The aims of the present study were to evaluate the effects of culture conditions on the biosynthesis of extra-cellular alkaline protease in Streptomyces sp. The formation of aerial mycelia and spores were compared with the protease production in order to know the relations between the alkaline protease and the cell differentiation. As results, it was found that substrate concentration was very critical to regulate the formation of the protease, aerial mycelia, and spores, which were resulted from the changes of culture pH to acid. When the culture pH was adjusted with phosphate buffer from pH 6 to pH 9, the alkaline protease production was increased as the culture pH increased whereas aerial mycelia and spore formation were reversely related to the culture pH. Therefore, it was thought that the culture pH was an important factor to regulate the alkaline protease synthesis.
I studied about temperature and pH concentration having influence upon chlorophyll decrease on the Glucose culture of Chlorella variegata Beijerinck(211/10a). I cultured under $25^{\circ}C$(standard), $15^{\circ}C$ and $35^{\circ}C$ and compared with each other. The culture of $15^{\circ}C$ didn't have any large difference with the standard culture($25^{\circ}C$) but the culture of $35^{\circ}C$ had a large amount of chlorophyll decrease without carbohydrate accumulation, stimulation of cell division and nitrogen-deficiency. Chlorella variegata had optimum pH 6.5-7 and was a little weak in all phenomenon under pH 8 rather than under pH 6.5-7. Under pH 5 they had deep chlorophyll decrease without phephytin.
Using Pseudomonas sp. CH-414, the optimum culture conditions were investigated for the cell growth and the phospholipid production in batch culture by varying pH and aeration rate. With starting the cultivation under the conditions of pH 7.0 and 1vvm, pH was controlled to 6 or 8 at 30 hours of culture time. In the case of changing into pH 6.0, the phospholipid production was increased by ca. 20% with comparison to the case of pH 7.0. However, the biomass and the phospholipld concentration were rapidly decreased after 30 hours of culture time when pH was controlled to 8.0. As the aeration rate was increased, the biomass was increased while the phospholipid concentration was considerably varied and unstable. Especially, the concentration of phospholipid was rapidly decreased with 3vvm of aeration rate. Finally, under the culture conditions of pH 7.0 and 3vvm until 30 hours for the cell growth, which were controlled to pH 6.0 and 1vvm for the stable production of phospholipid beyond that time, the dry cell weight was $18.5g/\ell$ and the phospholipid concentration was $\0.83g/ell$ (45mg/g cell).
Optimal culture conditions were characterized for production of crude biosurfactant of Bacillus subtilis JK-1. During incubation of B. subtilis JK-1, the bacterial growth pattern, changes of the surface tension at variable temperatures, pH and NaCl concentrations in bacterial culture medium were studied. The strain was able to grow and produce biosurfactant at $15-45^{\circ}C$, in the pH range of 6-10, and at 0-10% (w/v) NaCl. In case, culture broth pH was gradually changed to neutral or weak alkaline. Optimal culture conditions for crude biosurfactant production were at $35^{\circ}C$ and pH 7.0 after 48 h incubation and the surface tension of biosurfactant was 24.0 mN/m. Besides, as the concentration of NaCl was increased from 0 to 10% (w/v), the growth was decreased, pH of the culture broth was converted from weak alkaline to acidic, and the surface tension rised.
To investigate clonal variations of recombinant Chinese hamster ovary(rCHO) clones in response to culture pH and temperature, serum-free suspension cultures of two antibody-producing CHO clones(clones A and B), which were isolated from the same parental clone by the limiting dilution method, were performed in a bioreactor at pH values in the range of 6.8-7.6, and two different temperatures, $33^{\circ}C\;and\;37^{\circ}C$. In regard to cell growth, clone A and clone B displayed similar responses to temperature, although their degree of response differed. In contrast, clones A and B displayed different responses to temperature in regard to antibody production. In the case of clone A, no significant increase in maximum antibody concentration was achieved by lowering the culture temperature. The maximum antibody concentration obtained at $33^{\circ}C$(pH 7.4) and $37^{\circ}C$(pH 7.0) were $82.0{\pm}2.6$ and $73.2{\pm}4.1{\mu}g/ml$, respectively. On the other hand, in the case of clone B, an approximately 2.5-fold increase in maximum antibody concentration was achieved by lowering the culture temperature. The enhanced maximum antibody concentration of clone B at $33^{\circ}C$($132.6{\pm}14.9{\mu}g/ml$ at pH 7.2) was due to not only enhanced specific antibody productivity but also to prolonged culture longevity. At $33^{\circ}C$, the culture longevity of clone A also improved, but not as much as that of clone B. Taken together, CHO clones derived from the same parental clone displayed quite different responses to culture temperature and pH with regards antibody production, suggesting that environmental parameters such as temperature and pH should be optimized for each CHO clone.
To investigate the effects of Pichia anomala SKM-T and Galactomyces geotrichum SJM-59 on Baechu kimchi fermentation, lyophilized yeasts were added to Baechu kimchi and co-cultured at room temperature ($20{\pm}2^{\circ}C$) for 7 days. Desirable pH and acidity levels appeared by 3 days of fermentation in both the control culture and that with added G. geotrichum SJM-59. Furthermore, the culture with G. geotrichum SJM-59 sustained a desirable pH and acidity level until 5 days of co-culture. The pH of the culture with P. anomala SKM-T decreased slowly and was significantly higher than that of control throughout the experimental period. As fermentation time increased, the acidity of the culture with P. anomala SKM-T increased gradually. However, this culture maintained a desirable acidity level throughout the experiment. The number of lactic acid bacteria in the culture with P. anomala SKM-T was higher than in the culture with G. geotrichum SJM-59, or the control culture, throughout the experiment. The highest LA/TM ratio appeared after 3 nays of fermentation in the control culture, and on the 5 day of the yeasts added co-cultures. On sensory evaluation, no differences were detected between control and the culture with G. geotrichum SJM-59 arter 3 days of fermentation. The co-cultures with yeasts received high marks in umami taste. The co-culture with P. anomala SKM-T showed better texture properties than did the control culture. It was considered that fermentation times were delayed by addition of G. geotrichum SJM-59 or P. anomala SKM-T to Baechu kimchi fermentation.
The effect of pH on the fermentation characteristics and the formation of cis-9, trans-11 conjugated linoleic acid (CLA) and trans-11 octadecenoic acid by mixed ruminal bacteria was examined in vitro when incubated with linseed or rapeseed. Concentrate (1%, w/v) with ground linseed (0.6%, w/v) or rapeseed (0.5%, w/v) was added to 600 ml mixed solution of strained rumen fluid with artificial saliva (1:1, v/v), and was incubated anaerobically for 12 h at $39^{\circ}C$. The pH of culture solution was maintained at level close to 4.5, 5.3, 6.1 and 6.9 with 30% $H_2SO_4$ or 30% NaOH solution. pH increment resulted in increases of ammonia and total volatile fatty acid (VFA) concentration in culture solutions containing both oilseeds. Fermentation did not proceeded at pH 4.5. Molar proportion of acetate decreased but that of propionate increased as pH increased when incubated with oilseeds. While the hydrogenating process was very slow at the pH range of 4.5 to 5.3, rapid hydrogenation was found from the culture solutions of pH 6.1 and 6.9 when incubated with linseed or rapeseed. As pH in culture solution of linseed or rapeseed increases proportions of oleic acid (cis-9 $C_{18:1}$) and trans-11 octadecenoic acid increased but those of linoleic acid and linolenic acid decreased. The CLA proportion increased with pH in culture solution containing rapeseed but CLA was mostly not detected from the incubation of linseed.
The growth characteristic of a predominant planktonic blooming species, Mallomonas elongata in a small shallow eutrophic pond was investigated In the field (from October 2004 to September 2005) and laboratory, Dense blooming (max. 17,600 cells $mL^{-1}$) of this silica-scaled chrysophytes was observed for a short time period in early spring (water temperature 12-$18^{\circ}C$ and pH 8.4-9.5), The growth characteristics of M. elongata isolated from this pond was investigated at various temperatures and pH under batch culture. The unialgal culture of M. elongata showed maximum growth rate (${\mu}max$) at $15^{\circ}C$ similar to the natural conditions. However, the optimal pH of the isolated batch culture was lower than the pond water pH at which M. elongata appeared in large population density.
A culture system for lactating rat mammary acini was evaluated, where the primary indicator of performance was lactose secretion, measured by a sensitive bioluminescence assay. Lactose secretion was reduced by half (p<0.01) over the first 6 h of culture by overnight feed withdrawal (FW) from tissue donors but was sensitive to increased glucose concentration in the culture media (p<0.001) up to 30 mM. Lactose production of cells from fed donors over the first 6 h in culture in 30 mM glucose was 8.9 fmol/cell/h - a rate calculated to be about half that in vivo. No significant difference was shown in lactose secretion by cells from fed or FW rats over 6-24 h. Lactose secretion was 3.6 fmol/cell/h by cells from fed animals in 40 mM glucose concentration media over the 6-24 h culture period. Addition of insulin to the culture media had no effect on rates of lactose secretion while addition of prolactin and hydrocortisone, with or without insulin, significantly (p<0.001) decreased lactose production over both 0-6 h and 6-24 h culture periods. Lactose synthesis in vitro was significantly enhanced by aeration of the media during collagenase digestion of mammary tissue (p<0.05). No improvement in lactose secretion was effected by shaking of cells during culture, Matrigel coating of culture dishes or change in cell density over a range up to 2.5 million cells per ml.
This experiment was carried out to find out proper culture soil for the flowerpot cultivation of Sedum kamtschaticum. Peatmoss was used for the culture soil. pH of the culture soils were adjusted to 4.5, 5.0, 5.5 and 6.0 using calcium hydroxide. Young plants of Sedum kamtschaticum were planted in the pots of 10cm in diameter. The experiment was conducted by the completely randomized design with 3 replications. Growth characteristics were investigated at intervals of 30 days after planting. As the pH of culture soil is lower, growth of Sedum kamtschaticum showed longer plant height and more number of leaves and branches. pH 4.5 to 5.0 appeared to be optimum range as soil reaction of Sedum kamtschaticum cultivation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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