Ko, Lim found some differences in the concentrations of bone resorptive cytokines, especially IL-$1{\alpha}$ and IL-$1{\beta}$ in periapical lesions and inflamed pulps. And they suppose that these differences may be due to the type of cells which produce each cytokine. The purpose of this study was to analyze the human odontogenic cysts & cystic fluid for their contents of IL-$1{\alpha}$, IL-$1{\beta}$ and TNF-$1{\alpha}$ and to compare the concentrations of each cytokine according to the cytokine producing cells. The cystic tissues used in this experiment, were obtained from periapical surgery or cyst enucleation surgery. Cystic fluid was obtained from root canal during routine endodontic therapy(n=5). Cystic tissues were subdivided into two groups, inflammatory radicular cyst group(n=15) and developmental odontogenic keratocyst group(n=3). Normal periapical tissues of extracted third molar(n=5) were also obtained to be used as control group. Each specimen was incubated in 0.5ml homogenizing buffer (0.1mol/L potassium chloride, 0.02mol/L TRIS;pH=7.6) for two hours and then homogenized with glass homogenizer. Each specimen was centrifuged in a microcentrifuge for 3 minutes, and supernatants were extracted. The concentrations of cytokines were measured with R&D ELISA kit. The data were analyzed by Mann-Whitney U test for the differences among the diseases and t test for the correlations among each cytokine. Following results were obtained ; 1. For IL-$1{\alpha}$ and IL-$1{\beta}$, all experimental groups showed significantly higher concentrations of each cytokine than the control group (p<0.05). 2. In radicular cysts, the concentrations of IL-$1{\alpha}$ were higher than IL-$1{\beta}$, but not stastically significant (p>0.05). In odontogenic keratocysts, the concentrations of IL-$1{\alpha}$ were significantly higher than IL-$1{\beta}$ (p<0.05). In cystic fluid, the concentration of IL-$1{\beta}$ was significantly higher than IL-$1{\alpha}$ (p<0.05). 3. Between odontogenic keratocysts and radicular cysts, the concentrations of IL-$1{\alpha}$ were significantly higher in odontogenic keratocysts than in radicular cysts (p<0.05). 4. For TNF-${\alpha}$, only cystic fluid group showed significantly higher concentrations than the control group (p<0.05).
Yangkyuk-Sanhwa-Tang(YST) has been widely used as a formula for the Soyangin cerebral infarction (CI) patients according to Sasang constitutional philosophy. Brain cells produce cytokines and chemokines during the inflammatory process after stroke both in animal models and in patients. Previously, regulation of serum cytokine levels by YSThas been observed in individuals at the acute stage of CI disease, but there have not been other scientific investigations on YST. The author investigated the effect of YST on theproduction of various cytokines using peripheral blood mononuclear cells (PBMCs)from the Soyangin (CI) patients, and Soyangin normal group. The cytokine production was analyzed using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The amount of interleukin (IL)-1, IL-1, IL-6, IL-8, and tumor necrosis factor (TNF)- in culture supernatant significantly increased in the LPS-treated cells compared with unstimulated-cells (P < 0.05). However, in LPS-stimulated PBMCs, cytokines level in CI patients group was higher than that of normal group. YST (1 mg/ml) significantly inhibited IL-1, IL-1, and IL-8 production in PBMCs stimulated with LPS (about 85% for IL-1, 87% for IL-1, and 53% for IL-8, P < 0.05), but did not significantly inhibit IL-6 and TNF- production in the CI patients group. We also show that YST significantly increased LPS-induced IL-1, IL-6, and TNF- production in the normal group. Thesedata suggest that YST has a regulatoryeffect on the cytokine production, which might explain its beneficial effect in the treatment of CI.
Objective : This study was performed to evaluate the effect of immune reaction inductive substances such as PMA, LPS, DPE, DNCB and WP, the whitman pigra extracting substance at simultaneously on the translocation of $NF{\kappa}B$ towards to the nucleus and the mRNA expression patterns of various cytokine genes in THP-1 cells, monocytes of human. Methods : To analyze the cytokine genes expressions, the RT-PCR method was used, and measuring TNF-${\alpha}$ that had been secreted during cell culture by the ELISA method. The morphological changes were observed during THP-1 cell by a scanning electron microscope and the quantitative distribution of $NF{\kappa}B$ in the cell that was analyzed through immunocytochemistry and a confocal microscopy. Results : WP showed different influences onto the mRNA expression patterns of cytokine genes with PMA, LPS. DPE and DNCB according to the types of immune inductive substances in the THP-1 cells. Upon treating PMA and DPE on the THP-1 cells at the same time or either additionally treating WP thereon, the movement of $NF{\kappa}B$ increase towards the nucleus from cell cytoplasm was able to be observed. The expressions of IL-$1{\alpha}$ and IFN-${\gamma}$ induced by PMA and PMA+DNCB were suppressed by WP while the expression of TGF-${\beta}$ was promoted. Regarding the secretion pattern of TNF-${\alpha}$ according to the treatment of PMA, its secretion amount was incredibly increased by concurrent treatment of WP, however, in case of co-treatment of WP with PMA and DNCB, it was found that the secretion amount of TNF-${\alpha}$ decreased. Conclusions : In this study, the WP extracting substance was confirmed that it had an influence on expression patterns of cytokine genes according to the actions of a variety kinds of immune reaction inductive substances treated on the THP-1 cells. Especially, WP co-treatment with PMA and DNCB was suppressed the expression of inflammatory cytokines, such as IL-$1{\alpha}$, IFN-${\gamma}$ and TNF-${\alpha}$.
생체 내 실험에서 발효 인삼꽃 추출물(FM), 발효하지 않은 인삼꽃 추출물(FD)과 대조군으로 생리식염수를 2주간 마우스 체중 kg 당 100, 200 mg/kg B.W.의 농도로 마우스에 경구 투여한 후 LPS에 의해 활성화된 복강 대식세포가 분비하는 염증성 사이토카인 IL-6, TNF-${\alpha}$의 생성량을 측정하였다. 그 결과, IL-6는 발효 LPS로 자극한 경우, 두 가지 농도에서 모두 처리한 군에 비해 높은 증식능을 나타내었고, LPS로 자극한 결과, 특히 발효 인삼꽃 추출물 200 mg/kg B.W. 농도에서 유의적으로 낮은 IL-6 분비량을 보였다. TNF-${\alpha}$의 경우, 100 mg/kg B.W.와 200 mg/kg B.W. 두 농도 모두에서 LPS로 자극하지 않은 경우, 낮은 증식 효과를 보여주었고, 자극한 경우, 인삼꽃 시료를 첨가한 군이 대조군보다 낮은 TNF-${\alpha}$ 분비량을 보였으며, FM에서 FD보다 더 TNF-${\alpha}$를 억제하는 효과가 큰 것을 볼 수 있었다. 이상의 결과에 따르면 FD의 사이토카인 IL-6, TNF-${\alpha}$ 생성 효과는 200 mg/kg B.W. 농도 투여 시 효과적으로 면역 세포와 면역 기관의 주요 기능을 증진시킬 가능성이 있을 것으로 사료된다. 이러한 연구결과를 토대로 앞으로 인삼꽃 발효를 이용한 기능성 사료 개발과 더불어 산업적 측면에서 보다 긍정적인 효과를 얻을 수 있을 것으로 판단된다.
In vitro 실험을 통한 가시오가피 물 추출물 첨가가 마우스의 면역세포 증식에 미치는 영향에 대한 연구 결과, 음의 대조군에 비해 가시오가피 물 추출물을 첨가한 모든 농도에서 비장세포 증식능이 증가하였으며, 특히 고농도인 $500{\sim}1,000{\mu}g/mL$ 농도에서 유의적으로 증가하였다. 반면, 복강 대식세포로부터 유도된 사이토카인 생성의 경우, IL-2, IFN-${\gamma}$, TNF-${\alpha}$ 사이토카인 생성량을 측정한 결과, TNF-${\alpha}$ 사이토카인은 가시오가피 물 추출물 $50{\mu}g/mL$ 농도와 $250{\sim}1,000{\mu}g/mL$ 농도에서 대조군보다 유의적으로 높은 분비량을 보인 반면, IFN-${\gamma}$에서는 변화를 보이지 않았다. IL-2의 경우, $100{\sim}500{\mu}g/mL$에서 유의적으로 증가하는 경향을 보여주었다. 이상의 결과에 의하면 가시오가피 물 추출물은 마우스 비장 세포를 증식시키고, 사이토카인 분비량에도 영향을 줄 것으로 보이며, 면역 기관의 주요 기능을 증진시킬 가능성이 있을 것으로 사료된다. 따라서 가시오가피 물 추출물이 면역 증진 기능성식품 개발의 소재로 활용될 가능성이 있을 것으로 기대된다.
본 연구에서는 표고버섯(Lentinula edodes)을 자외선 조사를 통한 ergocaciferol (비타민 D2) 함량을 증진시킨 추출물을 이용하여 염증 및 알레르기 반응에 미치는 효과를 확인하였다. 표고버섯 추출물의 항염증 및 항알레르기 효능은 LPS로 활성화된 대식세포(RAW 264.7)와 PMA와 A23187에 의해 활성화된 비만세포(RBL-2H3)로부터 분비 또는 발현되는 TNF-α, IL-6, IL-1β, IL-4와 같은 cytokine과 histamine 분비량을 측정하여 관찰하였다. LPS에 의해 활성화된 대식세포에서 자외선 조사 표고버섯 추출물 처리에 의해 pro-inflammatory cytokine인 TNF-α와 IL-6의 분비량을 ELISA 방법으로 측정하였을 때 현저히 감소함을 확인하였고 mRNA 발현 또한 감소됨을 확인하였다. 비만세포에 자외선 조사 표고버섯 추출물과 PMA, A23187을 함께 처리한 경우 비만세포의 탈과립에 의해 분비되는 histamine의 양이 유의적으로 감소함을 확인하였고 IL-4의 발현양 또한 감소함을 확인할 수 있었다. 이상의 결과는 자외선 조사에 의해 비타민 D2 함량을 증진시킨 표고버섯 추출물이 염증과 알레르기 반응의 cytokine의 발현을 저해하는 것으로 보아 염증 및 알레르기 질환의 예방과 치료에 효과적으로 이용될 수 있을 것으로 사료된다.
Stems and roots of Acanthopanax koreanum Nakai were extracted with water and treated on immune cells in order to determine their immunomodulatory activites. Various Th-1 type cytokines were measured using ELISA including interleukin (IL)-2, IL-12, interferon-gamma (IFN-$gamma$), and tumor necrosis factor-alpha (TNF-$\alpha$) secreted by dendritic cells, T-cells, intestinal epithelial cells, natural killer cells, and macrophages. As a result, there was a significant increase in IL-12 and IFN-$\gamma$, secretion, but there was no change in the secretion of TNF-$alpha$. Additionally T-cells slightly increased the secretion of IL-2, but there was a significant increase of IL-2 in intestinal epithelial cells. Therefore, our results suggest that A. koreanum Nakai may act as an immunomodulator by stimulating the cell-mediated immunity which can help the immune system defend against infections or cancer cells.
The purpose of this research is to examine the effects of Scutellariae Radix(SR) extract on cytokines in ovalbumin (OVA)-induced asthmatic mice. In vivo, C57BL/6 mice were sensitized and handicapped by OVA for 12 weeks. During this experiment, the one group was then treated with SR extract for the later 8 weeks (3 times per week) and analyzed by ELISA. There were significant decreases in IL-4(p<0.05), IL-5(p<0.05), IL-13(p<0.01), histamine(p<0.05) in serum of SR group. IgE also decreased, but was not significant compared with that of control group. The results of this study support a role for SR as an effective treatment for asthma in its experimental success in significantly decreasing inflammation and asthma reactions.
목 적: 혈청 B형 간염 바이러스 표면 항원(HBsAg)이 양성인 만성 보유자 35명에서 혈청 Th1계 싸이토카인(IL-2, TNF-${\alpha}$ 및 IFN-${\gamma}$)과 Th2계 싸이토카인(IL-4와 IL-10)을 측정하여 만성 B형 간염 바이러스 감염 환자의 병태에 따른 싸이토카인의 변화를 구명하고자 하였다. 방 법: 대조군은 항 HBs 항체 양성인 정상 소아 7명이었고 환자군 35례중 HBeAg 양성군은 20례, 항 HBe 항체 양성군은 15례이었으며 간 조직검사를 시행한 19례중 만성 지속성 간염은 10례, 만성활동성 간염은 9례이었다. 말초 정맥혈로부터 혈청을 분리하여 aminotransferase, B형 간염 바이러스 표지자 검사 및 ELISA로 싸이토카인(IL-2, TNF-${\alpha}$, IFN-${\gamma}$, IL-4 및 IL-10)을 측정하였다. 결 과: 1) HBe 항원 양성인 환자에서 항 HBe 항체 양성인 환자에 비해 그리고 만성 활동성 간염 환자에서 지속성 간염 환자에 비해 의의 있게 혈청 AST와 ALT치가 높았다. 2) HBe 항원 양성인 환자에서 항 HBe 항체 양성인 환자에 비해 IL-10이 의의 있게 높았다. 3) 만성 활동성 간염 환자에서 지속성 환자에 비해 통계학적인 의의는 없었으나 측정한 모든 싸이토카인이 높은 경향을 보였다. 4) 혈청 아미노전이 효소치가 100 U/L 이상인 환자에서 IL-2, TNF-${\alpha}$, IFN-${\gamma}$ 및 IL-10이 높은 경향을 보였고 혈청 아미노전이 효소치가 정상인 환자에서 효소치가 높은 환자에 비해 IL-4가 높은 경향을 보였다. 결 론: Th2계 싸이토카인인 IL-10의 증가는 간염의 활성도보다는 HBe 항원의 지속성과 관련이 있고 Th1계의 싸이토카인인 IL-2, TNF-${\alpha}$ 및 IFN-${\gamma}$는 간염의 활성도 증가와 관련이 있음을 시사하였다.
연구배경: 기관지천식은 호산구성 기도내 염증반응을 특징으로 하는데 호산구의 침윤에 관여하는 cytokine으로 T 림프구에서 분비되는 IL-3, IL-5, GM-CSF 등이 잘 알려져 있다. 한편 IL-10은 항염증성 cytokine으로 이러한 cytokine 분비를 억제할뿐만아니라, 호산구에 대해서는 직접적으로 자사(apoptosis)를 유도하고 조직내 첨착을 억제하는 기능을 갖고 있다. 본 연구에서는 기관지천식 환자에서의 기관지폐포세척액과 말초 혈액단핵세포에서 분비되는 IL-10을 정상대조군과 비교하고 기도내 염증반응정도와의 연관성을 분석하여 기관지천식에서의 IL-10 역할을 알아보고자 하였다. 방 법: 기관지천식환자 23명, 정상대조군 11명을 대상으로 기관지폐포세척액내와 말초혈액단핵구에서 분비되는 IL-10을 ELISA 방법으로 측정하고, 기도의 염증반응정도는 기관지세포세척액내 총세포수 및 호산구분율과 기관지 생검조직내 호산구 침윤정도, methacholine 기관지유발 검사에서 $PC_{20}$값으로 평가하였다. 결 과: 기관지폐포세척액내 IL-10과 말초혈액단핵구에서 분비되는 IL-10은 기관지천식 환자군과 정상대조군 사이에 통계적으로 유의한 차이는 없었다. 기관지천식환자군에서 기관지폐포세척액내 IL-10은 기관지폐포세척액내 호산구분율 및 기관지 조직내 침윤된 호산구수와는 유의한 역상관관계를 보였고, 메타콜린에 대한 PC20에 따른 차이는 없었다. 말초혈액단핵구에서 분비되는 IL-10은 기관지폐포세척액내 IL-10과 상관 관계가 없었으며, 말초혈액내 호산구수나 eosinophilic cationic protein과도 유의한 상관관계가 없었다. 결 론: 기관지천식 환자군의 기관지폐포세척액내 IL-10은 기관지폐포세척액이나 기관지 조직내 호산구 침윤과 역상관관계를 보였지만, 정상대조군과 비교해서 IL-10 감소가 관찰되지 않았기 때문에 기관지천식에서는 항염증 효과가 있는 IL-10이 중요하게 작용하지 않을 것으로 생각된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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