Two maize transposable elements, immobilized Ac (iAc) and Ds, have been introduced into the genome of a diploid potato clone (Solanum tuberosum Group Phureja clone 1.22). The iAc is a modified Ac that is supposed to be unable to transpose but is expected to trans-activate the transposition of a Ds that is unable to transpose by itself. When the leaf and stem explants of in vitro shoots of the clone 1.22 were inoculated with Agrobacterium tumefaciens strains harboring binary vectors containing the iAc and the Ds, calli were formed from the explants on media containing 50 mg/L of kanamycin, and shoots were regenerated from the calli. The regenerated shoots formed roots when cultured on media containing 100 mg/L of kanamycin, whereas untransformed shoots did not form roots on the same media. The PCR amplification of the DNA's from the transgenic plants confirmed that the iAc and the Ds elements were introduced into the potato genome of 1.22.
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.17
no.1
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pp.1-10
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1997
Unreduced (2n) gametes are meiotic products (pollen or egg) having a sporophytic (somatic) chromosome number, resulting from abnormalities during either microsporogenesis or megasporogenesis. They occur naturally at a low frequency in many plant species. Unreduced (2n) gametes in plants can be identified for four possible ways as follow i) pollen size and/or shape differences between haploid (n) and diploid (2n) pollen, ii) ploidy analysis (chromosome number) of progeny or meiotic analysis (presence of dyads andlor triads at the microspore stage), iii) progeny performance and fertility and iv) dosage of isozyme and DNA markers. Unreduced (2n) gametes can be an effective breeding tool in synthesizing new cultivars, providing a unique method to maximizing heterozygosity, i.e., transferring a large proportion of the non-additive genetic effects (intra- and inter- locus interactions) h m parent to offspring and can also be used to overcome infertility of interploidy crosses. Sexual polyploidization through 2n gametes has been a major route to the formation of naturally occurring polyploids. The three mechanisms of 2n pollen formation in potato have been discovered as follow: i) parallel spindles (ps) or tripolar spindles (ts), ii) premature cytokinesis (pc-I, pc-2) and iii) synaptic mutants (sy-2, sy-3, sy-4). Genetic analysis indicated that the mechanisms of 2n gamete formation were controlled by single recessive gene in potato, alfalfa, red clover, etc., and by two recessive genes in wheat. The use of 2n gametes which can efficiently transfer germplasm fiom wild relatives to cultivated species, especially fiom diploid to tetraploid could make a contribution to the improvement of germplasm base in breeding programs.
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2019.10a
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pp.25-25
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2019
Chromosome numbers and karyotypes in flowering plants have been considered to be prominent features in taxonomic and evolutionary context. Despite the increasing numbers of cytological studies in Asteraceae, karyotype analysis of Cirsium Mill. and Carddus L. in Korean population have not been performed carefully. In this study, the chromosome numbers and karyotype analysis of all eight species of the genus Cirsium Mill. and one species of Carddus L. were analyzed. While the chromosome number in Carduus crispus L. was diploid (2n = 2x = 18 or 18+2Bs) with x = 9 as the base chromosome number, all seven species of Cirsium were diploid with x = 17 except for Cirsium lineare (Thunb.) Sch. Bip. (x = 14). The chromosome number in C. pendulum Fisch. ex DC. presented 2n = 2x = 34 from two populations and C. lineare exhibited 2n = 2x = 28 from one population. Aneuploidy was occasionally found in C. japonicum Fisch. ex DC. var. spinossinum Kitam. (2n = 2x = 34, 35, 36), C. rhinoceros (H. $L{\acute{e}}v.$ & Vaniot) Nakai (2n = 2x = 32, 34), C. setidens (Dunn) Nakai (2n = 2x = 30, 31, 32) and C. vlassovianum Fisch. ex DC. (2n = 2x = 31, 32). While Cirsium japonicum Fisch. ex DC. var. japonicum possessed several B-chromosomes (2n = 2x = 34, 35, 36), polyploidy was only encountered in Cirsium nipponicum (Maxim.) Makino. (2n = 4x = 68) from two populations in Ulleung Island. The present cytological data might be contributed to the taxonomic and evolutionary studies in the genus Cirsium.
Triploids are a useful tool for biomass production and molecular breeding of trees with a long life span. Triploids of the poplar 'Hyunsasi' (Populus alba ${\times}$ P. glandulosa) have been developed by crossing between female diploids and a male tetraploid. The tetraploid was developed around the 1970s at Korea Forest Research Institute by colchicine-induced chromosome doubling. Seedlings of the $F_1$ generation were analyzed using flow cytometry to verify their ploidy status. The mean relative fluorescence index of 3 F1 poplars, labeled as Line- 1, Line-17, Line-18, were approximately 1.5 times higher than those of diploid poplars, and the results clearly indicated that they were triploids. The phenotype of the F1 poplars included larger leaves and thicker stem than diploids, and abnormal leaf morphology, especially in the triploid 'Line-18'. Three triploid lines developed roots more slowly and had less roots than diploid. However, 3 poplar cytotypes (2x, Line-1, Line-17) rooted within 10 days on MS medium. In contrast, compared with the 3 cytotypes, the Line-18 showed about 80% and 70% in the rooting rate and the number of roots. The triploid poplars could be directly utilized for biomass production and with their sterility, they could serve as basic material for genetic transformation. In addition, flow cytometric analysis proved to be an effective and reliable method for screening forest trees for their ploidy level.
Panax ginseng (Ginseng or Korean ginseng) is one of the most important medicinal herbs in the world. We made a high-quality whole genome sequence of P. ginseng using 'Chunpoong' cultivar, which is the first cultivar registered in Korea Seed and Variety Service (KSVS) with relatively similar genotypes and superior phenotypes, representing approximately 3 Gbp and 60,000 genes. Genome sequence analyses of P. ginseng and related speciesrevealed the origin of Korean ginseng and the ecological adaptation of 18 Panax species around the world. Korean ginseng and American ginseng (P. quinquefolius) are tetraploid species having 24 chromosome pairs, while the other 16 species are diploid species with 12 chromosome pairs. Panax and Aralia are the closest genera belonging to the Araliaceae family that diverged approximately 8 million years ago (MYA). All Panax species evolved as shade plants adapting to cool climates and low light conditions under the canopy of deep forests from Southeast Asia such as Vietnam to Northeast Asia such as Russia approximately 6 MYA. However, through recurrent ice ages and global warming, most diploid Panax species disappeared due to the freezing winter, while tetraploid P. ginseng may have appeared by allotetraploidization, which contributed to the adaptation to cold temperaturesin Northeast Asian countries including the Korea peninsula approximately 2 MYA. American ginseng evolved by the adaptation of P. ginseng in Northeast America after the intercontinental migration 1 MYA. Meanwhile, most of diploid Panax species survived in high-altitude mountains over 1,600 meters in Southeast Asia because they could not endure the hot temperature and freezing cold. The genome sequence provides good basisto unveil the origin and evolution of ginseng and also supports practical gene chips which is useful for breeding and the ginseng industry.
Background: The genus Panax in the Araliaceae family has been used as traditional medicinal plants worldwide and is known to biosynthesize ginsenosides and phytosterols. However, genetic variation between Panax species has influenced their biosynthetic pathways is not fully understood. Methods: Simultaneous analysis of transcriptomes and metabolomes obtained from adventitious roots of two tetraploid species (Panax ginseng and P. quinquefolius) and two diploid species (P. notoginseng and P. vietnamensis) revealed the diversity of their metabolites and related gene expression profiles. Results: The transcriptome analysis showed that 2,3-OXIDOSQUALENE CYCLASEs (OSCs) involved in phytosterol biosynthesis are upregulated in the diploid species, while the expression of OSCs contributing to ginsenoside biosynthesis is higher in the tetraploid species. In agreement with these results, the contents of dammarenediol-type ginsenosides were higher in the tetraploid species relative to the diploid species. Conclusion: These results suggest that a whole-genome duplication event has influenced the triterpene biosynthesis pathway in tetraploid Panax species during their evolution or ecological adaptation. This study provides a basis for further efforts to explore the genetic variation of the Panax genus.
M1 plants which were produced from seed soaking in chemical mutagen, EMS or NaN$_3$, appeared wide morphorogical variations such as dwarf, albino, twisted leaf, white streaked leaf, and purpled stem. In mutants of reproductive organs, there were monoecious plants such as female-flower plant and male-flower plant, multiple spikes, and steriled plants among M1 plants. Also, barren stalk was increased significantly in M1 plants. Ear bagging at ear initiation stage prevented seed set on cob in normal plants. In spite of ear bagging, M1 plants which had cobs with seed set was 3.9-11.2% of stalks developed from seeds soaking with mutagens, but only three or four kernels could be matured on a cob. Ear bagging after mutagen injection into initiating ear produced 5.1-10% in cobs with seed set, but only 1.7-6.3 kernels could be matured. Cobs removed silk at four hours after artificial pollination increased the rate of cobs with seed set to 27%. Microscopic observation confirmed that ontogeny of kernels matured from ear bagging and mutagen treatment would be both adventitious and diplosporous apomictic reproduction. Chromosome set of M2 seedling was found to be diploid type in chromosomal counting of root tip. As M$_2$ plants showed an uniform appearence within each lines and their CV of plant height were ranged 4-6% in each lines, we concluded that they were apomictic progeny. But we could not find any marker traits combined with apomixis.
Variation in ploidy level of regenerated plants from rice anthers and effective diploidization methods of haploid plants were studied to obtain basic information in rice breeding through anther culture. In a total of 574 plants derived from anther culture using 14F$_1$ hybrids as materials, there were 49.7% haploids, 48.6% diploids and 1.7% polyploids, respectively. The frequency of haploids in Japonica/Indica crosses was 60.6%, and that of Japonica/Japonica crosses was 43.0% in average. Inclusion of 2.4-D or NAA as phytohormone may increase the frequency of haploids, but kinetin may increase the frequency of diploids. The rate of auto-diploidization by tiller separation of haploid plants showed 8.2% in average. The rate of diploidization by leaf-sheath injection of colchicine showed 18.8% in average. Morphological characters of haploids plants showed that 64.6% in culm length, 63.4% in panicle length, 68% in flag leaf length, and 74.4% in flag leaf width compared to diploid plants. These apparent morphological differences will contribute to identify the ploidy of plants derived from rice anther culture.
Flow cytometry (FCM) was used to measure the ploidy level of three different sports from 'Campbell Early' ($Vitis$$labruscana$) grape. Results of the study showed different ploidy levels. FCM analysis for 'Campbell Early' grape which contains 2C DNA diploid cells showed single peak around 35-40 while 'Kyoho' grape with 4C DNA tetraploid cells had a different level of 70-80. However, analysis of the sports displayed a histogram with 2 peaks containing both 2C and 4C nuclei. There was no difference in histograms of 2C DNA flesh and pericarp; on the other hand, 4C DNA flesh type of sports had a different histogram from that of the 2C DNA pericarp. Chromosome numbers of diploid ('Campbell Early'), tetraploid ('Kyoho'), and three sports were counted under the microscope. 'Campbell Early' and 'Kyoho' have 38 and 76 chromosomes, respectively. Three different sports are mixoploids with mixtures of diploid and tetraploid cells. Microscopic observations of shoot apical meristems in sports from 'Campbell Early' grape were carried out to determine the type of plant chimera. 'Campbell Early' grape (diploid) and 'Kyoho' grape (tetraploid) showed that both had 2 tunica layers covering corpus cells, while the three different sports had tunica layers showing mostly oblique division. Most cells from 'Kyoho' grape were larger than 'Campbell Early' grape. Cells from L-2 and L-3 layers of the three sports were similar to 'Kyoho' grape in size, although all cells in L-1 surface layer were uniform in size like 'Campbell Early' grape. Results of FCM analysis indicated that both normal and polyploid cells could be intermixed in sports and could become mixoploidy consisting of diploid and tetraploid. All sports used in the tests were periclinal chimera plants with two distinct L-1 and L-2 cell layers. The result of this study suggests that all three sports which originated from 'Campbell Early' grape might be 2-4-4 type chimera formation.
The influences of the agitation as well as the addition of medium during culture on the production of embryos were invested in isolated microspore culture of hot pepper (Capsicum annuum L.). When the culture medium was added during initial liquid culture step of liquid-double layer culture, the embryo yield and quality greatly increased. The most effective time point for medium addition was 5 days after the culture commenced. On the other hand, the effect of medium addition at later double layer culture step in liquid-double layer culture on the embryo production was less compared to that of medium addition during the initial liquid culture step. Agitating the culture for 1 week during later double layer culture step in liquid-double layer culture effectively increased the production of normal cotyledonary embryos. In the case of liquid culture, agitating the culture for 1 week from 7 days after the culture commenced was also effective for embryo development. However, when the total agitation time was longer (2 to 3 weeks) during liquid-double layer culture or liquid culture, the embryos developed abnormally in both cases. The normal cotyledonary embryos obtained in this study successfully developed to plants when transferred to regeneration media. These regenerated plants were either diploid or haploid, and there was a difference in the number of chloroplasts between guard cells of diploid and haploid. These results can be used as an important data for developing an efficient microspore culture system with high quality embryo production in hot pepper.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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