As a preliminary study for the explanation of pathobiology of Neodiplostomum seoulense infection. a 54 kDa protease was purified from the crude extract of adult worms by sequential chromatographic methods. The crude extract was subjected to DEAE-Sepharose Fast Flow column, and protein was eluted using 25 mM Tris-HC1 (pH 7.4) containing 0.05. 0.1, 0.2 and 0.4 M NaC1 in stepwise elution. The 0.2 M NaCl fraction was further purified by Q-Sepharose chromatography and protein was eluted using 20 mM sodium acetate (pH 6.4) containing 0.05, 0.1. 0.2 and 0.3 M NaCl, respectively. The 0.1M NaCl fraction showed a single protein band on SDS-PAGE carried out on a 7.5-15% gradient gel. The proteolytic activities of the purified enzyme were specifically inhibited by L-trans-epoxy-succinylleucylamide (4-guanidino) butane (E-64) and iodoacetic acid. The enzyme, cysteine protease. showed the maximum proteolytic activity at pH 6.0 in 0.1 M buffer, and degraded extracellular matrix proteins such as collagen and fibronectin with different activities. It is suggested that the cysteine protease may playa role in the nutrient uptake of N. seoulense from the host intestine.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.22
no.3
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pp.672-677
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2008
In order to explore the anti-oxidization effect of oriental medicine and cereal medium(OCM) where Tricholoma matsutake mycelia were cultured, measurement of hot water extract and UMPM(extraction method using ultra sonic waves, micro waves, micro bubble) extract, the total polyphenol content of crude polysaccharide from each extract, SOD-like activity, electron donating ability(EDA), xanthine oxidase inhibitory activity, and tyrosinase inhibitory activity was conducted. The total polyphenol content of each extract was found to be 16.36% for hot water extract(HE) group and 15.73% for UMPM extract(UE) group and the amount of crude polysaccharide precipitated into ethanol of extracts was found to be 8.79% for UMPM ethanol extract(UEE) group and 6.48% for hot water ethanol extract(HEE) group. As a result of measurement of SOD-like activity by concentration of each extract, it was found to be 96.17% for UE group, 91.23% for HE group, 91.33% for UEE group, and 87.11% for HEE group at 20 mg/mL. In the case of EDA, it was found to be 47.55% for UE group, 44.93% for HE group, 25.38% for UEE group, and 18.36% for HEE group. And in the cases of the rates of xanthine oxidase inhibitory activity and tyrosinase inhibitory activity, as the concentration of each extract increased, the inhibition rate increased accordingly. As a result of comparison between hot water extract method and UMPM extract method using extracts obtained from oriental medicine compound medium where Tricholoma matsutake mycelia were cultured, all of the extracts were judged to have a high anti-oxidization effect. In particular, UMPM extracts were found to have higher polyphenol content, SOD-like activity, EDA, xanthine oxidase inhibitory activity and tyrosinase inhibitory activity compared to hot water extract method. In this regard, extracts obtained from OCM where Tricholoma matsutake mycelia were cultured are considered to have high availability as functional material when and if they are prepared using UMPM extract method.
The anticancer activities of petroleum ether extract of Panax ginseng root(crude GX) and its partially purified fraction from silicic acid column chromatography (7:3 GX) were studied with Sarcoma 180(S-180) or Walker carcinosarcoma 256 (Walker 256) in vivo and with L1210 leukemic lympocyte in vitro. Potential cytotoxic activities of the crude GX and against L1210 cells were compared with those of 5-Fluorouracil (5-FU) and saponin derivatives (Panax-diol, Panax-triol, Diol saponin, Triol saponin) in vitro. In order to observe the physiological effects of the crude GX and 7:3 GX on the animals with cancer, hemoglobin(Hb), red blood cell(R.B.C) and white blood cell after treatment with each GX in comparison with corresponding control groups, respectively. The anticancer effects of the crude GX and 7:3 GX were estimated by measuring the survival time of S-180 bearing mice after treatment with them. The experimental results obtained are summarized as follows; 1. The one unit of cytotoxic activity against L1210 cells was equivalent to 2.54$\mu\textrm{g}$ and 0.88$\mu\textrm{g}$of the crude GX and 7:3 GX per ml of culture medium, respectively. 2. The cytotoxic activities of Panax-diol, Panax=triol, Diol saponin and triol saponin against L1210 cells were not detected. 3. The anticancer activities of 5-FU against L1210, S-180 and Walker 256 were very effective in vivo and vitro tests. 4. The significantly increased W.B.C values of mice after inoculation with S-180 cells were reduced to normal range by the crude GX treatment. 5. The significantly decreased Hb values of rats after inoculation with Walker 256 were recovered to normal range by oral administration of the crude GX. 6. The survival times of mice inoculated with S-180 cells were extended about 1.5 to 2 times by the 7:3 GX treatment compared with their control group.
As a part of studies on the quality control of crude drug preparation drinks, ginseng saponins were identified by HPLC. Ginsenoside-Rb1 was determined quantitatively by HPLC. Ginsenoside MeOH/H2O(65:35:10, v/v) on Si-gel plate. Ginsenoside-Rb1 content determined by HPLC on Lichrosorbtract drinks was 57.5-70.4% compared to the content in the red ginseng extract.
The biological effects of the water extracts of Rhus Verniciflua Stokes (RVS) were evaluated by protection against hydroxyl radicals. Antioxidative activities were measured using both 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) and thiocyanate method. Also we used the Glucose oxidase (GO) 20 mU/$\textrm{m}{\ell}$ hydroxyl radical generating system in mouse forebrain cell culture. Water was used for ex-traction from RVS as a solvent which has high polarity especially. In DPPH method, the antioxidative activities of the crude water extract were stronger than any other extracts of low polar-solvents. In the antioxidative effects of mouse forebrain culture using 20 mU/$\textrm{m}{\ell}$ GO, cell viabilities were evaluated 65.6%, 68.8% at 1 $\mu\textrm{g}$. 5 $\mu\textrm{g}$ addition of crude water extracts (30 mg/$\textrm{m}{\ell}$) respectively. 10 $\mu\textrm{g}$ addition of crude water extracts had more than 86.1% cell viabilities, P<0.0l significantly, compared with the group treated with GO alone. In comparison with the antioxidative activities of several commercial antioxidants (ascorbic acid, $\alpha$-tocopherol, catalase, serum), 273 $\mu\textrm{g}$/$\textrm{m}{\ell}$ addition of crude water extracts (300 $\mu\textrm{g}$/$\textrm{m}{\ell}$) showed equivalent antioxidative effect to 25 uM ascorbic acid.
Apparent digestibility coefficients (ADCs) of dry matter, crude protein, crude lipid, nitrogen-free extract, and energy in selected carbohydrate sources including wheat flour (WF), ${\alpha}-potato$ starch (PS), ${\alpha}-corn$ starch (CS), Na alginate (AL), dextrin (DEX), and carboxymethyl cellulose (CMC) were determined for olive flounder. The olive flounder averaging $150{\pm}8.0g$ were held in 300-L tanks at a density of 30 fish per tank. Chromic oxide was used as the inert marker. Feces were collected from the flounder by a fecal collector attached to a fish rearing tank. Apparent dry matter and energy digestibilities of flounder fed WF, PS, CS, and DEX diets were significantly higher than those of fish fed AL and CMC diets. Apparent crude protein digestibility coefficients of flounder fed PS and CS diets were significantly higher than those of fish fed AL, DEX, and CMC diets. Apparent crude lipid and nitrogen-free extract digestibility coefficients of flounder fed PS and DEX diets were significantly higher than those of fish fed WF, CS, AL, and CMC diets. The present findings indicate that PS and DEX could be effectively used as dietary carbohydrate energy compared to WF, CS, AL, and CMC for olive flounder.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.18
no.1
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pp.250-253
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2004
The effects of crude extracts from medicinal plants on biological activity were investigated. The crude ethanol extract of H. paucistipula inhibited the growth of the Gram positive bacterium Bacillus subtilis ATCC 19659, (2 mm inhibition zone at 150 ㎍/disc) and the dermatophyte Trichophyton mentagrophytes ATCC 28185, (7 mm inhibition zone at 150 ㎍/disc), and toxic to P388 murine leukaemia cells ATCC CCL 46 P388D1, (IC/sub 50/ 2.48 ㎍/㎖ at 75 ㎍/disc). This crude ethanol extract of H. paucistipula is the strongest antimicrobial and cytotoxic activities against P388 murine leukaemia cells ATCC CCL 46 P388D1.
In this work, the natural indigo production process from Polygonum tinctorium was balanced based on the traditional Niram method in Korea. A standard procedure was determined considering the conditions of indican extraction from plant material, the amount of alkali for precipitation, storage of extract, etc. The effect of experimental conditions on the yield of crude dye was investigated. The contents of indigo and indirubin of the crude dyes were analyzed by HPLC. Increase of the amount of crude dye was observed within 1-2.5 days of extraction time. Longer extraction beyond 2.5 days resulted in a slight decrease in the amount of crude dye. There was no consistency in terms of indigo content depending on extraction pH. We found that the storage of extract or harvested plants affected adversely to dye yield and dye quality. Based on the lab scale extraction, large scale extraction was performed for 2-2.5 days in water and 2.0-2.5 g/L of $Ca(OH)_2$ was applied for precipitation of indigo dye. We obtained natural indigo dye containing about 15% of pure indigo in scale-up production using whole plant except root.
Gamiinjinoryung-San is composed of eight crude drugs including Artemisiae capillaris Herba which is widely used for the treatment of acute jaundice, acute and chronic hepatitis at the Oriental hospital of Kyung-Hee Medical Center. This study was conducted to investigate the effects of water extract of Gamiinjinoryung-San on the liver function. The results obtained were as follows; the extract markedly reduced LDH and ALP activities, but slightly decreased GOT and GPT activities elevated with D-galactosamine in rat serum. The liver protective activities were shown in $CCl_4-intoxicated\;rats$. The extract prevented the prolongation of sleeping time in $CCl_4-intoxicated\;rats$. The bile flow and the biliary bile acid secretion were significantly increased in normal rats.
In the course of our studies for new anticancer medicinal plants, we evaluated the effects of an alcohol-water (1:1, V/V) extract of Dendrostellera lesserii (Thymelaeaceae) leaves on the growth rates of breast tumors of rats. The breast tumors were induced in a group of rats by Dimethylbenz[a]anthracene (DMBA) injection. Our data showed that daily oral feeding of the crude extract to the rats, for 20 consecutive weeks, significantly repressed the growth rates of the breast tumors. In addition, the probable effect of D. lessertii crude extract or one of its purified active components on metastasis was evaluated using wehi-164 cells. Treatment of the cells with a single nontoxic dose of the purified active component for 48 hours inhibited the adhesion of the cells to the immobilized fibronectin molecules by almost 80% compared to the untreated control cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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