Clinical evaluation of contact sensitization to 2, 4-dinitro-chlorobenzene [DNCB] was performed in 2 groups: group A [30 patients with non-malignant disease] and group B [30 patients with bronchogenic carcinoma]. Initial sensitization was elicited out by applying 2, 000 ug of DNCB to skin surface of the both group A and B. Subsequently a relatively weak challenge dose, 200 ug of DNCB, was applied 14 days later, showing the satisfactory results of sensitization with minimizing non-specific irritative inflammatory skin response. Delayed cutaneous hypersensitivity reactions shown by spontaneous flare phenomena appeared at the challenge site, and they were assessed 48 hours later. The reaction were graded from +1 to +4 according to the degree of flare or vesicular reaction. The results were as follows: 1. 28 cases [93%] of group A, however, only 18 cases [67%] of group B exhibited delayed cutaneous hypersensitivity reaction to DNCB contact sensitization [P<0.02]. 2. Of group A, the delayed cutaneous hypersensitivity reactions above +2 of DNCB score were 25 cases [83%], meanwhile 11 cases [37%] in group B [P<0.001]. 3. Undifferentiated carcinomas showed highest incidence of anergy to DNCB contact sensitization in the all histologic types of group B. 4. In group B, 8 [42%] of 19 cases who react to DNCB were resectable, whereas only 2 [18 %] of 11 cases who failed to react to DNCB were resectable for curative cancer surgery. These study suggests that cellular immune reaction of group B was depressed remarkably comparing with that of group A.
The purpose of the present study was to investigate differences in the sensitizing potential of Rhus Veniciflua(Rhus-II), when tested by the guinea pig maximization test(GPMT) and Freund's complete adjuvant test(FCAT) with an identical, intradermal induction concentration. A new grading classification of the sensitization potential is proposed. The GPMT was conducted according to OECD guideline $\#406$, using a multiple-dose design and test results were analysed with logistic regression analysis. During the induction stage, we injected intradermally each three site 0.1 ml(l mg/animal) test material, 0.1 ml complete Freund's adjuvant and 0.lml the test agent emulsified in the adjuvant. 7 days later, we induced weak sensitization with $10\%$ sodium lauryl sulfate(SLS) and applide 1ml(l0mg/animal) test agent topically on the same site and made a tight occlusion. 14 days later we challenged with 1 ml(l 0mg/animal) of test material on the flank and observed ant 24 hours and 48 hours later. The results were also observed $0\%$ at 24 hours challenge. The results observed 48 hours after challenge were the identical. These data indicated that, although Rhus-II is a no contact allergen. It was reported that the skin sensitization by Rhus-II was not detected the skin sensitization in the guinea pig maximization test (GPMT). Consequently, it was confirmed that Rhus-II had no contact allergic sensitization in guinea pig maximization test.
Nitric oxide (NO) is a signaling molecule that plays a crucial role in numerous cellular physiological processes. In the skin, NO is produced by keratinocytes, fibroblasts, endothelial cells, and immune cells and is involved in skin functions such as vasodilation, pigmentation, hair growth, wound healing, and immune responses. NO modulates both innate and adaptive immune responses. As a signaling molecule and cytotoxic effector, NO influences the function of immune cells and production of cytokines. NO is a key mediator that protects against or contributes to skin inflammation. Moreover, NO has been implicated in skin sensitization, a process underlying contact dermatitis. It modulates the function of dendritic cells and T cells, thereby affecting the immune response to allergens. NO also plays a role in contact dermatitis by inducing inflammation and tissue damage. NO-related chemicals, such as nitrofatty acids and nitric oxide synthase (NOS) inhibitors, have potential therapeutic applications in skin conditions, including allergic contact dermatitis (ACD) and irritant contact dermatitis (ICD). Further research is required to fully elucidate the therapeutic potential of NO-related chemicals and develop personalized treatment strategies for skin conditions.
The use of skin whitening agents has been recently increased in various kinds of cosmetic products, although there were some reports that whitening agents might cause allergic contact dermatitis. A murine local lymph node assay (LLNA) has been developed as an alternative to guinea pigs for contact sensitization potential. This study was carried out to investigate the skin sensitization potential of three whitening agents, arbutin, azelaic acid, and kojic acid, by LLNA using a non-radiois-topic endpoint. Female Balb/c mice were exposed topically to a weak allergen, $\alpha$-hexylcinnamalde-hyde (HCA), and three whitening agents following LLNA protocol. Lymph node (LN) weight and cell proliferation in ears and auricular lymph node using bromodeoxyuridine (BrdU) immunohistochemistry were evaluated. LN weights were significantly increased at the HCA group compared to the vehicle control. A weak allergen, HCA elicited 3-fold or greater increase in cell proliferation of lymph nodes as well as increase in cell proliferation of ear as measured by BrdU immunohistochemistry. However, in the case of skin whitening agent groups, there were no significant changes in LN weight and cell proliferation in the ear and lymph node of mice treated with 5, 10 and 20% of three whitening agents compared to the vehicle control. These results show that these three skin whitening agents may not have contact sensitization potentials at tested concentrations in Balb/c mice by LLNA.
Predictive tests for the identification of contact sensitizing chemicals have been developed. We measured the sensitization potential with three predictive tests, the in vitro and the in vivo Local Lymph Node Assay(LLNA), ELISA to detect interferon-gamma(IFN-${\gamma}$) from supernatant and flow cytometry to detect change of cell surface proteins, using draining lymph nodes of mice. BALB/c mice were exposed to various chemicals or vehicles on the ears daily for 3 consecutive days in all experiments. With some exceptions of propyl paraben, neomycin sulfate, the in vivo LLNA was able to detect the sensitizing capacity of test chemicals and was more sensitive than the in vitro LLNA for chemicals used in the present study. In another experiment, contact sensitivity was assessed by the ELISA to detect IFN-Υ from the supernatants of the cultured LNCs after sensitization with chemicals. There was a good correlation between the LLNA and the IFN-Υ production for test chemicals. We also examined the change of cell surface proteins on LNCs after sensitization by flow cytometry for some cell adhesion molecules(ICAM-1, E-cadherine, B7 molecule), T cell markers(CD3, CD4, CD8, T$\alpha$$\beta$,T${\gamma}$$\delta$) and B cell markers(LR1, CD45R, I-Ad). The number of ICAM-1 positive cells and B cells in LNCs were increased after sensitization with DNCB, TNCB, isoeugenol and 25%, 50% cinnamic aldehyde compared with that of vehicle as a control. In conclusion, the in vivo LLNA could provide more sensitive screening test for moderate to strong sensitizers and some weak sensitizers including cosmetic raw materials than the in vitro LLNA. The production of IFN-Υ by allergen-activated LNCs might be a values indicators without radioisotopes for the identification of contact allergens. Detection of allergens by testing the increase of ICAM-1 positive cells and B cells in LNCs by flow cytometry might be used as a test method to detect allergens.
The effect of DHU001, a mixed herbal formula consisted of 7 types aqueous extracts for various respiratory disorders were evaluated on 2,4-dinitrofluorobenzene (DNFB)-induced contact dermatitis, type I allergic model. Contact dermatitis was induced by sensitization with dinitrophenyl-derivatized ovalbumin (DNP-OVA) and DNFB challenge as antigen. Two different dosages of DHU001 (300 and 150 mg/kg) were orally administered to DNP-OVA sensitization mice once a day for 7 days with reference material, dexamethasone (15 mg/kg, intraperitoneal treatment). End of 7 days oral administration of DHU001 extracts or intraperitoneal treatment of dexamethasone, the changes on the edematous changes and scratching behavior were measured. Immediate after DNFB challenge on ear or paw of DNP-OVA sensitized mice, increases of ear and paw thicknesses and weights were detected with anterior ear skin (dermis to epidermis) thickness and paw scratching behavior increases. However, these contact dermatitis signs induced by DNFB treatment were reduced by treatment of the both different dosages of DHU001 and dexamethasone, respectively. The results obtained in this study suggest that oral treatment of DHU001 extracts also has relatively favorable effects on contact dermatitis.
Allergic contact dermatitis (skin sensitization) may be caused by a wide variety of chemicals. A murine local lymph node assay (LLNA) has been developed as an alternative to guinea pig models for assessing the contact sensitization potential of chemical. This study was carried out to evaluate the skin sensitization potential for chemicals in Balb/c mice by LLNA. Contact allergen, dinitrochlorobenzene (DNCB), respiratory allergen, toluene diisocyanate (TDI) and a weak allergen, $\alpha$-hexlycinnamaldehyde (HCA) were wed as positive chemicals and irritant, sodium lauryl sulfate(SLS) also wed as a reference chemical in this study. The weights of lymph node in the mice treated with DNCB, TDI, and HCA were increased compared to vehicle control. There was a significant increase in lymph node weight of mice treated with high concentration of SLS compared to vehicle control. The stimulation index (SI) of Lymph node cell in the mice treated with DNCB, TDI, and HCA revealed over three-fold increase compared to vehicle control by $3^H$-thymidine uptake. All allergens correctly identified in this LLNA study wing Balb/c mice. These results suggest that LLNA wing Balb/c mice could be a useful method for screening the allergenic potential of chemicals. The expression of IL-2 mRNA was slightly increased in draining auricular lymph node cell of the mice treated with TDI and HCA by RT-PCR. However the IL-2 levels in DNCB and SLS of treated animals were not significantly changed.
The effect of Picrorrhiza Rhizoma (PR) aqueous extracts were evaluated on 2,4-dinitrofluorobenzene (DNFB)-induced contact dermatitis, type I allergic model. Contact dermatitis was induced by sensitization with dinitrophenyl-derivatized ovalbumin (DNP-OVA) and DNFB challenge as antigen. Three different concentrations of PR extracts (300,150 and 75mg/kg) were orally administered to DNP-OVA sensitization mice once a day for 7 days with reference materials; dexamethasone (15mg/kg, intraperitoneal treatment). End of 7 days oral administration of PR extracts or intraperitoneal treatment of dexamethasone, the changes on the edematous changes and scratching behavior were measured. Immediate after DNFB challenge on ear or paw of DNP-OVA sensitized mice, increases of ear and paw thicknesses and weights were detected with anterior ear skin (dermis to epidermis) thickness and paw scratching behavior increases. However, these DNFB-induced increases on ear and paw thicknesses, weights and scratching behaviors were decreased by treatment of all three different dosages of PR extracts and dexamethasone, respectively. In addition, the increases of anterior skin thicknesses were also dramatically inhibited by treatment of all three different dosages of PR extracts and dexamethasone at histopathological observations. The results obtained in this study suggest that oral treatment of PR extracts also has relatively favorable effects on allergic dermatitis.
한국독성학회 2002년도 Current Trends in Toxicological Sciences
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pp.97-97
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2002
A mouse ear swelling test (MEST) has been developed as an alternative to guinea pig models for contact sensitization potential. However, the MEST relies on a quantitative measurement of ear swelling as an endpoint by micrometer. In this study, we aimed to investigate the cell proliferation in ear and lymph node using Bromodeoxyuridine (BrdU) immunohistochemistry as a possible reliable marker for MEST.(omitted)
The use of skin whitening agents have been recently increased in various kinds of cosmetic products, although there were reports that whitening agents might cause allergic contact dermatitis. A murine local lymph node assay (LLNA) has been developed as an alternative to guinea pigs for contact sensitization potential. This study was carried out to investigate the skin sensitization potential of three whitening agents, kojic acid, arbutin, azelaic acid, by LLNA using a non-radioistopic endpoint.(omitted)
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[게시일 2004년 10월 1일]
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