This work was undertaken to elucidate some aspects of mechanisms underlying the increased deoxycytidineuria following irradiation in the mice, by observing Dische-positive substances liberated from thissues, the activity of CdR-aminohydrolase of tissues and the CdR excreted in the urine at various times after single whole-body exposure to 400 and 800 R of X-rays. The activity of CdR-aminohydrolase declined markedly at 1 hour in the small intestine and liver, followed by a gradual rise reaching a maximum at 3 days after irradiation. In the case of the spleen and blood, however, only a trace of activity was observed in the control and irradiated animals. The amount of Dische-positive substance liberated from the small intestine postirradiation was elevated from 3 to 12 hours, showing a maximum during 6 to 9 hours after irradiation. On the contrary, the activity of the enzyme in the liver, spleen and kidney was less than one twentieth that of the small intestine, suggesting a prediction that these organs are not attributable to the increased deoxycytidineuria. A maximum deoxycytidineuria was exhibited at 9-12 hours period, attributed a large amount of CdR to the small intestine, which might correlate with the change in the CdR-aminohydrolase activity. Radiation-induced CdR seems to be liberated from the small intestine into the blood when the CdR-aminohydrolase activity declines abruptly. Then, the CdR is rapidly subjected to a filtration in the kidney without undergoing a further degradation pathway in the blood.
Cervical cancer is one of the leading causes of female death from cancer worldwide with about 500,000 deaths per year. A strong association between certain human papilloma viruses (HPV types 16 and 18) and cervical cancer has been well known. An extract of natural products, named as Somatid, has been used to investigate whether this agent has the ability of inhibiting the oncogenes E6 and E7 of HPV type 16. This Somatid inhibited the proliferation of human cervical cancer cell lines (C-33A, SiHa, CaSki) and HaCaT keratinocytes in a dose response manner, In vitro binding assay and ELISA showed that Somatid inhibited the in vitro biding of E6 and E6AP which are essential for the binding and degradation of the tumor suppressor p53. In addition, Somatid inhibited the in vitro binding of E7 and Rb which is essential tumor suppressor for the control of cell cycle. The levels of mRNA for E6 and E7 were also decreased by Somatid. Our data suggested that Somatid inhibited the oncogenecity of E6 and E7 of HPV 16 type, thus can be used as a putative anti-HPV agent for the treatment of cervical carcinomas caused by HPV.
The moringa (Moringa oleifera Lam.) plant is used both as food and an anti-allergic agent. In this study, we investigated skin protection effects of methanol extracts from the root, seed, fruit, and leaves of moringa in HaCaT keratinocyte cells. To investigate the pharmacological potential of various moringa extracts on TNF-${\alpha}$-induced collagen degradation in HaCaT cells, we measured the activity of matrix metallopeptidase-9,2 (MMP-9,2) by zymography analysis. Our results showed that all the moringa extracts inhibit the TNF-${\alpha}$-induced enzyme activity of MMP-9. In particular, moringa root extracts significantly suppressed MMP-9 and MMP-2 in a dose-dependent manner. Next, to investigate the anti-inflammation effect of the moringa extracts, we examined cyclooxygenase-2 (COX-2), inducible nitric oxide synthase (iNOS), and interleukin-6 (IL-6) expression of the extracts. The results showed that both the root extracts and the seed extracts decreased the TNF-${\alpha}$-induced expression of COX-2. In addition, the root and leaf extracts reduced the expression of IL-6. However, none of the moringa extracts affected the expression of iNOS. The results suggest that moringa root extracts down-regulate MMP-9, COX-2, and IL-6 and that the root extracts offer superior skin protection effects compared with other extracts of moringa in HaCaT cells.
Vertebrate neurogenesis requires inhibition of endogenous bone morphogenetic protein (BMP) signals in the ectoderm. Blocking of BMPs in animal cap explants causes the formation of anterior neural tissues as a default fate. To identify genes involved in the anterior neural specification, we analyzed gene expression profiles using a Xenopus Affymetrix Gene Chip after BMP-4 inhibition in animal cap explants. We found that the xCyp26c gene, encoding a retinoic acid (RA) degradation enzyme, was upregulated following inhibition of BMP signaling in early neuroectodermal cells. Whole-mount in situ hybridization analysis showed that xCyp26c expression started in the anterior region during the early neurula stage. Overexpression of xCyp26c weakly induced neural genes in animal cap explants. xCyp26c abolished the expression of all trans-/cis-RA-induced posterior genes, but not basic FGF-induced posterior genes. Depletion of xCyp26c by morpholino-oligonucleotides suppressed the normal formation of the axis and head, indicating that xCyp26c plays a critical role in the specification of anterior neural tissue in whole embryos. In animal cap explants, however, xCyp26c morpholinos did not alter anterior-to-posterior neural tissue formation. Together, these results suggest that xCyp26c plays a specific role in anterior-posterior (A-P) neural patterning of Xenopus embryos.
Kwak, Ji Hyun;Jeong, Chang-Ho;Kim, Ji Hye;Choi, Gwi Nam;Shin, Young-Hee;Lee, Seung-Cheol;Cho, Sung Hwan;Choi, Sung-Gil;Heo, Ho Jin
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.41
no.4
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pp.435-440
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2009
Acetylcholinesterase (AChE) inhibitors, which enhance cholinergic transmission by reducing the enzymatic degradation of acetylcholine, are the only source of the compound that is currently approved for the treatment of Alzheimer's disease (AD). In these experiments, the concentration samples of green tea extracts were 100, 500, and 1,000 ${\mu}g$/mL. Among them, the highest concentration (1,000 ${\mu}g$/mL) of fresh green tea extracts showed the most potent inhibitory effect on AChE by reducing more than 40% of enzyme activity, and in a concentration-dependent pattern. In addition, we examined the effect of other storing conditions on AChE inhibition. In order to maintain storage for 3 months, the materials were held at the certain storing conditions of temperature (room temperature, 4 and $-20^{\circ}C$) and for water activity (0.81, 0.69, and 0.23). In these storing conditions, the difference in temperature did not contribute to the AChE inhibitory effect. Our presented data showed that the AChE inhibitory effect was affected by the concentration of green tea extract and by water activity (0.81). These results suggest that green tea may serve as a potential dietary source of AChE inhibitor.
Korean mistletoe (Viscum album L) extract has been found to posses immunoregulating activity. In this study, Korean mistletoe extract, M11C (non-lectin components), was used to know whether this extract activates splenocytes to secret interleukin $1\beta(IL-1\beta)$. The splenocytes were treated with M11C, and then collected the supernatant and cell lysate that were prepared to analyze the level of $IL-1\beta$, using ELISA, immunoblotting, and RT-PCR. Maximum effective dose and time of M11C on $IL-1\beta$ secretion from splenocytes were $200{\mu}g/m\ell$ and 8 hours, respectively. Treatment dose and time for the maximum expression of $IL-1\beta$ mRNA were $200{\mu}g/m\ell$ and 4 hours, respectively. Saccharide degradation enzyme Viscozyme L completely blocked the effect of M11C on $IL-1\beta$ secretion from splenocytes. As the result, among non-lectin components saccharide could be regarded as a main component for $IL-1\beta$ expression from splenocytes.
It has been known that the silk degumming treated by hot alkali solution is easy to handle but is liable to yield poor-quality silk due to the degree of degumming loss, incomplete-degumming or over-degumming. Therefore, many studies have been carried out on the silk degumming by enzyme in order to improve the quality of silk. However, no attention has been paid to the physicochemical analysis of enzymatic degummed silk. In this paper, two different degumming methods, soap and enzymatic, are compared in aqueous solution state of silk fibroin. The results can be summarized as follows: There was no significant difference between two solutions on the bases of polarizing microscopy, TEM observation and SDS-PAGE. Spherulite of silk fibroin was not observed in polarizing microscopy, however the leaf-shape fibril structure was developed upon solidification. The size of spherulites of silk fibroin in TEM observation were 30~120nm with a wide range of size distribution. The intrinsic viscosity of enzymatic degummed fibroin solution was lower than that of soap degummed solution. This can be explained that the silk fibroin was more degraded by enzymatic degumming method compared with the soap degumming method. SDS-polyacrylamide gel electrophoresis showed that the fibroin molecule was composed of large component of molecule weight above 50 kd and small component of molecule weight about 20 kd. There was no difference in crystallinity between two degumming methods on the bases of results of DSC thermograms and IR spectra.
In order to investigate the ability of log wood for oak mushroom production as a source of an alternative energy, both chemical and physical characteristics of log wood were investigated according to the cultivation periods. Also, both chemical and physical characteristics of material that treated by steam explosion were investigated to confirm the pretreatment effect by remaining enzyme as a control. The contents of ash, water-, alkali- and organic soluble extracts have been increased after the inoculation. It appeard that holocellulose contents substantially decreased and the contents of lignin as another main component of wood remained constant after the inoculation. However this result implied that indeed, a sufficient amount of lignin has been degraded paritially by enzymes of oak mushroom Lentinus edodes if we consider that the amount of holocelulose was substantially reduced. It also indicated that the degree of degradation gradually progressed but crystallinity decreased after the inoculation. The contents of water-, alkali- and organic soluble extracts have been increased by steam explosion. Holocellulose contents increased within narrow limits and lignin contents remained constant. However the contents of holocellulose and lignin have been decreased by steam explosion, considering that the amount of other extractives was relatively increased. The degree of crystallinity and lignin contents reduction by steam explosion was almost similar to the result obtained by increasing cultivation periods. According to the results, log woods for mushroom production have a potential as material for developing alternative energy.
The effect of 16 cultivars on the quality of the rice porridge was investigated. The 'Geunnun' had the highest water absorption rate, but the 'Segyejinmi' yield (w/w) was the highest. The total sugar content of the rice porridge was 0.29~8.10%, showing significant variation among the cultivars. High amylose 'Dodamssal' and 'Hwaseonchalbyeo' glutinous rice displayed rotational viscosities of <20,000 cP. Rotational viscosities for boiled rice cultivars were 30,000~40,000 cP, representing an intermediate level, and the rotational viscosities of 'Geonyang2' and 'Hanareum4' were over 50,000 cP. These results suggest that the viscosity of rice porridge varies significantly among raw material cultivars. Among other variables affecting the texture profile of rice porridge, there were significant differences in hardness and gumminess among the cultivars. As a raw material, 'Baekokchal', a kind of glutinous rice, is known to be whiter than the non-glutinous rice, but after processing to porridge, it showed the lowest L value (71.1). Starch degrading enzyme activity was not significant in most types of rice porridges within 30 or 60 minutes. Therefore, enzymatic starch degradation is thought to be completed within 30 minutes. Among the tested raw materials, 'Miho' was 73.5 ㎍/mg, indicating the best digestibility in vitro.
Objective: Among stress responses, the unfolded protein response (UPR) is a well-known mechanism related to endoplasmic reticulum (ER) stress. ER stress is induced by a variety of external and environmental factors such as starvation, ischemia, hypoxia, oxidative stress, and heat stress. Inositol requiring enzyme $1{\alpha}$ ($IRE1{\alpha}$)-X-box protein 1 (XBP1) is the most conserved pathway involved in the UPR and is the main component that mediates $IRE1{\alpha}$ signalling to downstream ER-associated degradation (ERAD)- or UPR-related genes. XBP1 is a transcription factor synthesised via a novel mechanism called 'frame switch splicing', and this process has not yet been studied in the horse XBP1 gene. Therefore, the aim of this study was to confirm the frame switch splicing of horse XBP1 and characterise its dynamics using Thoroughbred muscle cells exposed to heat stress. Methods: Primary horse muscle cells were used to investigate heat stress-induced frame switch splicing of horse XBP1. Frame switch splicing was confirmed by sequencing analysis. XBP1 amino acid sequences and promoter sequences of various species were aligned to confirm the sequence homology and to find conserved cis-acting elements, respectively. The expression of the potential XBP1 downstream genes were analysed by quantitative real-time polymerase chain reaction. Results: We confirmed that splicing of horse XBP1 mRNA was affected by the duration of thermal stress. Twenty-six nucleotides in the mRNA of XBP1 were deleted after heat stress. The protein sequence and the cis-regulatory elements on the promoter of horse XBP1 are highly conserved among the mammals. Induction of putative downstream genes of horse XBP1 was dependent on the duration of heat stress. We confirmed that both the mechanisms of XBP1 frame switch splicing and various binding elements found in downstream gene promoters are highly evolutionarily conserved. Conclusion: The frame switch splicing of horse XBP1 and its dynamics were highly conserved among species. These results facilitate studies of ER-stress in horse.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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