For the improvement of productivity of Pleurotus ostreatus, the production of liquid spawn was studied. The highest liquid spawn production was obtained after shaking culture for 4 days in the culture medium containing 5%(W/V) wheat flour, 0.2%(W/V) yeast extract, 0.1%(W/V)$KNO_3$ 0.05% (W/V) $MgSO_4{\cdot}7H_2O$, 0.05%(W/V) $KH_2PO_4$. The optimum pH and temperature was 7.0 ana $30^{\circ}C$. The period required to complete the mycelial growth after spawning were 28, 22, 10 and 9 days, respectively, when the 2%(V/V) of solid spawn and 2%(V/V), 5% (V/V) and 10%(V/V) of liquid spawn were inoculated. The days required from spawning to fruiting bodies were 38, 34, 28 and 27 days.
두릅나무의 엽병을 1.0 mg/L 2,4-D가 포함된 MS 고체배지에서 배발생캘러스를 유도하였다. 배발생세포와 배발생세포괴는 1.0 mg/L 2.4-D가 포함된 MS 액체배지에서 배발생캘러스를 2주간 현탁배양하여 대량으로 얻었다. 그물망을 통과한 배발생세포는 1.0 mg/L 2.4-D가 포함된 MS 액체배지에서 배양하면 배발생능이 소실되지 않고 지속적으로 유지 및 증식시킬 수 있었다. 그물망을 통과하지 못한 배발생세포괴를 식물생장조절물질이 첨가되지 않은 1/2 MS 액체배지에 옮겨 2주간 배양하면 구상형의 체세포배로 발달하였다. 구상형의 체세포배는 5 L의 bioreactor를 이용하여 배양하면 심장형, 어뢰형, 자엽형의 배와 유식물체로 발달하였다. Bioreactor 배양을 통해 두릅나무의 체세포배를 효과적으로 대량증식 시킬 수 있었다.
Two new unusual soyasaponins named 6"-O-methyldehydrosoyasaponin I(7) and desglucosylsoyasaponin $A_1$ (10) along with eight known saponins, dehydrosoyasaponin IV (1), dehydrosoyasaponin III (= impatienoside A) (2), soyasaponin III (3), dehydrosoyasaponin II (= soyasaponin Bg) (4), soyasaponin II (5), dehydrosoyasaponin I (= soyasaponin Be) (6), soyasaponin I (8), and kudzusaponin $SA_3$ (9), were isolated as their methyl esters and identified from the liquid culture of G. applanatum. Their structures were determined by chemical and spectroscopic analyses including 1D- and 2D-NMR as well as by comparison of their spectroscopic data with those of the reported in literatures. Although dehydrosoyasaponin IV was identified by LC-MS/MS method from soy protein isolate, this is the first report of the isolation of this compound. Dehydrosoyasaponin III (2) and kudzusaponin $SA_3$ (9) were also isolated for the first time from soybean. The presence of soyasaponins in Ganoderma species seems to be unusual feature. Thus, we presumed that compounds 1-10 might all be derived from the defatted soybean flour which was added to the culture medium as a nitrogen source.
1차 액체배양액과 2차 pellet 배지로 이루어지는 대량배양체계의 다른 곤충병원성 곰팡이인 Beauveria bassiana, Beauveria brongniartii, Metarhizum anisopliae, Verticillium lecanii 등에 대한 효용성을 조사하기 위하여 단균사 및 분생포자의 성장율을 비교하였다. 그 결과, 액체배양액에서 단균사의 성장율은 접종 후 72시간에 그 수가 최초 접종수에 비해 103-104배까지 증가함을 확인할 수 있었으며, pellet 배지에서 분생자의 수는 접종 후 3주 째에 103배까지 증가됨을 확인할 수 있었다. 본 실험의 결과 진균의 대량배양을 위해 선발된 1차 액체배양액과 2차 pellet 배지는 여러 곤충병원성 진균의 성장에 효율적인 체계임을 확인할 수 있었다.
백합의 건전 우량주의 확보와 대량 증식을 위해 소인편을 배양하여 얻어진 직경 3mm 정도 크기의 소인경구를 사용하여 액체배양을 실시하였다. 인경구의 생장에 미치는 sucrose와 질소 농도의 영향을 알아본 결과 인경구의 생장과 무게에 가장 효과적인 처리구는 10 mM $NH_4NO_3$에 sucrose 9% 또 는 20 mM $NH_4NO_3$에 sucrose 6%인 것으로 나타났으며, 새로운 소인경구의 분구는 $NH_4NO_3$, 20 또는 40 mM에 sucrose 3%에서 가장 양호하였다. 또한 전체 생체중은 광도 $60\;{\mu}mol{\cdot}m^2{\cdot}sec^{-1}$ BA 0.2 mg/L 단독 처리구에서 효과적이었으며, 구중은 BA에 농도에 큰 차이없이 0.2와 2 mg/L 처리에 광도 $60\;{\mu}mol{\cdot}m^2{\cdot}sec^{-1}$에서 증가하는 경향을 보였다. 액체 진탕배양에 적절한 소인경구의 배양기간은 2개월 정도인 것으로 나타냈다.
Background: The isolation of non-tuberculous mycobacteria (NTM) has been increasing in South Korea. To date, however, the cause of this increase has not been determined, and it remains unclear whether the use of liquid media has contributed to this increase. The aim of this study was to evaluate the factors associated with NTM isolation and the impact of liquid media on NTM culture. Methods: Mycobacterial smear/culture results of respiratory specimens (sputum and bronchial aspirates), obtained during the years 2002, 2005, and 2010, were retrieved and analyzed retrospectively. Results: During the years 2002, 2005, and 2010, 83,096 sputum specimens were collected from 31,104 patients, and were cultured for mycobacteria, using solid media only in the 2002 and 2005 specimens and both solid and liquid media in the 2010. Of these, 3,516 (4.2%) specimens were smear-positive for acid-fast bacilli (AFB). The annual rate of NTM among positive culture specimens increased from 21% in 2002 to 57.8% in 2010 (p<0.001), as did the proportion of NTM, among AFB smear- and culture-positive specimens, from 12.2% in 2002 to 45.2% in 2010 (p<0.001). In 2010, the NTM culture rate was higher in the liquid than in the solid media (13.9% vs. 8.4%, p<0.001). The NTM rate among AFB-positive specimens was higher in patients aged >50 than ${\leq}$50 years. Conclusion: The rate of NTM isolation has steadily been increasing at the hospital in South Korea, likely due in part to the use of liquid media for the culture.
Various parameters such as solvent selection, concentration, solid/liquid ratio, soaking time, temperature, stationary, shaking conditions, and repeated extractions were investigated in order to determine the optimum extraction conditions of ${\beta}$-glucosidase from bagasse fermented by mixed culture of Aspergillus niger NRC 7A and Aspergillus oryzae NRRL 447. Among various solvents tested, non ionic detergents gave the best results than the inorganic or organic salt solutions and distilled water. The optimum conditions for extraction of ${\beta}$-glucosidase were 30 min soaking time at $40^{\circ}C$ under shaking condition at 150 rpm, with solid/liquid ratio 1:15 (w/v), which yielded $2882.74{\pm}95.52U/g$ fermented culture (g fc) of enzyme activity. With repeated washes under the above optimum conditions, the results showed that enzyme extracted in the $1^{st}$ and $2^{nd}$ washes represents about 90% of the total activity.
Irradiation with high doses of gamma rays induced the reduction of mycelial weight and anaylase activity, and increased relative amylase activity in surface cultures. Biphase in growth curves was shown in aeration-agitation cultures but the behavior of the first phase of growth could be eliminated by replacing the amylasehydrolysed starch substrates, so that enzyme production was shortened ca. 40 hours and relative amylase activity was increased about 3 times higher before onset of autolysis. In the effect of gibberellin on amylase production, the positive stimulation was appeared to only surface culturs of the liquid medium and the negative effect to shake-cultures in a mutant. Trials of various continuous culture were resulted not only the approalch to the value of amylase activity in surface cultures of liquid medium, but also higher productivity than in batch cultures. The culture-degeneration was observed in two-stage continuous culture, but did not appear in continuous elevation culture.
Effects of various preservation periods and subcultures on fruiting body formation of Cordyceps militaris were investigated using EFCC C-10995 single ascospore strains. Fruiting body formation by original strains was profuse when preserved at $4^{\circ}C$ for $5{\sim}6$ months. Fruiting from subcultures was stable till second to sixth subcultures, after which it decreased sharply. The more the colony color of subcultures changed, the less the fruiting bodies formed. Liquid inoculum preparation of single ascospore strains in the same or separate broths did not affect fruiting body formation. Similarly, two strains C-10995-3 and C-10995-6 in different numbers during liquid inoculum preparation produced similar fruiting bodies.
뽕나무가루 첨가 배지에서 배양한 느타리버섯균사체 배양물의 조추출물이 자유라다칼로 유도한 linloeic acid의 산화를 대조구에 비해 75.9% 감소시켰고, mouse liver microsome산화에서도 NADPH/Fe$^{++}$ system에서 64.3% 감소시켰다. 이와 같은 효과는 조추출물로부터 용매분획한 분획물의 단독 효과보다 우수하였다. 상황 및 동충하초버섯균사체 배양물의 조추출물도 느타리 버섯균사체 배양물의 조추출물과 효과가 유사하였지만 다소 낮았다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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