Kim, Jury;Choi, Ul Soo;Plummer, Caryn E.;Brooks, Dennis E.;Kim, Min-Su
Journal of Veterinary Clinics
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v.31
no.4
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pp.319-321
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2014
A 12-year-old mixed breed male dog was referred to Chonbuk National University Animal Medical Center with unilateral left epiphora. Magnified ophthalmic examination revealed a very small tissue mass on the palpebral conjunctiva of the left eye. The mass was surgically removed and microscopic examination confirmed moderate papillary hyperplasia of the squamous epithelium without viral cytopathic effects. Based on the histology, the mass was diagnosed as a non-viral squamous papilloma. After removal of the mass, the epiphora was completely solved. This case report describes the non-viral squamous papilloma arising from the conjunctiva in a dog with epiphora.
Sixteen Korean field transmissible gastroenteritis viruses (TGEVs) were isolated using swine testicular cell (STC) and the genomic diversity of them was analyzed. All TGEV isolates produced a typical cytopathic effect in STC and were confirmed as TGEV by immunofluorescence assay using monoclonal antibody against TGEV and PCR using TGEV specific primers. RNAs from TGEV field isolates and vaccine TGEV were extracted and amplified by RT and PCR. The RT-PCR products were digested with selected restriction enzymes and analyzed RFLP patterns. The N-terminal end region of S gene and ORF 3 and 3-1 genes of TGEV amplified by TGEV specific primer pairs seemed to be conserved. Most specific variations were detected in S gene amplified by TGEV 4/6 primer pairs which includes antigenic sites A and D. When the PCR products were treated with Sau3AI and Ssp I, Bvac(vaccine strain), field isolates 133 and 347 were differentiated from Miller and Purdue types. In the case of D5 field isolates, it was classified into Purdue type by Sau 3AI but classified into independent TGEV by Ssp I. Two different TGEV strains from D2 sample were confirmed by plaque purification and RT-PCR-RFLP analysis. To investigate the change occurring in TGEV genome after serial passage, the TGEV P44 strain was passaged through STC. There were specific changes in S gene and a large deletion was observed in ORF 3 and 3-1 genes. These studies showed that a distinct difference in genome exists among TGEV field isolates.
Viruses are obligate intracellular parasites which cause infection by invading and replicating within cells. The immune system has mechanisms which can attack the virus in extracellular and intracellular phase of life cycle, and which involve both non-specific and specific effectors. The survival of viruses depends on the survival of their hosts, and therefore the immune system and viruses have evolved together. Immune responses to viral infection may be variable depending on the site of infection, the mechanism of cell-to-cell spread of virus, physiology of the host, host genetic variation, and environmental condition. Viral infection of cells directly stimulates the production of interferons and they induce antiviral state in the surrounding cells. Complement system is also involved in the elimination of viruses and establishes the first line of defence with other non-specific immunity. During the course of viral infection, antibody is most effective at an early stage, especially before the virus enters its target cells. The virus- specific cytotoxic T lymphocytes are the principal effector cells in clearing established viral infections. But many viruses have resistant mechanism to host immune responses in every step of viral infection to cells. Some viruses have immune evasion mechanism and establish latency or persistency indefinitely. Furthermore antibodies to some viruses can enhance the disease by the second infection. Immune responses to viral infection are very different from those to bacterial infection.
The microculture XTT antiviral assay method is used to quantitate HIV-1 induced cytopathic effects as modulated by test substances. This relatively simple assay facilitated the safe and rapid determination of in vitro antiviral activity of selected chemicals as well as direct cytotoxicity. This experiment also confirmed that this system measures infection and subsequent viral replication in target cells and XTT formazan formations correlated with the accumulation of extracellular virions, as measured by quantitative HIV-1 induced syncytium foramtion. The present results with Glycyrrhizin using this in vitro culture system demonstrated that effective dose, EC50(the concentration at which increases XTT formazan production in infected cultures to 50% of that in untreated, uninfected controls) was 250ml. As comparison, AZT was included in this experiment and demonstrated that EC50 AZT of was 0.05g/ml, approximately 5,000 times more potent than Glycyrrhizin based on EC50 ratio's alone. However, this potency is limited by severe cytotoxicity of AZT, while Glycyrrhizin is approximately 16 times less toxic(IC50 of Glycyrrhizin 800 and AZT 51 g/ml). While AZT's anti-HIV-1 viral activity is mediated by inhibition of reverse transcriptase of the virus, Glycyrrhizin faild to demonstrate any inhibitory activity against reverse transcriptase. Further study is necessary in order to understand the precise mechanisms of Glycyrrhizin action against HIV-1 viruses. Althouth Glycyrrhizin is less effective antiviral agent than AZT, much less toxicity of Glycyrrhizin is desirable in terms of chronic treatment. Combination treatment of AZT and Glycyrrhizin may be therapeutically beneficial. Clinical effectiveness of two drug combination therapy for AIDS patient is unknown at this time. However, this experimental investigation presents the scientific rational basis for such therapeutic approach.
The glycoprotein of novirhabdoviruses is known to play a critical role in the determination of host specificity. Viral hemorrhagic septicemia viruses (VHSVs) in different genotypes have different glycoprotein sequences and show different preferences for specific cell lines. In this study, to know whether the glycoprotein is solely responsible for the host cell preference of VHSV, a recombinant VHSV expressing vesicular stomatitis virus (VSV) glycoprotein instead of VHSV IVa glycoprotein (rVHSV-VSV-G) was generated by reverse genetics and inoculated into several fish cell lines, then, cytopathic effect (CPE) and viral growth caused by rVHSV-VSV-G infection were compared with those caused by rVHSV-wild that was previously generated and has the same genomic sequence with wild-type VHSV except a few nucleotides. The plaque numbers of rVHSV-VSV-G were significantly higher in EPC, BF-2 and GF cells than those of rVHSV-wild. However, in HINAE cells (originated from olive flounder), rVHSV-VSV-G titer was significantly lower than rVHSV-wild titer, and both recombinant VHSVs were not grown well in CHSE-214 cells. Although statistical significances were detected in the titers between rVHSV-wild and rVHSV-VSV-G in several cell lines, the cell line-preference order of rVHSV-VSV-G was not different from that of rVHSV-wild. These results suggest that the replacement of VHSV glycoprotein may not completely change host cell preference, and other regions of VHSV might also involve in the determination of host cell preference.
Enterovirus isolation was attempted from samples obtained from aseptic meningitis-suspected patients in hospitals in Busan during 2002. Enteroviruses were found in 83 of 703 cases. Echovirus serotypes 2, 3, 6, 7, 9, 13, 25, 29, 30 were isolated in 72 cases while coxsackievirus serotypes B3 and B4 were isolated in 11 cases. The occurrence was found to be distributed from April thru November with the highest rate during June and July. The strains of Vero and HEp-2 of echovirus and coxsackievirus, respectively, are highly infectious. Age distribution of patients, 61 patients in Enteroviruses and 11 patients in coxsackievirus, respectively, occurred in 0 to 10 year-olds. The sex distribution of the patients is as follows, 52 males (62.7%), 31 females (37.3%). Occurrence rate was found to be higher in male patients. Electron micrograph of echovirus and coxsackievirus show that they are small nonenevolped, isometric-shaped viruses. Isolated RNA from strains of echovirus and coxsackievirus showing cytopathic effects were used to undergo nested PCR which resulted in a 437 bp single band in all the strains.
Dental pulp infection is most commonly caused by extensive dental caries, and some bacterial species invade root canals; bacterial components and products are thought to be associated with the pathogenesis of periapical periodontitis. A principle driving force behind pulpal disease response appears to lie in the host immune system's to bacteria and their products. We examined the production of interleukin $1{\beta}$ (IL-$1{\beta}$) and tumor necrosis factor ${\alpha}$(TNF-${\alpha}$) from human peripheral mononuclear cells, lymphocytes and monocytes stimulated by heat-killed Acitnobacillus actinomycetemcomitans (ATCC 29523), Porphyromonas gingivalis (ATCC 33277) and Prevotella intermedia (ATCC 25611), and also by their sonicated bacterial extracts (SBE), respectively. The effects of three strains of heat-killed bacteria and their SBEs on the morphology of cultured blood cell lines HL-60 (KCLB 10240) and J774A.1 (KCLB 40067) were observed under the inverted microscope. Ultrastructural changes of J774A.1 exposed to heat-killed P. intermedia and its SBE were investigated using transmission electron microscopy. Production of IL-$1{\beta}$ was reduced in human peripheral mononuclear cells after stimulation by sonic bacterial extracts of A. actinomycetemcomitans, P. gingivalis, and P. intermedia. Heat-killed and sonic extract of P. gingivalis inhibited the production of TNF-${\alpha}$ in peripheral mononuclear cells. Production of TNF-${\alpha}$ was inhibited in peripheral monocytes after stimulation by sonic extracts of A. actinomycetemcomitans, P. gingivalis, and P. intermedia. HL-60 and J 774A.1 cells showed granular degeneration after treatment with heat-killed and sonic extracts of A. actinomycetemcomitans, P. gingivalis, and P. intermedia Chromatin margination and shrinkage were observed in 774A.1 treated with heat-killed P. intermedia. Cell wall structure and organelles were destroyed and vacuoles were formed in cytoplasm in J774A.1 treated with P. intermedia sonic extract. These results suggest that A actinomycetemcomitans, P gingivalis and P intermedia may have an important role in the formation and progression of pulpal diseases via both modulation of production of IL-$1{\beta}$ and TNF-${\alpha}$ from blood mononuclear cells and cytopathic effects.
Kim, Jin Hui;Park, Jeong Su;Kwon, Se Ryun;Kim, Shin Hu;Kim, Hyoung Jun
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.51
no.1
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pp.42-46
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2018
Fetal bovine serum (FBS) is essential for cell culture and is used in the determination of infectivity titer and propagation of viruses. To clarify the effects of FBS on the propagation of viral haemorrhagic septicaemia virus (VHSV), which is a causative agent of mass mortalities of olive flounder Paralichthys olivaceus in Korea, VHSV was inoculated into an EPC (epithelioma papulosum cyprinid) cell line supplemented with MEMs (minimal essential medium) with FBS concentrations of 0%, 2%, 5%, and 10% (MEM0, MEM2, MEM5, and MEM10), respectively, and infectivity titers were compared. Cytopathic effects were observed in all experimental groups at 2 days post virus inoculation (dpi) and all cells were detached from cell culture flasks at 7 dpi. Infectivity titers increased to 3 dpi, persisted to 7 dpi, and decreased when cells were detached. The titer of VHSV in EPC cells in MEM0 was the lowest while those in the other experimental groups showed similar levels. In conclusion, 2% (v/v) of FBS was sufficient to propagate VHSV in EPC cells and the withdrawal of VHSV from cell culture flasks should be performed before cell detachment.
Park, Chul;Zheng, Min;Seo, Eun-A;Kwon, Kang-Beom;Ryu, Do-Gon
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.24
no.4
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pp.624-629
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2010
Nardostachys jatamansi water extract (NJ) has long been used for the treatment of inflammation-and immune-mediated disorders in the oriental countries. However, its site of action and pharmacological mechanism are not fully investigated. In this study, the authors tried to explore the cytoprotective and anti-inflammatory actions of NJ. First of all, NJ has no harmful effects on viability of neuronal cell line HT22 cells in the dose range of 300 mg/ml. On the contrary, it shows cytoprotective effects on the cells treated with reactive oxygen species H2O2. Probably the cytoprotective effects of NJ might be caused by its ability to induce well known cytoprotective gene hem oxygenase-1 (HO-1). Furthermore, NJ shows inhibitory effects on the expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and NO production which are known to destroy the integrity of both cells and tissues. It also inhibits potent proinflammatory cytokine tumor necrosis factor-alpha (TNF-a) production. The blocking effects of NJ on cytopathic and proinflammatory actions of LPS might be caused by the induction of cytoprotective and anti-inflammatory genes HO-1 in macrophages cell line RAW 264.7 cells. The results in this study suggest NJ could be used for the amelioration of inflammation which is underlying mechanism responsible for most chronic diseases.
Enterovirus 71 (EV71) is the predominant cause of hand, foot and mouth disease (HFMD). The antiviral activity of hederasaponin B from Hedera helix against EV71 subgenotypes C3 and C4a was evaluated in vero cells. In the current study, the antiviral activity of hederasaponin B against EV71 C3 and C4a was determined by cytopathic effect (CPE) reduction method and western blot assay. Our results demonstrated that hederasaponin B and 30% ethanol extract of Hedera helix containing hederasaponin B showed significant antiviral activity against EV71 subgenotypes C3 and C4a by reducing the formation of a visible CPE. Hederasaponin B also inhibited the viral VP2 protein expression, suggesting the inhibition of viral capsid protein synthesis.These results suggest that hederasaponin B and Hedera helix extract containing hederasaponin B can be novel drug candidates with broad-spectrum antiviral activity against various subgenotypes of EV71.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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