Four diazinon-degrading bacteria were isolated from agricultural soil by using an enrichment technique. The biochemical analysis and molecular method including RFLP indicated that these isolates were identical, and one strain designated DI101 was selected for further study. Phylogenetic analysis based on 16S rDNA sequencing indicated that the strain DI101 clearly belongs to the Serratia marcescens group. The ability of the strain to utilize diazinon as a source of carbon and phosphorus was investigated under different culture conditions. The DI101 strain was able to completely degrade 50 mg/l diazinon in MSM within 11 days with a degradation rate of 0.226 $day^{-1}$. The inoculation of sterilized soil treated with 100 mg/kg of diazinon with $10^6$ CFU/g DI101 resulted in a faster degradation rate than was recorded in non-sterilized soil. The diazinon degradation rate by DI101 was efficient at temperatures from 25 to $30^{\circ}C$ and at pHs from 7.0 to 8.0. The degradation rate of diazinon was not affected by the absence of a phosphorus supplement, and addition of other carbon sources (glucose or succinate) resulted in the slowing down of the degradation rate. The maximum degradation rate ($V_{max}$) of diazinon was 0.292 $day^{-1}$ and its saturation constant ($K_s$) was 11 mg/l, as determined by a Michaelis-Menten curve. The strain was able to degrade diethylthiophosphate-containing organophosphates such as chlorpyrifos, coumaphos, parathion, and isazofos when provided as a source of carbon and phosphorus, but not ethoprophos, cadusafos, and fenamiphos. These results propose useful information for the potential application of the DI101 strain in bioremediation of pesticide-contaminated environments.
There has been increasing interest in studying the various effects of organophosphate insecticides in humans and experimental animals. Only a few data are available on the effect of the organophosphate insecticide, diazinon, on lipid metabolism. The aim of this study was to evaluate the effect of diazinon on plasma lipid constituents in mammalian animals. The plasma levels of total cholesterol (TC), high-density lipoprotein cholesterol (HDL-C), low-density lipoprotein cholesterol (LDL-C), triglycerides (TG), and phospholipids (PL) were measured in albino rats that were orally treated with a single dose of diazinon at a level of $LD_{50}$ or with repeated daily doses at the levels of $\frac{1}{2}$, $\frac{1}{8}$, and $\frac{1}{32}$$LD_{50}$ for 2, 8, and 32 days, respectively. After a 24 h post-treatment with a single $LD_{50}$ dose of diazinon, TC was not significantly changed, the HDL-C and PL levels were significantly decreased, but the LDL-C and TG levels were significantly increased. Separate daily oral administrations of diazinon at $\frac{1}{2}$$LD_{50}$, $\frac{1}{8}$$LD_{50}$, and $\frac{1}{32}$$LD_{50}$ doses resulted in a significant decrease in HDL-C and PL, with no significant change in TG. The LDL-C levels were significantly increased and TC showed no significant change with $\frac{1}{2}$$LD_{50}$ and $\frac{1}{32}$$LD_{50}$ doses of diazinon, whereas a significant decrease in the levels of TC, HDL-C, as well as LDL-C, was observed with the $\frac{1}{8}$$LD_{50}$ dose. These data suggest that diazinon may interfere with lipid metabolism in mammals.
Carbofuran (2,3-Dihydro-2,2-Dimethyl-benzofuranyl methyl carbamate)와 Diazinon (0,0-Diethyl-0-(2-isopropyl-4-methyl-6-pyrimidinyl) phosphorothioate)을 10:0, 9:1, 8:2, 7:3, 6:4, 5;5, 4:6, 3:7, 2:8, 1:9, 0:10의 비율로 혼합하여 거세미나방 3냉기유충의 가운데 가슴등판에 $1.0{\mu}l$씩 국소처리 하였을 때, 이들의 연합독작용을 평가하였다. Carbofuran Diazinon을 혼합하였을 경우 거세미 나방 3령기유충에 대해서 협력작용(Synergism)을 나타내었으며 Carbofuran과 Diazinon을 4.8 : 5.2의 비율로 혼합하였을 때 최대의 협력효과(Synergistic effect)를 얻을 수가 있었다.
Teratogenic effects of diazinon were assessed on morphology of chick embryos cholinergic blocking agents. Diazinon at doses ranging from 25 to $2000{\mu}g/egg$, was injected on Day 3 of incubation. $TD_{50S}$, were different for the various teratogenic sings such as wry neck, micromelia, abnormal feathering, abnormal beak and curled claws. The threshold dose for wry neck was higher than the threshold dose for other signs; $40{\mu}g/egg$ produced substantial micromelia, abnormal feathering, abnormal beak and curled claws, but gave no sings of wry neck. In contrast to the teratogenic doses, the $LD_{50}$ of diazinon was very high(above $2000{\mu}g/egg$). One of the characteristics of diazinon-induced teratogenesis was reduction of body weight(78.8%) and body length(73.8%). Maximal teratogenic effects, scored as sings of retarded growth, wry neck, micromelia, abnormal feathering, abnormal beak, and curled claws, were produced when the insectcide was administered on the third or fourth day. The threshold dose for type II teratogenic sings including wry neck and short neck was higher than for type I including micromelia and abnormal feathering. Morphorlogical studies, using atropine and gallamine, suggested that nicotinc but not muscarinic receptors may be involved in the mechanism of diazinon-induced type II malformations.
The toxicity of the mixture of diazinon, toxaphene(TOX) and/or endrin was studied in ICR male mice(18-22 g) by oral intubation, in corn oil, daily for up to 14 days. On day 15, the exposure was discontinued and animals were monitored for an additional period of 7 days for the possible reversibility of the toxicity. The body weight gain decreased with the mixtures, as well as with the individual pesticides, during the 14-day period. TOX and TOX containing mixtures significantly increased the liver/body weight ratio. The serum glutamic pyruvic transaminase level increased at 23~374% in diazinon, TOX, and endrin or their mixture group. The cholinesterase(ChE) activity in the serum and brain was inhibited in the animals of the group of diazinon(5, 10 mg/kg) and diazinon(5 mg/kg) containing mixtures. TOX(40, 80 mg/kg) caused initial inhibitory effects on the serum ChE Day 1. but there is little effects on the brain ChE levels. endrin(5,10 mg/kg) results in significantly elevated levels of the serum ChE, with substantial decreases in the brain ChE activity. TOX and TOX containing mixtures decreased the pentobarbital(60 mg /kg, ip., in saline) induced sleep. The effects produced by this pesticides singly, as well as by their mixtures, appeared to be reversible in nature. The toxic effects exhibited by the mixtures of diazinon(5 mf/kg), TOX(40 mg/kg), and /or endrin(5 mg/kg) were found to be the resultant of the effect showed by their components individually.
최근 화학물질 및 환경오염물질의 독성 시험법으로 Frog Embryo Teratogenesis Assay-Xenopus(FETAX)방법이 독성평가에 활용되어지고 있다. 본 연구에서는 FETAX 방법에 따라 한국산 개구리 중 산개구리(Rana dybowskia)의 배아를 이용하여 NiCl$_2$, Carbofuran, Diazinon의 기형성을 조사하였으며 치사율과 기형률은 probit 분석법으로 조사하였다. NiCl$_2$, Carbofuran, Diazinon에 따른 teratogenic concentration(EC$_{50}$)은 0.4, 1.6, 1.9mg/1 을 각각 나타내었으며 embryolethal concentrations(LC$_{50}$)은 17.5, 41.5, 20.2mg/1 을 나타내었다. Teratogenic indices (TI=LC$_{50}$/EC$_{50}$)는 NiCl$_2$의 경우 43.8, Carbofuran의 경우 26.0. Diazinon의 경우 10.6을 나타내었다. NiCl$_2$, Carbofuran, Diazinon는 산개구리 배아에 대해 강력한 기형성을 나타내었으며 이들의 농도에 의존하여 수포형성, 꼬리, 척추기형 등이 증가하였다. 이상의 결과들로 보아 NiCl$_2$,Carbofuran, Diazinon 모두 낮은 농도에서 배아의 발생을 억제하여 산개구리 배아의 기형성 시험방법은 화학물질 및 환경오염물질의 독성검정에 요긴하게 활용할 수 있을 것으로 판단된다.으로 판단된다.
국내에서 많이 사용되고 있는 수도용 농약중 iprobenfos, isoprothiolane 및 diazinon의 수중 분해속도를 구명하기 위하여 수중 농약분해의 주요 요인인 가수분해, 미생물분해 및 광분해에 대해서 실험한 결과는 다음과 같다. Iprobenfos는 주로 미생물에 의해서 분해되었는데 반감기는 $4.0{\sim}5.7$일이었고, 고온일수록 가수분해가, pH가 낮을수록 분분해가 촉진되었다. Isoprothiolane은 미생물과 광에 의해서 주로 분해되었는데 광영향이 더 크게 작용한 것으로 나타났으며, 광분해는 pH 9.0에서 반감기가 91일인 반면 pH 4.0, 7.2에서는 각각 13, 16일로 pH가 낮을수록 분해가 신속하였다. Diazinon은 이 세가지 요인에 의해 분해가 일어났으며 pH가 낮을수록 가수분해가 매우 빠르게 일어났다. 농업환경에서 iprobenfos, isoprothiolane 및 diazinon의 수중분해는 각각 미생물분해, 광분해, 가수분해가 주요인으로 판단되었다. 시험농약을 분해하는 미생물을 동정한 결과 iprobenfos, isoprothiolane 및 diazinon은 각각 Pseudomonas putida, Alcaligenes xylosoxydans, Klebsiella planticola/ornithinllytica었고 유사도는 $54.8{\sim}86.2%$였다.
유기 인계 살충제 농약 (Diazinon, Dimethoate, Fenitrothion)이 부착된 상추를 대상으로 정체된 물, 흐르는 물, 중성세제, 알카리용액 및 산성용액 등으로 세척시간(10, 30, 50초)과 세척횟수(1, 2, 3회)별로 잔류농약의 제거율을 조사한 결과는 다음과 같다. 다섯가지 세척방법에 의한 농약의 제거효과는 세척시간과 횟수가 늘어날수록 증가되었으며, 50초간 세척이 가장 높은 제거율을 보였다, 정체된 물을 세척제로 사용하여 50초간 3회 세척시 잔류농약의 제거율은 Diazinon 38.4%, Dimethoate 45.7%, Fenitrothion 24.6%이었으나, 흐르는 물에서는 Diazinon 29.4%, Dimethoate 37.7%, Fenitrothion 24.5%로 정체된 물에서 효과가 높게 나타났다. 알카리용액을 세척제로 사용했을때의 잔류농약 제거율은 Diazinon 32.1%, Dimethoate 49.5%, Fenitrothion 29.9%, 산성용액에서는 Diazinon 30.4%, Dimethoate 36.4%, Fenitrothion 21.0% 이었으며, 중성세제의 경우는 Diazinon 47.1%, Dimethoate 58.0%, Fenitrothion 39.5%로 다섯가지 세척제 중에서 가장 우수한 것으로 나타났다. 본 연구결과만으로 볼 때 중성세제를 세척제로 하여 50초간 3회 세척하는 것이 가장 효과적인 세척방법으로 조사되었다.
유기인계 살충제 유제의 경시변화 특성을 구명하기 위하여 3종의 농약원제(DDVP, malathion 및 diazinon), 3종의 용매(xylene, cyclohexanone 및 DMF), 조제된 유화제 9종 및 분해방지제 epichlorohydrin을 재료로 조성과 수분함량을 달리하는 시험용 유제를 제제한 다음 $54^{\circ}C$에서 15일간, $38^{\circ}C$에서 9일간 각각 고온학대처리하여 유효성분의 경시변화를 조사하고 상호비교하였다. DDVP원제는 $54^{\circ}$에서 초기에 크게 분해되었으나 경시적으로 분해속도가 완만해졌다. 한편 malathion과 diazinon은 점차 분해가 촉진되었으며, diazinon의 경시변화가 가장 심하였다. 유제중 유효성분의 경시변화는 사용한 용매에 따라 큰 차이가 있었으며, 대체로 용매의 극성이 증가할수록 경시변화가 현저하게 증가하였다. 유화제를 첨가한 유제는 수분함량과 경시변화율이 증가하였으며, 유화제의 종류에 따라 경시변화의 차이가 심하였다. 유제중의 수분함량이 증가할수록 경시변화율이 증가하였으며, 약제에 따라 차이가 있어서 DDVP가 수분함량증가에 대하여 가장 안정하였으며, diazinon이 가장 불안정하였다. Malathion과 diazinon유제는 epichlorohydrin에 의한 분해방지 효과가 탁월하였으나, DDVP유제에서는 그 효과가 매우 작았다. 고온학대처리조건이 달라도 경시변화경향은 유사하였으나, $38^{\circ}C$에서 90일간 보관한 유제의 경시변화율이 $54^{\circ}C$에서 15일간 보관한 것보다 1-2배 크게 나타났다.
수도용(水稻用) 유기인계(有機燐系) 살충제중에서 조제형태(粗劑形態)로 널리 사용되는 Diazinon제와 Dursban제의 담수토양중(湛水土壤中)에서의 경시적(經時的) 분해(分解)정도를 비교(比較)하고, 아울러 살균(殺菌)과 비살균(非殺菌)토양을 비교하므로서 토양미생물(土壤微生物)에 의한 분해효과(分解效果)를 실험하였다. 아울러 두 약제의 분해대사산물을 GC/MS로 확인하였으며 중요한 결과는 아래와 같다. 1. 항온기(恒溫器$(30{\pm}1^{\circ}C)$)내에서 담수상태(湛水狀態)로 처리한 Diazinon제와 Dursban제의 경시적 변화는 비살균토양(非殺菌土壤)에서 보다 살균토양(殺菌土壤)에서 약 3배(培) 정도 지연되었으며, 따라서 미생물에 의한 분해를 확인할 수 있었다. 2. Diazinon제의 상용농도에서의 반감기는 2.2일이었으며, Dursban 제는 10.8일이었다. 상용농도의 3 배량 고농도 처리에서는 두 약제 모두 평균 1일정도 분해가 지연되었다. 3. Diazinon의 분해대사산물(分解代謝産物)로는 가수분해산물인 0, 0-diethyl phosphorothioate 와 이 화합물의 이량체(二量體)인 sulfotep, 그리고 monooxygenase 에 의한 분해대사물인 Diazoxon, 0,0-diethyl-0-[2-(1-hydroxy-1, 1-dimethyl)-6-methyl]-pyrimidinyl phosphorothioate 그리고 2-isopropyl-6-methyl-pyrimidine-4-one 이 확인되었으며, Dursban 제의 대사산물로는 0, 0-diethyl phosphorothioate 만이 확인되어 주로 esterase 에 의한 분해가 주대 대사경로라고 밝혀졌다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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