Skoog medium supplemented with different plant growth regulators. The formation rate of callus, organogenesis and in viかo tuber production among the three cultivars were tested. Callus was obtained from cvs. Sunlight, Chiante and Pink Persuasion; the best cultivar was Sunlight. Sunlight induced $53.3\%$ callus and Chiante had the highest rate of $56.7\%$ direct shoot regeneration on medium with 2.0 mg/L BA. Regeneration frequencies ranged from 20 to $70\%$ on medium with 2.0-3.0 mg/L BA. The highest percentage of regeneration and the greatest number of shoots were obtained on medium containing 3.0 mg/L BA in three cultivars. Cytokinins induced multiple shoot formation; 1.0 mg/L of 2ip, 5.0 mg/L of BA, and 1.0 m/L of BA induced 16, 14 and 12 multiple shoots in cvs. Sunlight, Chiante and Pink Persuasion, respectivly. 1.0 mg/L of IAA enhanced root growth in cvs. Sunlight and Chiante while cv. Pink Persuasion exhibited enhanced root growth at 2.0 mg/L of IBA. NAA, however, induced no change in root growth. The addition of 90 g/L sucrose enhanced in vitro tuber formation and following tuber expansion in cv. Sunlight, while 70 g/L of sucrose was effective in cvs. Chiante and Pink Persuasion.
This study was carried out to determine the optimal medium composition and growth regulators for the micropropagation of Platycodon grandiflorum (Jacq.) A. DC. Nodes containing yellow green petals were used as plant materials to execute the study. The best performance of adventitious root development was found in 1/4 strength of MS basal salt and the growth was satisfactory in the concentration of 1/2 MS medium. The best condition for adventitious root development and growth was observed in the higher concentration (5%) of sucrose and activated charcoal free 1/4MS medium respectively. Adventitious roots were developed at the controlled culture medium at pH 4.8 with a tendency of suppression with higher levels of pH. However, it was prevailed that the development and growth depended on the concentration of agar. The lower concentration of agar (0.4%) was performed better than that of higher concentration (1.2%), whereas the agar concentration (0.4%) showed the best performance for the development and growth of adventitious roots. For the development of shoots containing node, BA combined with IAA was more effective than kinetin with IAA or NAA. The highest shoot development (3.9 shoots per explant) was performed on MS medium supplemented with 0.1 mg/L BA and 0.5 mg/L IAA.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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