In order to determine sodium chondroitin sulfate in the mixture, chondroitinase ABC was used for enzymatic reaction. The procedure was rapid, simple, quantitative and the HPLC analysis of ${\Delta}Di-6S$(2-actamido-2-deoxy-3-0-(${\beta}$-D-gluco-4-enepyranosyluronic acid)-6-0-sulfo-D-galactose) in the sodium chondroitin sulfate was obtained. The absorbance was measured at 230nm and detection limit was $1{\mu}g/ml$. When we applied this method to the drugs(capsule, opthalmic solution), it gave the mean contents of $100.01{\pm}1.58%$ and $99.89{\pm}1.80%$ respectively.
Kunitz-type soybean trypsin inhibitor (SBTI) and chondroitin sulfate (A, and C type) were conjugated using sodium periodate method. And the physicochemical, pharmacokinetic properties and immunogenecity of the conjugates (Chon-A-SBTI or Chon-C-SBTI) were characterized. We expected the conjugation using chondroitin sulfate to reduce the immunogenecity and to improve the pharmacological effect. As the results, the mean molecular weight of the conjugate highly increased. After I.V. injection of the radiolabeled conjugates or native SBTI into mice, it was found that native SBTI showed rapid elimination from plasma, whereas Chon-A-SBTI and Chon-C-SBTI were slowly eliminated. Organ distribution of the two agents at 30 min after I.V. injection was different : Chon-A-SBTI or Chon-C-SBTI accumulated to a large extent in the liver (13% in Chon-A-SBTI and 16% in Chon-C-SBTI), whereas native SBTI was taken up more rapidly by the kidney (107% dose/g of tissue) and excreated into the urine (26%). In addition we evaluated the therapeutic value of the conjugates by using the sublethal septic shock model caused by pseudomonal elastase and tested the immunogenecity by passive cutaneous anaphylaxis shock (PCA). The conjugates were more effective than native SBTI against pseudomonal elastase induced septic shock in guinea pig. In case of the conjugates, the pharmacological and therapeutic effect lasted over 3 hours long. In immunogenecity test, both of the conjugates showed the reduction of their immunogenecity, especially Chon-A-SBTI looked most effective.
Journal of Korean Academy of Oral and Maxillofacial Radiology
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v.23
no.2
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pp.291-299
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1993
This study was designed to evaluate the correlationship between radiologic classifications of cysts in oral region and glycosaminoglycan analysis of cystic fluids using cellulose acetate electrophoresis. The materials for this study consisted of 37 cases-8 periapical cysts, 10 dentigerous cysts, 10 primordial cysts, 2 residual cysts, 3 incisive canal cysts, 2 post-operative maxillary cysts, 1 mucocele on maxillary sinus, & 1 unicystic ameloblastoma-diagnosed as cystic lesions radiologically. The obtained results were as follows: 1. At the stepwise discriminant analysis, four variables-low mobility material, heparin, hyaluronic acid, & dermatan sulfate-were used to define diagnostic model for the odotogenic cyst. The model produced a sensitivity of 100% and a specificity of 85%. 2. The intensities of heparin and chondroitin-4-sulfate were greater in dentigerous cyst than periapical cyst(p<0.05). The intensity of chondroitin-4-sulfate was greater in primordial cyst than in periapical cyst(p<0.05). 3. It showed no statistically significant difference in glycosaminoglycan of the cystic fluids between dentigerous cyst and primordial cyst(p>0.05). 4. On the fluids of the cysts originated from maxillary sinus, there were especially high intensities of heparin and dermatan sulfate, and low intensity of chondroitin-4-sulfate. 5. On the fluids of unicystic ameloblastoma, there were high intensity of dermatan sulfate and low intenity of chondroitin-4-sulfate.
The gene encoding chondroitinase ABC from a genomic library of Bacteroides stercoris HJ-15, which was isolated from human feces, was cloned. The cloned gene consisted of 3,090 bp and was predicted to encode a 1,029−amino-acid protein. The B. stercoris chondroitinase ABC gene was not homologous to other chondroitinase ABC genes; however, its amino acid sequence showed 71% homology to that of Bacteroides thetaiotaomicron. The gene was cloned in the pET-26b+ expression vector and expressed under the T7 promoter in Escherichia coli BL21(DE3). The purified recombinant chondroitinase ABC degraded chondroitin sulfates A, B, and C.
These experiments were undertaken to investigate the rate of in vitro fertilization of bovine follicular oocytes treated with glycosaminoglycans(GAGs). Bovine follicular oocytes were obtained from the ovary of slaughtered animal and matured in media containing the various concentrations of hydluronic acid, chondroitin sulfate or heparin for 26 hours. Epididymal spermatozoa were capacitated and insemination was made by introducing about 10~15 matured oocytes into the suspension of spermatozoa. Six hour after insemination the eggs were transferred to TCM-199 supplemented with FCS(10%) and then examined the embryo development. After in vitro insemination, percentages of ova fertilized were 61.3 or 48.3%, respectively, for the cumulus intact or removed in the percentages of GAGs. However, in case of cumulus-free oocytes treated with GAGs, the fertilization rates were 58.8, 62.1, 58.8, and 61.8%, respectively, showing significant effect compared to 48.3% in cumulus-free oocytes. Our findings suggest that cnondroitin sulfate and heparin are superior to hyaluronic acid in the fertilizatin and pronuclear formation of bovine oocytes.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.23
no.6
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pp.945-949
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1994
Chondroitin sulfate (Chs) contents in edible snail , Achatina fulica Bowdich , andits processed meat extracts were determined by high-performance liquid chormatogrpahy(HPLC) and spectrophotometric method. Spectrophotometric method was based on the precipitation of acriflavine by ChS, and HPLC method was based on the detection of two unsaturated disaccharides, 2-acetamido-2-deoxy-3-O-($\beta$ -D-gluco-4-enepyranosyluronic acid)-4-O-sulfo-D-galactose($\Delta$Di-4S) and 2-acetamido-2deoxy-3-O-($\beta$-D-gluco-4-eepyranosyluronic acid)-6-O-sulfo-D-galactose ($\Delta$야-6S) librated from ChS byenzymeatic digestion with chondroitinase ABc. the ratio of 125$\mu$mol of sodium hydroxide to mg of ChS and 8$0^{\circ}C$ of reaction temperature were proper for alkaline hydrolysis to remove protein residue form ChS. In assay preparation for HPLC ethod, the iptimum concentration of the enzyme chondroitinase ABc was 0.15 unit per 50 $\mu\textrm{g}$ of ChS at a fixed reaction time (30 min) and pH 8.0 using Tris buffer. ChS content in edible snail was 177.6mg% by spectrophotometric method and 153.5mg% by HPLC method and those in the processed meat extract was 71.3mg% by spectrometric method ad 62.8mg% by HPLC method, respectively.
Proceedings of the Korea Society of Poultry Science Conference
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2004.11a
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pp.26-27
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2004
This study was conducted to evaluate the value of chicken keel cartilage as a source of mucopoly-saccharide-protein containing chondroitin sulfate (CS) and to find the optimum extraction conditions. The hot water extraction and alcalase hydrolysis methods were performed for extraction mucopolysaccharide in lyophilized chicken keel cartilage. The most efficient condition was hydrolysis with 2 % alcalase in 10 volumes of distilled water for 120 min. The yield of hydrolysate and CS content were 75.87 % and 25.61 %, respectively. For further separation of CS from hydrolysate by alcalase, ethanol precipitation was performed. The yield of ethanol precipitate and its CS content were 21.41 % and 46.31 %, respectively.
Oxidative stress due to reactive oxygen species (ROS) can cause oxidative damage to cells. Cells have a number of defense mechanisms to protect themselves from the toxicity of ROS. Mitochondria are especially important in the oxidative stress as ROS have been found to be constantly generated as an endogen threat. Mitochondrial defense depends mainly on super-oxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GPx), whereas microsomal defense depends on catalase (CAT), which is an enzyme abundant in microsomes. SOD removes superoxide anions by converting them to $H_2O$$_2$, which can be rapidly converted to water by CAT and GPx. Also, GPx converts hydroperoxide (ROOH) into oxidized-glutathione (GSSG). Ovariectomized (OVX) rats are used as an oxidative stress model. An ovariectomy increased the levels of MDA, one of the end-products in the lipid peroxidative process, and decreased levels of the antioxidative enzymes; SOD, CAT and GPx. However, Chondroitin sulfate (CS) decreased the levels of MDA, but increased the levels of SOD, CAT and GPx in a dose-depen-dent manner. Moreover, inflammation and cirrhosis of liver tissue in CS- treated rats were sig-nificantly decreased. These results suggest that CS might be a potential candidate as an anti oxidative reagent.
Osteoarthritis (OA) is the leading medical condition for which patients use alternative treatments including the natural remedies. The aim of this review is to describe the dietary supplements and herbal remedies most commonly used in patients with osteoarthritis with an emphasis on the efficacy and safety of these natural remedies. Glucosamine and chondroitin sulfate, two of the molecular building blocks found in articular cartilage, are the most commonly used remedies in OA treatment. Most clinical researches suggest that glucosamine and chondroitin show efficacy in reducing or improving symptoms and their ability to arrest progression of the disease or regenerate damaged cartilage. Patented formulations of both remedies are recommended by several therapeutic guidelines for use as first line background OA treatment. Reliable evidence that the combination is more effective than either agent alone is however still lacking. Several other herbs or remedies are promoted for treating osteoarthritis such as S-adenosylmethionine, methylsulfonylmethane, Harpagophytum procumbens (devil's claw), Curcuma longa (turmeric), Zingiber officinale (ginger), and capsaicin but there is no reliable evidence on long-term efficacy or safety. The clinical usefulness of these remedies is therefore rather limited currently.
Jo, Jin-Ho;Do, Jeong-Ryong;Kim, Young-Moung;Kim, Dong-Soo;Lee, Taek-Kyun;Kim, Seon-Bong;Cho, Seung-Mock;Kang, Suk-Nam;Park, Douck-Choun
Food Science and Biotechnology
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v.14
no.5
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pp.651-655
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2005
Enzymatic hydrolysis of shark (Squatina oculata) cartilage (SC) was optimized by response surface methodology (RSM) for chondroitin sulfate (CS) preparation. Among 11 commercial proteases, Maxazyme NNP showed highest productivity (CS yield per enzyme cost) of CS. Optimal hydrolysis conditions determined by RSM were 1.63% and 2.87 hr for enzyme concentration and hydrolysis time ($r^2\;=\;0.9527$, p<0.0l), respectively and highest yield of hydrolysate under the conditions was 42.3%. The yield ($43.1{\pm}2.1%$) and CS content ($24.8{\pm}0.1%$) of hydrolysate at optimal condition verified statistical optimization of SC enzymatic hydrolysis was valid.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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