Lentinula edodes liquid spawn growth under explosive aeration (supplying air with tiny bubbles) and soybean meal addition to liquid culture medium were investigated in terms of mycelial growth and residual free sugar content. The two treatments were effective for homogeneous culturing of mycelial spawn and for separating colonies during multiplication after an exponential growth period without limiting sustaining nitrogen nutrients. The mycelial growth and carbon dioxide concentration were greatest on the 13th day since the inoculation. At 12th day, however, free sugars were almost depleted in the upper part of the liquid medium. Total nitrogen content within precipitated mycelia was the highest at the 13th day. Chitin and sucrose contents in the mycelia were the highest at the 18th day, but ergosterol content became highest at 22 days. These results suggest that Lentinula edodes liquid spawn is ready in 18 days after inoculation.
To evaluate the efficiency of anther floating culture according to the maturing group, the varietal difference and classification of fifty varieties was conducted in N6 liquid medium containing 1mg $l^{-1}$ NAA, 0.25 mg $l^{-1}$ kinetin. The efficiency of callus induction was widely ranged from 0 to 113.4%, but the mean callus induction was not significantly different among maturing groups. The efficiency of anther floating culture showed the highest variation in early-maturing group among three maturing groups. The varieties with the best callus induction were Sambaegbyeo and Jinbuolbyeo, while the recalcitrant variety was Obongbyeo in early-maturing group. The efficiency of plant regeneration showed the highest trends in late-maturing group among three maturing groups. The fifty varieties were classified into three groups (distance=0.78) by cluster analysis based on the callus formation and plant regeneration. Group including only two varieties, Shinunbongbyeo and Sambaegbyeo had the excellent androgenic efficiency, and the medium efficiency of Group was included thirty-six varieties. Whereas twelve varieties, including three Tongil varieties were fell into the bad efficiency of Group. Especially, Tongil varieties containing Japonica rice, Obongbyeo were the recalcitrant genotypes for the anther floating culture.
To develop an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for detecting mold, we produced anti-mold polyclonal antibodies by immunizing extracellular polysaccharide (EPS) of Aspergillus flavus or Penicillium citrinum in rabbits subcutaneously. Using the purified antibody (Ab) and Ab-HRP conjugate, a sandwich ELISA for EPS was established. The standard curve of the ELISA showed the detection limit for P citrinum EPS to be $0.003{\;}\mu\textrm{g}/ml$. The cross-reactivities of the anti-P citrinum EPS Ab toward components of P citrinum such as EPS, liquid, and solid culture mycelium were 100, 10.5, and 0.58%, respectively, and those toward components of A. flavus such as EPS, liquid and solid culture mycelium, and spore were 300, 0.67, 0.29, and 0%, respectively. When the reactivities toward culture broths of 59 mold strains were tested by the sandwich ELISA, most of the Aspergillus (16 of 18) and Penicillium (14 of 16) strains along with one of the two Cladosporium strains gave positive signals in the culture broths even when diluted 1,000 fold, while the rest of species such as Fusarium, Absidia, Alternaria, and Candida gave negative signals. When the water extracts of 30 corn samples were analyzed by the sandwich ELISA, the EPS in the com could be detected in the concentration range of $0.1-1.6{\;}\mu\textrm{g}/g$.
The effect of thinned fruits, apple, pear and peach, on the mycelial growth of mushrooms was investigated. The growth of mycelia with the addition of thinned fruit was clearly better than that in the control for all the tested mushrooms. The growth rate of Pleurotus ostreatus was faster than any other mushroom. The optimal concentrations of thinned apple, pear, and peach in a solid culture were 1.0%, 1.0%, and 3%, respectively, while in a liquid culture the optimal concentrations were 5,0%, 3.0%, and 5.0%, respectively. When Pleurotus ostreatus was incubated in a 20-L pilot scale fermenter with 10 L of a liquid medium containing 3% thinned fruit at 25$^{\circ}C$ and 6 vvm for 10 days, the mass-production of mycelia was 74.2 g/10 L (apple), 96.2 g/10 L (pear), and 86.3 g/10 L (peach). The mycelial yield of Pleurotus ostreatus in a medium containing thinned fruit was 2 ∼ 3 times higher than that in the control.
The principal objective of this study was to determine the optimal liquid culture conditions in shake flasks for maximal sporulation of Beauveria bassiana. The optimal initial pH for the spore production of B. bassiana using Potato Dextrose Broth was 5.2. The screening in shake flasks of carbon and nitrogen sources resulted in the identification of an optimal medium based on 3% sucrose and 1% casamino acid, with a C : N ratio of 22 : 4. Using this medium, a production level of $5.65{\times}10^7$ spores per ml was obtained after 5 days of culture. Using 3% corn meal, 2% corn steep powder, and 2% rice bran, the maximum spore concentration of $8.54{\times}10^8$/ml was achieved 8 days after inoculation at $25^{\circ}C$ in a rotary shaking incubator operated at 200 rpm. This represents a yield gain of approximately 2.89 times that of pre-optimization.
The culture filtrate of Lentinula edodes shows potent antimicrobial activity against the plant pathogenic bacteria Ralstonia solanacearum. Bioassay-guided fractionation was conducted using Diaion HP-20 column chromatography, and the insoluble active compound was not adsorbed on the resin. Further fractionation by high-performance liquid chromatography (HPLC) suggested that the active compounds were organic acids. Nine organic acids were detected in the culture filtrate of L. edodes; oxalic acid was the major component and exhibited antibacterial activity against nine different phytopathogenic bacteria. Quantitative analysis by HPLC revealed that the content of oxalic acid was higher in the water extract from spent mushroom substrate than in liquid culture. This suggests that the water extract of spent L. edodes substrate is an eco-friendly control agent for plant diseases.
This study was carried out to find the optimum condition for production of fusarin C, Known as a mutagenic and toxic agent. Three liquid media, Czapek-kox, MYRO, GYEP and microorganism, Fusarium moniliforme F84 isolated by Bjeldanes lab. in U.C. Berkeley, were used in this experiment. Fusarin C amounts were determined upon PH and fluctuating time/temperature. The results were obtained as follows; 1. The largest amounts of fusarin C were shown in Czapek-Dox medium and the amounts were about 1/10 of fusarin C amounts in corn culture. 2. In Czapek-Dox medium, the best condition for fusarin C production was at $28^{\circ}C$ for 2 weeks culture, and in corn culture, at $28^{\circ}C$ for l week culture. 3. The best initial PH for fusarin C production was 6.5 in Czapek-Dox medium and also at the initial pH 6.3, 5.9 the fusarin C amounts produced were much higher than other initial PH.
The optimum cultural conditions for production of red pigment from Monascus rubber KCTC 6122 is liquid culture were studied. Monascus robber KCTC 6122 was shown to give the maximum production of red pigment in the medium containing 4% rice powder, 0.2% NaNO$_3$, 0.3% Na$_2$HP0$_4$ and 0.15% MgSO$_4$. The optimum culture conditions, temperature, initial pH and shaking speed were 30$^{\circ}C$, 6.5 and 150 rpm, respectively. The red pigment production reached a maximum level at 8days of cultivation.
Claudiu Magioli;Ana Paula Machado da Rocha;Pinheiro, Marcia-Margis;Martins, Gilberto-Sachetto;Elisabeth Mansur
Journal of Plant Biotechnology
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v.2
no.1
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pp.43-49
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2000
An efficient and reliable Agrobacterium transformation procedure based on TDZ (thidiazuron)-induced organogenesis was established and applied to six Brazilian eggp1ant varieties. Optimum transgenic plants recovery was achieved upon the study of the following parameters affecting transformation efficiency, using F-100 variety as a model: i) explant source; ii) pre-culture period; iii) physical state of the pre-culture medium and iv) coculture conditions. The highest frequency of kanamycin-resistant calli derived from leaf explants (5%) was obtained without a pre-culture period and co-cultivation for 24 h in liquid medium followed by five days on solid RM (regeneration medium). For cotyledon explants, best results were achieved upon a pre-culture of 24 h in liquid RM and a co-cultivation period of 24 h in liquid RM followed by three days in solid RM, resulting in a transformation Sequency of 22.7%. Kanamycin-resistant organogenic calli were also obtained from cultivars Emb, Preta Comprida, Round nose Shaded, Campineira and Florida Market. The expression pattern of an epidermis-specific promoter was studied using transformants expressing a chimaeric construct comprised by the promoter Atgrp-5 transcriptionally fused to the coding region of the gus gene. The expression pattern was similar to that previously observed in tobacco and Arabidopsis thaliana, with preferential expression at the epidermis and the stem phloem. These results support the idea that the Atgrp-5 promoter can be used to drive defense genes in these tissues, which are sites of pathogen interaction and spread, in programs for the genetic improvement of eggplant.
Kim, Jin-Woo;Cheon, Woo-Jae;Chai, Kyung-Hee;Kim, Dong-Gwan;Son, Sung-Ho;Kim, Jong-Guk;Lim, Hee-Jae
Journal of Life Science
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v.22
no.2
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pp.200-208
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2012
The characteristics of mycelium growth of Sparassis crispa KGFS08 and KFRI746 in liquid culture were investigated. The optimum growth of the mycelium of S. crispa was observed in the KTM medium. The best carbon source was starch. In terms of nitrogen sources, tryptone affected mycelial growth in the liquid culture. The optimal culture conditions were pH 4.0-5.0 in STK medium [3% (w/v) starch, 0.3% (w/v) tryptone, 0.1% (w/v) $KH_2PO_4$, and 0.1% (w/v) folic acid].
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[게시일 2004년 10월 1일]
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