It has been reported that glomerulosclerosis mediated by the dysfunction of mesangial cells and insulin-like growth factors (IGFs) are associated with the development of diabetic nephropathy. However, it is not yet known the effect of high glucose on IGF-I, -II secretion, IGF-I receptor, and IGFBPs expression in the mesangial cells. Thus, this study was conducted to examine the effect of high glucose on IGF system and its involvement of protein kinase C (PKC) and oxidative stress in mesangial cells. In this study, high glucose (25 mM) increased IGF-I and IGF-II secretion and mRNA expression (P<0.05), which was blocked by PKC inhibitor (staurosporine, 10/sup -8/ M) and antioxidant (N-acetyl cystein, 10/sup -5/ M). High glucose decreased IGFBP-1 and -2 expression but increased IGFBP-5 expression. These alteration of IGFBPs by high glucose was also prevented by staurosporine and NAC, suggesting the role of PKC and oxidative stress. Indeed, high glucose increased PKC activity. Furthermore, high glucose-induced increase of lipid peroxide (LPO) formation was blocked by PKC inhibitors. In conclusion, high glucose alters IGF system via PKC-oxidative pathways in mesangial cells.
A Carboxymethyl Cellulase (CMCase) has been isolated and purified from the edible mushroom, Stropharia rugosoannulata. The molecular weight of CMCase was estimated to be 54 kDa by SDS polyacryl amide gel electrophoresis. The maximum activity of the purified CMCase was observed at pH 4.0 and $40^{\circ}C$, and stable for pH 3.0 to 11.0 to maintain 40% activity. The CMCase activity was activated by $AgNO_{3},\;MgSO_{4},\;and\;KCl$. However, its activity was inhibited by 1,10-phenanthroline, KCN and L-cysteine. Also, the enzyme activity was decreased by the addition of EDTA, suggesting that the purified CMCase is metalloenzyme.
Reduced thiols were important compounds for the maintenance of leukemia and lymphoma cell survival (and growth). In the course of examining the microenvirn-mental effects on lymphoma and leukemia cell growth, we found that cysteine suppressed apoptosis in these cells. In a present study, in order to investigate the role of cystein on the suppression of apoptotic cell death, we used CS21, P388, and L1210 cell lines. The addition of BSO, an inhibitor of glutathione synthase, induced apoptosis of these cells by blocking the cellular uptake of cysteine in CS21 cells. Although L1210 cells underwent apoptosis without thiol compounds, the addition of these compounds suppressed the apoptosis and promoted the growth or L1210 cells. When specific inhibitors of caspase3-like proteases, but not caspase1-like proteases, were activated during the L1210 cell apoptosis but the addition of thiol compounds suppressed the activation of caspase3-like proteases. These results suggest that reduced thiols including cysteine play an important role in the suppression of cell apoptosis by inhibiting the activation of caspase3-like proteases.
Proceedings of the Korean Society for Applied Microbiology Conference
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1986.12a
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pp.512.1-512
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1986
The cdd gene of Bacillus subtilis, encoding the deoxycytidinecytidine deaminase of pyrimidine nucleotide biosynthesis has been cloned into the EcoRl site of pBR322. The recombinant plasmid, pSol, promoted the synthesis of 100-140 fold elevated levels of the enzyme. A comparison of the polypeptides encoded by cdd complementing and non-complementing plasmids in the mini cell showed the gene product to have a molecular mass of approximately 14 kDa. The nucleotide sequence of the gene and 460 base pairs upstream from the coding region was determined. An open-reading frame, encoding a protein with a calculated molecular mass of 14337 Da, was deduced to be the coding region for cdd. However, the enzyme has an apparent molecular mass of 54 kDa as determined by gel filteration, whereas sucrose density gradient centrifugation shows 58 kDa. It means that the enzyme could be forming a tetramer in a physiological state. About 28 amino acids of the N-tetramer in a physiological state. About 28 amino acids of the N-terminal presumably form a signal for membrane translocation and six cystein residues are contained in the structure. S1 nuclease mapping indicated that transcription of cdd is initiated 17 base pairs upstream from the translational start. The structural characterization of the odd gene was performed.
Pectate lyase from alkalitolerant Bacillus sp. YA-14 is an endo-type pectate lyase which acts randomly at the $\alpha$-1, 4-galacturonan linkage, and requires calcium or strontium ions for its activity. The enzyme is active on low methyl esterified pectin, but the activity toward a high methyl esterified substrate is reduced. The apparent Km's of the enzyme toward sodium polygalacturonic acid, polygalacturonic acid, and various pectins such as apple pectin, citrus pectin, and genu pectin are 0.826 mg/ml, 0.685 mg/ml, and 1.14 mg/ml, respectively. The enzyme activity is inhibited by SDS, urea, and sodium azide, but not by various reducing reagents, such as $\beta$-mercaptoethanol, Na-thiosulfate, Na-sulfate, cystein, and L-ascorbic acid. The enzyme is inactivated by N-bromosuccinimide, $I_2, H_2O_2$. PMSF, and iodoacetate. Judging from the results of their inhibition types, we speculate that tryptophan and serine residues are directly involved in enzyme activity, while tyrosine and methionine residues are indirectly involved in its activity.
Chitobiase from Aeromonas salmonicida YA7-625 was purified from culture broth through ammonium sulfate precipitation, chitin affinity adsorption, hydroxylapatite column chromatography and gel filtration, with 47.2% yield and 31.5 fold purity. The molecular weight of purified chitobiase was 15,000 daltons, and the chitobiase showes maximum activity at the condition of at $40^{\circ}C$ and pH 6.0. The effects of various metal ions and inhibitors show thatcystein, glutamic acid, serine, tryptophan, and tyrosine residues seem to be concerned in chitobiase activity.
Physico-chemical analysis and sensory test of loin of lamb were carried out by four different methods such as grilling, pan-frying, oven-roasting and boiling. The crude fat content was all the same at three cooking methods except boiling. The moisture content was not different among grilling, pan-frying and oven-roasting. Hunter's color L-value(lightness) was lowest at grilling method. However, the heating loss appeared greatly at grilling. The hardness of the lamb-loin after cooking showed big differences with the control except boiling treatment. Amino acids in fillet contained highly in the order of glutamic acid > aspartic acid > cystein. The grilling showed a good value not only color of a sensory test but also the appearance. The oven-roasting cooking gave the tenderness and juiciness. The oven-roasting method showed good sensation to overall taste. Therefore, the oven-roasting (at $150^{\circ}C$ for 9 minutes) was suggested as the superior method when the loin of lamb is cooked for reducing off-flavour.
Water dispersible ZnS:Mn nanocrystals were synthesized by capping the surface of the nanocrystals with four kinds of aminoacids ligands: arginine, cystein, histidine, and methionine. The aminoacids capped ZnS:Mn nanocrystal powders were characterized by XRD, HR-TEM, EDXS, and FT-IR spectroscopy. The optical properties of the aminoacids capped ZnS:Mn colloidal nanocrystals were also measured by UV/Vis and solution photoluminescence (PL) spectroscopies in aqueous solvents. The solution PL spectra showed broad emission peaks around 575 nm (orange light emissions) with PL efficiencies in the range of 4.4 to 7.1%. The measured particle sizes for the aminoacid capped ZnS:Mn nanocrystals by HR-TEM images were in the range of 5.3 to 11.7 nm.
The studies on the potentiality of biomonitoring heavy metal pollution in coastal region of industrial complex were performed to investigate the heavy metal accumulation and induction of metal-binding protein (MBP) as detoxification process using Rumex maritimus. Bioconcentration in organs and MBP in root of R. maritimus was investigated for the research of the tolerance of heavy metals. The bioconcentration of cadmium and zinc in organs showed 3.6-8.0 times in root higher than in shoot, so it was found that heavy metal accumulated selectively in root. MBP increased absorbance in 254 nm and decreased in 280 nm, because it was composed of high cystein content and low aromatic acids, so absorbance had large difference between 254 nm and 280 nm. The existence of MBP in the 10-20 fraction was ascertained with anion exchange chromatography and it was identified that concentration of heavy metal increased according as an exposure concentration of medium increased in QAE Sephadex A-25 elution profile. These results suggested that MBP could play a role in biomarker determining the bioconcentration of plant. This study demonstrated a possibility that removal ability of heavy metal of R. maritimus resulted from detoxification process and MBP could be utilized as a biomarker of heavy metal pollution.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.26
no.3
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pp.422-429
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1997
For the complete and accurate amino acid determination of protein and food samples, 3 different hydrolysis procedures have been conducted in parallel for each sample, which include the alkaline hydrolysis for tryptophan determination, performic acid oxidation prior to the acid hydrolysis for the determination of cysteine and cystine, and the 6N HCl hydrolysis for the determination of the rest of amino acids. In the present study, amino acid concentrations obtained from the modified single hydrolysis procedure were compared with the values from the conventional hydrolysis procedures in casein and nine food and composite dish samples. In most of the samples tested, the modified single hydrolysis procedure gave significantly higher values of cysteins and cystein compared to the performic acid oxidation method, but resulted in a considerable destruction of tryptophan in food and composited dish samples. There was no consistent difference in the rest of amino acid concentrations between the two hydrolysis systems. Therefore, for complete amino acid determination of various foods and composite dishes, the single hydrolysis method may replace the 6N HCl hydrolysis and performic acid oxidation methods, and thereby reduces 3 hydrolyses to 2 steps with much higher recoveries of the sulfur containing amino acids.
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