We use two different methods for laboratory propagation from seed of lady's slipper orchid(Cypripedium macranthos Sw.); immature seed which also called green capsule or fully mature seed about 120~130 days from pollination. In green capsule culture, the seed pods should be collected within precisely right time. The right time of seed collection could be diverse under the wether conditions or nutritional factors of the plants. In fully matured seed culture, the more complicated procedures are needed to break the dormancy of the seed; thermal or chemical treatment. The seedlings in this study were easily germinated from immature seeds in Harvais medium; 53 days after pollination(DAP) in Cypripedium pubescens, DAP 65 in C. parviflorum and C. macranthos. The germinated seedlings were transplanted to hormone free media immediately to avoid abnormal growth of seedlings. When the seedlings have roots with a minimum length of around 2-3cm and have visible dormant buds, the seedlings were removed from the flask and stored in refrigerator for vernalization. To examine the correlation of seedlings and maternal plants, the 125 seedlings of C. macranthos were transplanted in the soil bed at a distance of 20-100 cm from mother plants on April 20. The survival rate of seedlings were 92% in 20 cm distance from the ripe plants, and 56 % in 100 cm distance. The seedlings which were transplanted near mother plants showed vigorous growth in plant height, leaf width, and especially dormant buds. Considering the existence of mycorrhiza which is a symbiotic association between a fungus and the roots of a orchid vascular, the various fungus from mother plants could affect the growth of the seedlings. These results indicate the possibility of high and stable production and practical industrialization of endangered lady's slipper orchids.
Hordeum bulbosum을 이용한 보리 반수체육종법의 실용화를 체계화하기 위해 일련의 실험을 실시하였으며, 유배의 적취시기, 유배의 크기에 따른 배배양 반응, 배지 및 환경조건 등을 조사하였다. 1. 유배의 적취시기는 배발육과 식물체 발생률을 고려할 때 수분 후 17일이 적기였다. 2. 식물체 발생에 유리한 유배의 크기는 0.9mm내외였다. 3. 식물체 발생에 효과적인 배지 및 배양조건은 MS배지의 암상태에서 발생시킨 후 명상태로 하는 것이 정상 식물체 발생률(3%)이 높았으나, 작업상의 편리성을 고려한다면 B5배지에서 24시간의 일장처리조건이 좋았다. 4. 반수체는 정상 2배체에 비하여 배 및 식물체의 발생이 현저히 부진하였다.
Maize seed pigmentation is one of the important issue to develop maize seed breeding. The differently gene expression was characterized and compared for three inbred lines, such as the pigment accumulated seed (CM22) and non-pigmented seed (CM5 and CM19) at 10 days after pollination. We obtained a total of 63,870, 82,496, and 54,555 contigs by de novo assembly to identify gene expression in the CM22, CM5, and CM19, respectably. In differentially expressed gene analysis, it was revealed that 7,044 genes were differentially expressed by at least two-fold, with 4,067 upregulated in colored maize inbred lines and 2,977 upregulated in colorless maize inbred lines. Of them,18 genes were included to the anthocyanin biosynthesis pathways, while 15 genes were upregulated in both CM22/5 and CM22/19. Additionally, 37 genes were detected in the metabolic pathway concern to the seed pigmentation by BINs analysis using MAPMAN software. Finally, these differently expressed genes may aid in the research on seed pigmentation in maize breeding programs.
Lee, Joung Kwan;Kwon, Young Hee;Kim, Hee Kyu;Kim, Kyung Ok;Park, Jae Seong;Jeong, Mi Jin;Son, Sung Won;Suh, Gang Uk
한국자원식물학회:학술대회논문집
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한국자원식물학회 2019년도 추계학술대회
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pp.23-23
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2019
Cypripedium is an orchid genus of over 50 species widely distributed in the northern temperate zone, with a few taxa extending central America and the Himalayas and the southwesternmost tip of China in Asia. Of the known species approximately two thirds are found in China. In Korea, 4 species were reported to find with rare popularity ; C. macranthos, C. guttatum, C. japonicum, and C. calceolus. The seed has a firm brown fusiform testa with an opening at one end where the micropyle of the ovule was situated. Cypripedium has small, fusiform, wind-dispersed seeds that weigh about $1{\sim}2{\mu}g$ and range from 0.1 to 2 mm long and 0.07 to 0.4 mm across. The germination of Cypripedium was previously thought to be hard to cultivate in one's garden and impossible to propagate artificially, nowadays lab-propagated seedlings are readily available in EU or United States. We had already reported the successful micropropagation of lady's slipper orchids with green pod sowing methods. The collected Cypripedium species and hybrids were planted in Korea National Arboretum (KNA) on Oct. 2018. The 11 species including C. candidum and the 31 hybrids such as C. Ingrid were introduced from Germany with CITES certification. The lady's slipper orchids bloomed on May to June, and the flowers were pollinated in the same species or hybrids to get seeds for in vitro germination on 2~3 days after fully flowering. The green pods were collected after 49~70 days after pollination. The 6 species of Cypripedium seeds were easily germinated on the POM within 70 days after sowing, and the 12 hybrids PLBs were observed with small roots. We had established the scheme of lady's slipper orchids germination in 3 months with green pods, and get the possibility of seedling in 10 months of sowing in vitro.
대마의 육종 및 재종상의 큰 장애인 "자웅이주성"을 극복할 수 있는 "자성종자" 생산기술을 개발하기 위해 수행한 일련의 연구결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 전 생육기간 자연 단일조건에 재배한 개체들은 질산은을 처리하더라도 성전환 식물체 비율이 5%이고 웅화의 발생정도가 극히 적었으며 자화보다 24일 늦게 개화하여 수정이 되지 않았다. 2. 재배환경을 3엽기, 6엽기에 장일에서 단일조건으로 급격하게 변화시킨 자주는 웅화의 개화량은 적었지만 성전환 개체 비율이 각각 75%, 100%로 높고 자화와 개화기 차이가 각각 10일, 3일로 비슷한 시기에 개화하여 인공수정이 가능하였다. 3. 영양생장기로 판단되는 7월 2일과 7월 12일에 질산은과 단일을 동시에 처리한 개체들은 모두 성이 전환되어 성전환 액아 비율이 각각 63.2%, 61.9%로 높았고 무처리 자주와 동일한 시기에 개화하여 자연적인 풍매로 수정되었다. 또한 상위 제 1절에서 성전환 액아의 비율이 각각 80.5%, 77.0%로 가장 높아 풍매에 유리하도록 바람이 잘 통하는 식물체 상부에서 성전환 액아의 비율이 높았다. 4. 생식생장기로 판단되는 7월 22일에 처리한 개체들은 성전환 액아의 비율이 4.4%로 낮고 자화보다 16일 늦게 개화하여 수정되지 않았다. 5. 일반종자는 자주 비율이 49%로 성비가 1:1에 근접하기 때문에 종실수량이 96 kg/10a였으나 자성종자는 자주 비율이 100%로서 종실수량이 141 kg/10a로 일반 종자에 비해 47% 증수되었다.
Cypripediums, popularly called lady's slippers or moccasin flowers, are the showiest and most sought after hardy terrestrial orchids, collected and grown by orchid and alpine plant enthusiasts alike. In Korea, 4 species of cypripedium are reported as Cypripedium japonicum, C. macranthos, C. guttatum, and C. calceolus. We had already reported the feasibilities of C. macranthos and C. guttatum with in vitro germination methods from immature seeds. The seeds of white lady's slipper orchid (Cypripedium macranthos Sw. alba) were collected 65 days after pollination in 2018. The green pods were sterilized with flame and sowed immediately on the POM(Phytomax orchid maintenance media(R), Sigma) supplemented with BAP 0, 0.5, 1.0 mg/L and NAA 0, 1, 2mg/L. The germination of seed was observed 90 days after sowing, and the plantlets were subcultured to the same media according to the size of the protocorm with 1~2, 2~3, 3~4, 5~6, 7~8mm. The time of the subculture to the new media seems to be critical factors of forming rhizoids which is the hairy root of the cypripediums. As a results, the protorms of the white lady's slipper orchid was successfully germinated in the POM media supplemented BAP 0.5 and NAA 1.0 mg/L. The roots and rhizoids were formed in 5~6mm protocorms subculture over 95% survival ratio. We also tried to subculture to liquid medium without activated charcoal, however the browning or malformation of the roots was observed in the root. The formation of shoots from the protocorm was effectively enhanced in the POM media with non-additives of plant growth regulators. These results indicate the possibility of high and stable production and practical industrialization of endangered white lady's slipper orchids.
대두 종자 저장 단백질의 일종인 ${\beta}-conglycinin$의 ${\alpha}'$subunit 유전자 upstream 영역에 결합하여 전사 조절에 관여하리라 추정되는 SEF3(soybean embryo factor 3)의 발현을 조사하기 위하여 대두 핵 추출물을 조제하였다. 두개의 AACCCA를 포함하는 SE3 DNA를 $^{32}P$로 표지한 후 gel mobility shift assay 탐침으로 이용하여 대두 발달 과정 중의 SEF3의 역가를 조사하여 본 결과, 개화 후 16일부터 32일까지의 역가는 증가하나 SE3-SEF3 결합체 이동도는 감소하였다. 핵 추출물을 alkaline phosphatase 처리하면 결합체의 이동도가 다시 증가하였으나 이 현상은 phosphate에 의해 저해되었다. 그리고 결합체의 형성은 반응 pH 6.8과8.5사이에서는 큰 영향을 받지 않았다.
우리나라에 자생하는 해오라비란(Habenaria radiata), 자란(Bletilla striata), 복주머니란(Cypripedium macranthum)을 실험재료로 하여 종자발아에 영향을 미치는 요인에 대해 연구하였다. 해오라비란의 종자발아는 전반적으로 고체배지에서 좋았으며, Hyponex 고체배지에서 29.6%로 가장 높은 발아율을 보였다. 그러나 발아 후 생육은 MS배지에 코코넛워터 $100mL\;L^{-1}$을 첨가한 MSC 액체배지에서 가장 양호하였다. 자란의 종자는 MS 고체배지에서 28.2%로 가장 높은 발아율을 보였다. 반면, 액체배지에서는 배지의 종류에 관계없이 전혀 발아되지 않았다. 복주머니란의 자가 및 타가수분 후 90일 된 종자를 6종류의 배지에 배양한 결과 타가수분한 종자는 배지의 종류에 관계없이 발아가 되었으며, 특히 MSC배지에서 가장 양호한 4.45%의 발아율을 보였다. 그러나 자가수분 된 종자는 모든 종류의 배지에서 전혀 발아가 관찰되지 않았다.
Park, Min-Hwa;Shin, Dong-Hoon;Han, Myoung-Hae;Yun, Young-Ho;Bae, Jeong-Sook;Lee, Yun-Sang;Chung, Keun-Yook;Lee, Moon-Soon;Woo, Sun-Hee
한국자원식물학회지
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제22권3호
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pp.227-235
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2009
Single seeds of common buckwheat cultivar Suwon No. 1 when subjected to SDS-PAGE revealed very high polymorphism. High variation existed for protein or protein subunits with molecular weight 54-47kDa, 45-25kDa and 16-11kDa. The electrophoregram showed variation for globulin as well as other protein fractions. About 300 proteins were separated by two-dimensional electrophoresis in common buckwheat (Fagopyrum esculentum Moench.) seed. Seed maturation is a dynamic and temporally regulated phase of seed development that determines the composition of storage proteins reserves in mature seeds. Buckwheat seeds from 5, 10, 15, 20, and 25 days after pollination and matured stage were used for the analysis. This led to the establishment of high-resolution proteome reference maps, expression profiles of 48 spots. It was identified 48 proteins from MALDI-TOF/MS analysis of wild buckwheat seed storage proteins. The 48 proteins were found identical or similar to those of proteins reported in buckwheat and other plants; it is belonging to 9 major functional categories including seed storage proteins, stress/defense response, protein synthesis, photosynthesis, allergy proteins, amino acid, enzyme, metabolism, and miscellaneous. It appears that the major allergenic storage protein separated played the important role in buckwheat breeding and biochemical characterization.
The performance of 7 sugary (su) and 12 shrunken-2 (sh2) sweet com hybrids which are commercially grown in the United States was tested in Korea. The 100-seed weight of su hybrids (16.5-23.6 g) was much heavier compared to that of sh2 hybrids (10.9-17.5 g). The germination rate of su and sh2 hybrids at $25^{\circ}C$ ranged 93.3-100% and 86.7-98.9%, the emergence rate of su and sh2 hybrids in cold test ranged 78.9-97.8% and 62.2-97.8%, and field emergence rate of su and sh2 hybrids ranged 74.4-100.0% and 79.9-98.2%, respectively. In su hybrids, there was a significantly positive correlation between germination rate at $25^{\circ}C$ and emergence rate in cold test or early growth. In contrast, in sh2 hybrids seed weight was positively correlated with early plant growth, while not with the germination rate at $25^{\circ}C$ or emergence rate in cold test and field. Most sh2 hybrids produced larger and more marketable ears compared to su hybrids although there were significant differences among the hybrids in the same genotype. At harvest (24 days after pollination) soluble solids content of su hybrids (24.3-27.1 Brix %) was much higher than that of sh2 hybrids (13.8-18.0 Brix %), while total sugars of sh2 hybrids (21.4-28.6% on the dry weight basis) was much higher compared to su hybrids (2.4-15.9%). Considering germination and emergence rates, marketable ear production, and total sugar content, 'GCB 70' and 'Sweet Satin' in su hybrids and 'Ice Queen', 'Aspen', 'Sweet Magic', 'Bandit', 'Xtrasweet 82', 'Aspen', and 'Cambella 90' in sh2 hybrids performed better than other hybrids.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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