사포닌 함량과 PD계 사포닌과 PT계 사포닌의 조성 비율이 상이한 사포닌 분획물 TS-1, TS-2, TS-3 즉 주종 ginsenoside의 총함량$(G-Rb_1,\;-Rb_2,\;-Rc,\;-Rd,\;G-Re,\;-Rf,\;-Rg_1)$은 각각 $41\%,40\%,62\%$이고, PD계 사포닌과 PT계 사포닌의 함유 조성비율(PD/PT)이 각각 1.55, 2.25, 2.61인 시료를 6년근 홍삼으로부터 추출 제조하여, 생체외 실험으로 음경해면체 절편에 대한 이완반응과 생체내 실험으로 사포닌분획물 투여에 따른 음경 해면체내압의 변화에 미치는 효과를 조사하였다. PHE에 의해 수축된 음경해면체 절편에 대한 이완 반응은 홍삼 사포닌은 각각 농도 의존적 이완작용을 보였으며, 음경 해면체평활근의 이완작용에 있어 각 분획물의 $ED_{50}$은 TS-1이 1.68, TS-2, 1.97, TS-3, 2.29 mg/ml서 TS-1이 가장 의의있게 낮았다. 이러한 홍삼 사포닌 분획물의 이완효과 기전은 음경 해면체평활근에 NO나 칼슘 및 칼륨 통로 등에 영향을 미쳐 복합적인 이완작용을 보이는 것으로 사료되었다. 흰쥐를 이용한 생체내 실험으로 홍삼 사포닌 투여에 따른 음경해면체내압의 변화 조사에서 각 사포닌 분획물은 농도의존적으로 해면체내압의 증가를 야기시켰다. 이들 해면체내압의 증가 정도는 TS-1이 가장 강하였고,TS-2,TS-3 순이었다. 이상의 결과로부터 홍삼의 사포닌 분획물은 음경해면체평활근의 이완작용과 내압의 증가에 영향을 미쳐 음경발기의 상승을 야기시키는 효과가 있으며 그 효과는 그 함유 조성에 따라 차별성이 있다는 것이 확인되었으므로 금후 주요 활성성분의 구명이 요망되고 있다.
이상의 결과를 종합하면, 인삼 총사포닌은 본 실험의 조건에서 배뇨개선 효과가 있으며 이에 관여하는 총사포닌의 주 효능은 근위부요도를 이완시킴으로써 이루어지는 것으로 생각된다. 그리고 인삼 총사포닌은 혈류역동학적으로 안전하게 음경해면체 평활근을 이완시켜 음경발기를 유발시키는 것으로 생각된다.
This study aimed to investigate the relaxation effects and its underlying mechanisms of Rubus coreanus(RC) extract in contracted rabbit corpus cavernous tissues by phenylephrine(PE) $1{\mu}M$. In order to define the relaxation effects of RC, rabbit corpus cavernous tissues were prepared in $2{\times}2{\times}6mm$ sized strip. The dose-dependent relaxation responses of RC at 0.01-3.0 $mg/m{\ell}$ in contracted strips induced by PE were measured and also observed after endothelial denudation. To analyze the underlying mechanisms of RC-induced relaxation, indomethacin(IM), tetraethylammonium chloride(TEA), $N{\omega}$-nitro-L-arginine (L-NNA), methylene blue(MB) were treated before RC extract infused into precontracted strips induced by PE. To study the effect of RC extract on influx of extracellular $Ca^{2+}$ in corpus cavernous strips, calcium chloride(Ca) 1 mM infused into precontracted strips induced by PE after pretreatment of RC extract in $Ca^{2+}$-free krebs-ringer solution. To investigate cytotoxic activity and nitric oxide(NO) concentration of RC extract on human umbilical vein endothelial cell(HUVEC), cell viability on HUVEC was measured by MTT assay, and NO concentration was measured by Griess reagent system. The cavernous strips were significantly relaxed by RC extract at 1.0 $mg/m{\ell}$, 3.0 $mg/m{\ell}$ and the relaxation responses to RC were inhibited significantly by endothelial disruption. The pretreatment of IM, TEA didn't affect RC extract-induced endothelium-dependent relaxation, but the pretreatment of L-NNA, MB reduced RC extract-induced endothelium-dependent relaxation. When $Ca^{2+}$ was supplied the cavernous strips which were precontracted by PE in a $Ca^{2+}$-free krebs-ringer solution, contraction of strips was increased, but pretreatment of RC inhibited contractile response to $Ca^{2+}$. When RC extract was applicated on HUVEC, NO concentration was increased. Our findings show that RC extract exerts a relaxing effect on corpus cavernosum in part by suppressing influx of extracellular $Ca^{2+}$ through activating the NO-cGMP system.
BACKGROUND/OBJECTIVES: This study evaluated the effects and molecular mechanisms of the Schisandra chinensis fruit extract (SC) and its major compound gomisin A (GA), on the contractility of rabbit penile corpus cavernosum smooth muscle (PCCSM). MATERIALS/METHODS: PCCSM was exposed to SC or GA after appropriate pretreatment with nitric oxide synthase (NOS) blocker, guanylate cyclase blocker, adenylyl cyclase blocker or protein kinase A blocker. Subsequently, we evaluated the cyclic nucleotide in the perfusate by radioimmunoassay, protein expression level of neuronal NOS (nNOS) and endothelial NOS (eNOS) by western blot, and the interaction of SC or GA with udenafil and rolipram. RESULTS: Both SC and GA induce PCCSM relaxations in a concentration-dependent manner. Pretreatment with NOS blocker, guanylate cyclase blocker, adenylyl cyclase blocker or protein kinase A blocker result in significantly decreased relaxation. SC and GA also induce the levels of cyclic nucleotide in the perfusate in a concentration-dependent manner. Perfusion with GA also showed significantly higher levels of eNOS protein. Furthermore, the udenafil and rolipram induced relaxations of PCCSM were enhanced after exposure to SC and GA. Our results indicate that SC and GA induce the relaxation of PCCSM via the nitric oxide (NO)-cGMP and cAMP signaling pathways. CONCLUSIONS: The SC and GA are potential alternative treatments for men who want to consume natural products to ameliorate erectile function, or who do not respond to the commercially available medicines.
Lee, Seulah;Kim, Min-Ji;Lee, Bum Soo;Ryoo, Rhim;Kim, Hye Kyung;Kim, Ki Hyun
Mycobiology
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제48권2호
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pp.153-156
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2020
Calvatia nipponica, a puffball mushroom (Agaricaceae), is thought to be an aphrodisiac, as this mushroom is traditionally known to improve sexual function in males. As part of the systematic study to determine the bioactive secondary metabolites from C. nipponica responsible for aphrodisiac effects, chemical analysis of methanol (MeOH) extracts of the fruiting bodies of C. nipponica resulted in the isolation of two major compounds: N,N-dimethyl-anthranilic acid (1) and (7Z,10Z)-7,10-octadecadienoic acid methyl ester (2). Compounds 1 and 2 were evaluated for cumulative dose-dependent relaxation responses to precontracted penile corpus smooth muscle (PCCSM). Results show that compounds 1 and 2 exhibited a maximum relaxation effect of 20.33 ± 2.18% and 24.63 ± 3.60%, respectively. These findings indicate that compounds 1 and 2, major components of C. nipponica, could potentially be used to treat erectile dysfunction, functioning as natural aphrodisiacs.
The effect of ginseng on the reactivity of penile corpus cavernosal smooth muscle strips of rabbits was investigated to support the clinical application of ginseng for the treatment of erectile dysfunction. New Zealand white rabbits were randomly divided into two groups, normal diet group (n=9) and ginseng saponin diet group (n=5). Then, each group was fed normal diet and Korean red ginseng saponin diet (50 mg/kg/day) for 10 weeks. We measured concentration dependent relaxation of corporal smooth muscle to acetylcholine (10-8 M to 10-4M) in organ chamber. The degree of relaxation was expressed as percentage of maximal relaxation obtained by papaverine (10-4M). Dose dependent relaxation of corpus cavernosal smooth muscle to acetylcholine, at the concentration of 10-8 M to 10-4M by half log increment, was 4.06$\pm$0.00, 4.30$\pm$1.30, 5.32$\pm$0.68, 11.64$\pm$1.74, 16.24$\pm$1.61, 23.33$\pm$ 2.29, 26.45$\pm$2.25, 30.43$\pm$2.40 and 33.41 $\pm$2.48 (%), respectively in normal diet group and 9. 83$\pm$4.15, 20.60$\pm$4.62, 24.1815.12, 35.75$\pm$5.71, 43.35$\pm$6.11, 51.30$\pm$6.22, 56.33$\pm$6.22, 54.30$\pm$4.17 and 51.98$\pm$3.92 (Vc), respectively in ginseng group. These data suggest that ginseng enhances ondothelium-dependent acetylcholine-induced relaxation of penile corpus cal.ernosal smooth muscle in rabbits.
On the precontracted rabbit cavernosal muscle strips with phenylephrine ($5\ast10^{-6}$M), Increasing concentrations of acetylcholine (10-7, 10-6, 10-5, 10-4M) showed relaxation effect dose-dependently in control group ($10^{-7}$M : 15.32%, $10^{-6}$M : 35.44%, 10-5M : 59.45%, 10-4M : 76.54%). After 3 months administering Korean red ginseng, the relaxation action of acetylcholine was significantly increased ($10^{-7}$M : 34.18%, $10^{-6}$M : 56.35%, $10^{-5}$M : 75.33%, $10^{-4}$M : 89.86%). Relaxation effect of Korean red ginseng was significantly increased after 3 months administering Korean red ginseng. Intracavernous pressure response to electrostimulation wan 107.52 cm$H_2O$ in control group and significantly increased to 138.34 cm $H_2O$ after 3 month administering Korean red ginseng. With these results, we can confirm that long-term administration of Korean red ginseng enhances the erectly capacity and that its action is mediated by endothelium derived relaxing factor and peripheral neurophysiologic enhancement.
야관문에서 추출한 n-hexane층을 음경해면체 평활근의 활성물질 탐색한 결과 극성 별로 분리한 9개 모든 시료에서 정도의 차이는 있으나 음경해면체 평활근의 이완 반응을 일으켰으며, 추출물 $10{\mu}l$ 투여한 9개 시료 중 A시료($20.2{\pm}6.0%$) 가 최고의 이완 반응을 보였으며, $15{\mu}l$를 투여한 시료 중에서는 J시료($54.8{\pm}9.7%$)가 최고의 이완 반응이 나타났다. 한편 야관문 추출물의 농도를 제일 많은량 $20{\mu}l$를 투여한 시료들 중에서는 H시료와 J시료가 95% 이상의 높은 이완 반응을 보였다. 시료중 최고 활성을 나타난 시료 H를 prep-HPLC 및 분석용 HPLC를 이용, YK-H1, YK-H2, YK-H3 및 YK-H4등 4개의 물질을 분리하였으며, 또한 시료 J를 prep-HPLC 및 분석용 HPLC를 이용하여 YK-J1, YK-J3 및 YK-J4등 세 개의 물질을 분리하였다. 분리된 7개의 물질들의 구조 결정에 대한 연구를 진행하고 있다.
KCNQ family constitutes slowly-activating potassium channels among voltage-gated potassium channel superfamily. Recent studies suggested that KCNQ4 and 5 channels are abundantly expressed in smooth muscle cells, especially in lower urinary tract including corpus cavernosum and that both channels can exert membrane stabilizing effect in the tissues. In this article, we examined the electrophysiological characteristics of overexpressed KCNQ4, 5 channels in HEK293 cells with recently developed KCNQ-specific agonist. With submicromolar EC50, the drug not only increased the open probability of KCNQ4 channel but also increased slope conductance of the channel. The overall effect of the drug in whole-cell configuration was to increase maximal whole-cell conductance, to prolongate the activation process, and left-shift of the activation curve. The agonistic action of the drug, however, was highly attenuated by the co-expression of one of the β ancillary subunits of KCNQ family, KCNE4. Strong in vitro interactions between KCNQ4, 5 and KCNE4 were found through Foster Resonance Energy Transfer and co-immunoprecipitation. Although the expression levels of both KCNQ4 and KCNE4 are high in mesenteric arterial smooth muscle cells, we found that 1 μM of the agonist was sufficient to almost completely relax phenylephrine-induced contraction of the muscle strip. Significant expression of KCNQ4 and KCNE4 in corpus cavernosum together with high tonic contractility of the tissue grants highly promising relaxational effect of the KCNQ-specific agonist in the tissue.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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