Two initial models of cold-adapted lipase PsLip1 have been constructed, based on homology with the bacterial lipases Chromobacterium viscosum (CvLip) and Pseudomonas cepacia (PcLip), whose X-ray structures have been solved and refined to high resolution. The mature polypeptide chains of these lipases have 84% similarity. The models of Mod1 and Mod2 have been compared with the tertiary structures of CvLip and PcLip, respectively, and analyzed in terms of stabilizing interactions. Several structural aspects that are believed to contribute to protein stability have been compared: the number of conserved salt bridges, aromatic interactions, hydrogen bonds, helix capping, and disulfide bridges. The 3-dimensional structural model of PsLip1 has been constructed in order to elucidate the structural reasons for the decreased thermostability of the enzyme in comparison with its mesophilic counterparts.
The biological effects of heating and chemical treatment on castor meal were investigated in order to develop a procedure to inactivate its antigenic activity in a way that is suitable for industrial applications. A 1% solution of purified castor bean allergen (CB-1A) was heat-treated with or without exposure to NaOH and NaOCI (250 ppm each). CB-1A exhibited extreme stability when heat-treated alone. In the presence of NaOH and NaOCl, CB-1A showed a drastic decrease in antigenic activity as the temperature surpassed the critical level of $70^{\circ}C$. The gradual disappearance of disc gel electrophoresis bands presumably responsible for the allergenicity of CB-1A, along with the significant losses of the amino acids phenylalanine, methionine, arginine, histidine, and cysteine correlated with the loss of CB-1A activity. CB-1A showed a single symmetrical band in SDS acrylamide gel electrophoresis with an estimated molecular weight of 6,000 daltons. The chemical and heat treatments reduced the disulfide bond content of CB-1A by 9.1% with a coincident increase in sulfhydryl bonds.
결빙방지 단백질(Antifreeze protein, AFP)은 얼음 결정에 결합하여 결정의 성장을 억제한다. AFP는 영하의 환경에서 서식하는 생물체의 생존에 필수적이다. 겨울 넙치에서 분리된 type I AFP (AFP37)는 37 개의 잔기를 가진 ${\alpha}$-나선 구조의 펩타이드이다. 본 연구에서는 활성과 수용성이 높은 짧은 AFP 조각을 개발하고자 시도하였다. 아미노-말단 15, 21 잔기의 AFP15와 21를 설계 및 합성하였다. 이들 펩타이드의 아미노-말단에 CGG를 도입한 AFP15N and 21N을 합성하고 이황화 결합을 유도함으로써 이량체 펩타이드인dAFP15N과dAFP21N을 합성하였다. 이들의 나선 함량과 결빙방지 활성을 circular dichroism (CD) 분광법과 나노리터 삼투압계로 각각 측정하였다. 합성된 펩타이드 AFP15 AFP21, AFP15N, AFP21N, dAFP15N, dAFP21N의 나선 구조 함량은 대조구인 AFP37의 49, 41, 23.8, 28, 47.9, 51.7% 수준을 보였다. 이들의 결빙방지 활성은 AFP37의 13, 7, 0.05, 5.6, 13, 11%로 나타났다. 예상과는 달리 이량체화된 펩타이드는 단량체와 비슷한 결빙방지 활성을 보였다. 이는 이량체 펩타이드가 하나의 펩타이드로 얼음과 결합하기 보다 두 개의 개별적 펩타이드로 작용함으로써 단량체와 같은 활성을 보인 것으로 생각된다. 또한 펩타이드들에 의한 별 모양의 얼음 결정 형성은 펩타이드와 얼음의 약한 결합을 시사한다.
모발은 여러 가지 아미노산들을 포함하는 단백질로 이루어져 있다. 자외선(UV)은 태양광선중에서 모발손상에 가장 큰 영향을 미치며 모발 노화에 주된 역할을 한다. 본 연구의 목적은 전자현미경(SEM), 공초점현미경(CLSM) 및 적외선 현미경분광법(IR micro spectroscopy)을 이용하여 정상모발에 UVB를 조사한 후 특징적인 형태학적 및 화학적 구조변화를 알아보는 것이다. 에너지 분산형 X선 분광기가 부착된 전자현미경은 자외선 조사모발의 표면이 정상모발과 비교했을 때 거칠고 높은 산소원소의 함량을 보였다. 형광 및 3차원 위상 이미지를 CLSM으로 분석한 결과 정상모발의 초록색 형광방출이 UVB 조사모발에 비해 매우 높았다. 또한 fluorescamine 형광 염색법을 통해 UVB 조사모발은 정상모발에 비해 펩타이드 결합의 파괴로 생성된 자유 아미노기가 많음을 확인할 수 있었다. UVB 조사모발의 강한 푸른색 형광은 아미노기의 함량이 높다는 것을 의미하며, 이는 CLSM에서도 관찰되었다. 따라서 fluorescamine은 UVB 조사모발에서 펩타이드 결합의 파괴를 관찰하는데 유용한 도구가 될 수 있다. 정상모발과 UVB 조사모발의 단면을 IR micro-spectroscopy를 통해 이미지 맵핑(mapping)한 결과, UVB 조사모발은 정상 모발에 비해 모발의 표면은 물론 내부에 걸쳐 디설파이드 결합(disulfide bond)의 산화가 일어나고 있음을 확인할 수 있었다. 이러한 분광학적 방법은 단독 또는 다른 분석법과 함께 모발화장품의 개발에 응용될 수 있을 것이다.
In the study presented here, identification, purification, and partial characterization of a hemin-regulated protein in Prevotella nigrescens were carried out. The results of this study confirm that the availability of hemin influences the expression of a selected membrane protein as well as the growth rate of P. nigrescens ATCC 33563. The 50 kDa cell envelope associated protein, whose expression is hemin regulated, is considered to be a putative hemin-binding protein from P. nigrescens. Disulfide bonds were not present in this protein, and N'-terminal amino acid sequence analysis revealed that this protein belongs to a new, so far undescribed protein. The 50 kDa protein was found to be rich in hydrophilic amino acids, with glycine comprising approximately 60% of the total amino acids. The study described here is the first to identify, purify, and biochemically characterize a putative hemin-binding protein from P. nigrescens. Work is in progress to further characterize the molecular structure of this protein.
Bovine aortic endothelial cells(BAEC) produce two variant forms of laminin with a subunit composition of AB1B2 and A'B1B2. Analyses of the intracellular assembly of these subunits revealed that the B1B2 dimer formed first, and that A or A' joined to form the AB1B2 or A'B1B2 trimer. Angiostatic steroids shifted the relative size of the A and A' monomer pool in BAEC, and competition between the A and A' subunits in joining the B1B2 dimer produced AB1B2 and A'B1B2 in different ratios. This result suggests that subunit replacement is the general mechanism for producing laminin variants by various cells for tissue morphogenesis. When laminin subunits in BAEC were cross-linked with dithio-bis-succinimidylpropionate(DSP) and immunoprecipitated with anti-Iaminin antiserum, monomeric A,A',B1 and B2 monomers and the B1B2 dimer migrated as extremely large molecules in sodium dodecyl sulfate gel electrophoresis under nonreducing conditions. When the crosslinking disulfide bonds were cleaved under reducing conditions, they migrated as the usual subunits. This result suggests that molecular chaperones were involved in the process of the assembly and replacement of laminin subunits.
Background: Liver-expressed antimicrobial peptide-2 (LEAP-2) is an important component of innate immune system in teleosts. In order to understand isoform-specific involvement and regulation of LEAP-2 genes in mud loach (Misgurnus mizolepis, Cypriniformes), a commercially important food fish, this study was aimed to characterize gene structure and expression characteristics of two paralog LEAP-2 isoforms. Results: Mud loach LEAP-2 isoforms (LEAP-2A and LEAP-2B) showed conserved features in the core structure of mature peptides characterized by four Cys residues to form two disulfide bonds. The two paralog isoforms represented a tripartite genomic organization, known as a common structure of vertebrate LEAP-2 genes. Bioinformatic analysis predicted various transcription factor binding motifs in the 5'-flanking regions of mud loach LEAP-2 genes with regard to development and immune response. Mud loach LEAP-2A and LEAP-2B isoforms exhibited different tissue expression patterns and were developmentally regulated. Both isoforms are rapidly modulated toward upregulation during bacterial challenge in an isoform and/or tissue-dependent fashion. Conclusion: Both LEAP-2 isoforms play protective roles not only in embryonic and larval development but also in early immune response to bacterial invasion in mud loach. The regulation pattern of the two isoform genes under basal and stimulated conditions would be isoform-specific, suggestive of a certain degree of functional divergence between isoforms in innate immune system in this species.
To elucidate structure of group "a" epitope, mouse antibodies that express idiotype monoclonal antibody and anti-idiotype monoclonal antibody against the group specific "a" determinant were purified by hydroxyapatite column. To obtain hepatitis B surface antigens (HBsAg). HBsAg positive blood was sequencially purified by ammonium sulfate precipitation, hydroxyapatite, sepharose 4B column chromatography and ultracentrifugation. The major protein (p25) and glycoprotein (gp30) of HBsAg were isolated by concanavalin-A-sepharose 4B. The ability of p25-gp30 among the HBsAg to inhibit the idiotype-anti-idiotype reaction was dependent on conformation, since reduced and alkylated p25-gp30 virtualy lost their inhibitory capacity when compared to native HBsAg. The data suggest that hepatitis B antigen is a conformational antigen critically dependent upon the disulfide bonds of p25-gp30.
Two neuropeptides were purified from the acidified tube feet extract of the starfish Asterias amurensis by C18 reversed phase and size-exclusion high-performance liquid chromatography (HPLC). The tube feet extract and the purified peptides (AST-I and AST-II) showed potent contractile activity on dorsal retractor muscle (DRM) of the starfish Asterina pectinifera and intestine (smooth muscle) of the panther puffer Takifugu pardalis. Treatment of the purified peptides with dithiothreitol (DTT) for 60 min at $37^{\circ}C$ significantly altered their retention times, suggesting that these compounds contained disulfide bonds. The molecular weights of AST-I and AST-II were determined to be 2064.2 Da and 6137.2 Da, respectively, by MALDI-TOF mass spectrometry.
The nucleocapsid(NP) protein of Newcastle disease virus (NDV) and its derivative (NP$\sub$cfus)containing the myc region and six histidine residues fused to its C-terminus were pcpressed aboundantly in Escherichia coli. The proteins were purified by sucrose gradient centrifugation. Both the NP and NP$\sub$cfus/ proteins self-assem- bled into ring-like particles stacked together to from nucleocapsid-like structure which are heterogeneous in length with a diameter of 20${\pm}$2 nm and central holow of 5${\pm}$1 nm. Only a very small amount of the monomers in the particles was linked by inter-molecular disulfide bonds. Fusion of the C-terminal end to 29 amino acids inclusive of the myc epitope and His tag did not impair ring assembly buy inhibited the formation of the long herringbone structures. Immunogold lableing of the particles with the anti-myc antibody showed that the C-terminus of the NP$\sub$cfus/ protein is exposed on the surface of these ring-like particles.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.