Rhodococcus erythropolis amidase was expressed in Escherichia coli cells. The crude amidase in the cell-free extract was immobilized using the cross-linked enzyme aggregate (CLEA) method. The crude amidase was mixed with bovine serum albumin and then precipitated with ammonium sulfate. The resultant precipitant was subsequently cross-linked with glutaraldehyde. Scanning electron microscopy revealed that this co-CLEA had a ball-like shape with a diameter of approximately $1\;{\mu}m$. This co-CLEA evidenced hydrolytic activity toward a variety of amide substrates. The amidase co-CLEA evidenced an optimum temperature of $60^{\circ}C$ and an optimum pH of 8.0, results that were similar to those of the soluble amidase. The reaction stability of the co-CLEA was increased. That is, it was stable up to $50^{\circ}C$ and in a pH range of 5.0-12.0. Additionally, the co-CLEA could be recovered by centrifugation, and retained 96% activity after 3 repeated cycles. This amidase co-CLEA may prove useful as a substitute for soluble amidase as a biocatalyst in the pharmaceutical and chemical industries.
Three-dimensional quantitative structure-activity relationship (3D-QSAR) studies on 59 cinnamaldehyde analogues as Farnesyl Protein Transferase (FPTase) inhibitors were investigated using comparative molecular field analysis (CoMFA) with the PLS region-focusing method. Forty-nine training set inhibitors were used for CoMFA with two different grid spacings, $2{\AA}\;and\;1{\AA}$ Ten compounds, which were not used in model generation, were used to validate the CoMFA models. After the PLS analysis, the best predictive CoMFA model showed that the cross-validated value $(r^2_{cv})$ and the non-cross validated conventional value$(r^2_{ncv})$ are 0.557 and 0.950, respectively. From the CoMFA contour maps, the steric and electrostatic properties of cinnamaldehyde analogues can be identified and verified.
Hamed, Moaz M.;Abdrabo, Mohamed A.A.;Youssif, Asmaa M.
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.49
no.3
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pp.356-366
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2021
Two marine actinobacterial isolates, RG3 and RG8, were identified using 16Sr DNA as Streptomyces althioticus RG3 and Streptomyces californicus RG8 and submitted to the database of genetic information with accession numbers MW661230 and MW661234, respectively; they were found to have emulsification indexes of 60 ± 2.5% and 53 ± 2.2%, respectively. The biosurfactants obtained were stable at a temperature of 35℃ for both strains; they were stable at 10% NaCl, in the case of S. althioticus RG3 and at 10-15% NaCl in the case of Str.californicus RG8; both strains produced the most biosurfactant when exposed to alkaline conditions. We characterized the biosurfactants, including features such as their chemical composition, using Fourier transform infrared spectroscopy analysis. The antimicrobial activity of the biosurfactant extracts was evaluated using the well diffusion method against Vibrio alginolyticus MK170250, Escherichia coli ATCC 8739, Pseudomonas aeruginosa ATCC 4027, and Staphylococcus aureus ATCC 25923. S. althioticus RG3 biosurfactants were found to have better antimicrobial activity than those of Str. californicus RG8, indicating that they may be used in pharmaceutical industries and in the manufacture of antifouling products.
We have carried out collaborative study to evaluate a preparation of antithrombin concentrate whether or not it was suitable to serve as the candidate for a Korea National Biological Standard. Six laboratories. including three manufacturers and three National Control Laboratories. participated in this study. The potency of this candidate preparation was determined using the heparin cofactor chromogenic method. (omitted)
Viruses have various applications in the biopharmaceutical industry. They are used in pesticide production, production of vaccines, gene transfers, cancer therapeutics, and more. The downstream processing of viruses is an essential step for their biological and pharmaceutical applications. Among the various processes, the purification of viruses is critical. Membrane chromatography plays a vital role in this process. While ion exchange membrane chromatography is a primarily used method, it has various limitations regarding size exclusion and insufficient purification. Also, it cannot be applied to the rapidly changing strains of viruses such as influenza. This review examines various improved methods of membrane chromatography or alternatives. It focuses on purification, viral recovery rates, and scalability of the methods.
Kim, Hye Soo;Park, Hyun Young;Lee, Chan-Jung;Kong, Won-Sik;Cho, Soo Jeong
Journal of Mushroom
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v.15
no.4
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pp.249-253
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2017
Twelve strains of bacteria with cellulase and xylanase activities were isolated from spent mushroom substrates collected from button mushroom cultivation farm, Buye, Chungcheongnam-do in Korea. Among them, one strain, designated NO12, with higher cellulase and xylanase activities was selected by agar diffusion method. The strain NO12 was identified to be a Bacillus sp. by biochemical characteristics using Bacillus ID kit and MicroLog system. Comparative 16S rDNA gene sequence analysis showed that strain NO12 formed a distinct phylogenetic tree within the genus Bacillus and was most closely related to Bacillus subtilis with 16S rDNA gene sequence similarity of 99.2%. Based on its physiological properties, biochemical characteristics, and phylogenetic distinctiveness, strain NO12 was classified within the genus Bacillus, for which the name Bacillus subtilis NO12 was proposed. The cellulase and xylanase activities of B. subtilis NO12 were slightly increased according to bacterial population from exponential phase to stationary phase in the growth curve for B. subtilis NO12. The xylanase activity continuously increased from the beginning of the exponential phase and exhibited maximum activity in the middle of the exponential phase.
Kim, Hye Soo;Kim, Chul Hwan;Kwon, Hyun Sook;Lee, Chan-Jung;Kong, Won-Sik;Cho, Soo Jeong
Journal of Mushroom
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v.13
no.4
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pp.305-309
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2015
In order to isolate compost-promoting bacteria with high activity of cellulase and xylanase, spent mushroom substrates with sawdust were collected from mushroom cultivation farm, Jinju, Gyeongnam in Korea. Among of the isolates, one strain, designated CA105 was selected by agar diffusion method. The strain CA105 was identified as members of the Bacillus subtilis by biochemical characteristics using VITEK 2 system. Comparative 16S rRNA gene sequence analysis showed that isolate CA105 formed a distinct phylogenetic tree within the genus Bacillus and was most closely related to Bacillus subtilis with 16S rRNA gene sequence similarity of 98.9%. On the basis of its physiological properties, biochemical characteristics and phylogenetic distinctiveness, isolate CA105 was classified within the genus Bacillus subtilis, for which the name Bacillus subtilis CA105 is proposed. The cellulase and xylanase activity of B. subtilis CA105 was slightly increased according to bacterial population from exponential phase to stationary phase in growth curve for Bacillus sp. CA105.
Journal of the Korean Applied Science and Technology
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v.29
no.3
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pp.443-449
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2012
A investigation of electrochemical analysis of antibiotics Neomycin ($C_{23}H_{46}N_6O_{13}$) was searched using electrochemical square wave (SW) stripping and cyclic voltammetry (CV) using working sensor of the modified carbon nanotube combination electrodes, optimum diagnostic parameters were searched by anodic stripping, final conditions were attained to working range of 1.0-14.0 ng/L, detection limit (S/N) was found to be 0.6 ng/L. The developed method was discovered to be fitting in quality control in the food, pharmaceutical and other manufacturing sectors.
Objective: To study potential targets of Danshensu via dual inverse docking. Method: PharmMapper and idTarget servers were used as tools, and the results were checked with the molecular docking program autodock vina in PyRx 0.8. Result: The disease-related target HRas was rated top, with a pharmacophore model matching well the molecular features of Danshensu. In addition, docking results indicated that the complex was also matched in terms of structure, H-bonds, and hydrophobicity. Conclusion: Dual inverse docking indicates that HRas may be a potential anticancer target of Danshensu. This approach can provide useful information for studying pharmacological effects of agents of interest.
Sipjundaebo-tang was a well-known restorative traditional herbal prescription that used to treat anemia, anorexia, fatigue and inflammation. In this study, we examined the bioconversion of compounds in the Sipjundaebo-tang (SJ) and fermented Sipjundaebo-tang with Lactobacillus fermentum KFRI 164 (FSJ) using established HPLC-DAD method. The chromatogram of FSJ has shown that the contents of six bioactive compounds 5-HMF, paeoniflorin, ferulic acid, cinnam aldehyde, decursin, glycyrrhizin in SJ has decreased. And the contents of unknown compounds (1), (2), (3), (4) and (5) in FSJ were higher than each contents of SJ. The antioxidant activities of SJ and FSJ were conducted by DPPH free radical and Hydrogen peroxide ($H_2O_2$) scavenging assay. Electron donating activity (EDA, %) value of FSJ has shown higher than 21.9% and 14.5% at a concentration of 0.5 mg/ml for DPPH radical scavenging activity and $H_2O_2$ scavenging activity, respectively. Also, the neuroprotective activities of SJ and FSJ against glutamate-induced oxidative stress in a mouse hippocampal cell line (HT22) were evaluated by MTT assay. As a result, FSJ has shown higher neuroprotective activity than 56.5% comparing with SJ. In conclusion, the fermented SJ using microorganism could convert compounds in SJ and enhance antioxidant activity and neuroprotective activity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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