When rubber dissolved in toluene was used as a binding material of graphite powder, the mechanical robustness of the carbon paste was guaranteed by the fast volatility of the solvent immediately after electrode construction. This characteristic of the rubber solution met qualifications for practical use of carbon paste electrodes and enabled the design of a new enzyme electrode bound with EPDM. In order to confirm whether the electrode shows quantitative electrochemical behaviors or not, its kinetic parameters, e. g. the symmetry factor (0.2), the exchange current density ($3.66\;{\mu}A/cm^2$), the capacity of the double layer ($2.0{\times}10^{-5}\;F$), the Michaelis constant ($4.39{\times}10^{-3}\;M$), the diffusion coefficient of substrate ($2.58{\times}10^{-12}\;cm^2/sec$), the time constant (0.018 sec) and other factors were investigated.
Critical parameters affecting sensitivity and specificity of an enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) for detection of antibodies to avian infections bronchitis virus(IBV) were standardized. By adopting the optimized conditions an equation calculating ELISA antibody titers from the observations at single serum dilution was formulated. The purified antigen of IBV Mass-41 strain was dispensed into polystyrene microplate wells at a concentration of 300ng per well($100{\mu}l$) and the plates were coated by completey drying at $37^{\circ}C$. Diluted chicken serum and horseradish peroxidase conjugated goat anti-chicken IgG were added in order in $100{\mu}l$ volumes per well and allowed to react for 30 minutes each at room temperature. Just before use and after each reaction the plates were washed three times with distilled water. Finally o-phenylenediamine solution was added as an enzyme substrate. After incubation for another 15 minutes at room temperature absorbances were read at 492nm. Hyperimmune serum against Mass-41 strain was used as internal reference positive(IRP) serum. After repeated titration of IRP and negative serum, a constant titer of IRP was determined. Serum titrations were carried out for various sample sera together with IRP and negative sera and the observed titers of sample sera were corrected by reflecting the ratio between observed and constant titers of IRP serum. These corrected titers of the sample sera were plotted against sample/positive(S/P) OD ratios. All the OD's measured in the serum titrations were also corrected by substracting negative serum OD. The following equation was formulated from the above data; $Log_{10}$ ELISA titer=$5.568({\log}_{10}S/P)+4.161$ Thus it was possible to calculate ELISA titer by measuring absorbance at 1/400 single serum dilution. Titer measured by cross ELISA tests employing Mass-41 strain and three local IBV isolates were similar. These results suggest that the ELISA tests standardized in this study can be used for evaluating not only vaccinal immunity but also for infection status against fields IBV's.
Objective: Methionine (Met) is involved in methyl group transfer besides protein synthesis. As the availability is limited and cost is high for synthetic Met, reductions in its inclusion in broiler diet may be possible by supplementing the low Met diets with methyl donors (MD) like betaine (Bet), folic acid (FA), vitamin B12 (B12), and biotin (Bio). An experiment was conducted to study the effects of supplementing the MD on performance (average daily gain [ADG], daily feed intake, feed efficiency [FE]), anti-oxidant variables, immune responses and serum protein concentration in broilers fed sub-optimal concentrations of dietary Met. Methods: Maize-soybean meal diet was used as control (CD). Different MD like Bet (0.2%), B12 (0.1 mg), FA (4 mg), or Bio (1.5 mg/kg) were supplemented to basal diet (BD) having no supplemental Met. The BD without MD was kept for comparison. Each diet was fed ad libitum to 10 replicates of 25 chicks in each from 1 to 42 d of age. Results: At the end of experiment, the ADG in MD group was higher than BD and lower than CD. The FE improved with FA or Bet compared to the BD. Breast meat weight was higher in Bet compared to the BD, while it was intermediate between BD and CD in other groups. The lipid peroxidation reduced with Bio, B12, or Bet, while the glutathione peroxidase activity improved with Bio or B12 compared to the BD. Lymphocyte proliferation improved with Bet compared to the BD. The serum protein concentrations increased with FA, Bio, or Bet compared to those fed BD. Conclusion: It can be concluded that the ADG can be improved partially with supplementation of MD while the FE improved with FA or Bet. Some MD also reduced the stress indices and improved immune responses compared to the BD fed broilers.
Zichao Tan;Chuanfeng Zhou;Xueping Shi;Lihua Wang;Shubai Wang
Animal Bioscience
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v.36
no.5
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pp.731-739
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2023
Objective: This study was to evaluate the interaction of three different light-emitting diode (LED) light colors (white, green, and blue) and three intensities (5, 10, and 15 lx) on slaughter performance, meat quality and serum antioxidant capacity of broilers raised in three-layer cages. Methods: A total of 648 (8-days-old) male broiler chicks (Cobb-500) were randomly assigned in 3×3 factorially arranged treatments: three light colors (specifically, white, blue, and green) and three light intensities (namely, 5, 10, and 15 lx) for 35 days. Each treatment consisted of 6 replicates of 12 chicks. The test lasted for 35 days. Results: The semi-eviscerated weight percentage (SEWP) in 5 lx white was higher than that in 15 lx (p<0.01). The eviscerated weight percentage (EWP) (p<0.05) and water-loss percentage (WLP) (p<0.01) decreased in 10 lx white light than those in green light. Under blue light, the content of hypoxanthine (Hx) in muscle was lower than that under white and green light (p<0.01). The content of malondialdehyde (MDA) in 15 lx blue light was higher than that in 10 lx green light (p<0.05). Light color had an extremely significant effect on thigh muscle percentage, WLP, Hx, and crude protein content (p<0.01). Light intensity had a significant effect on SEWP (p<0.05), EWP (p<0.05), lightness (L*) value (p<0.05), WLP (p<0.01), and the contents of superoxide dismutase (p<0.05), MDA (p<0.01), glutathione peroxidase (p<0.01). Conclusion: Using white LED light with 10 lx light intensity can significantly improve the chicken quality of caged Cobb broilers, improve the content of inosine acid in chicken breast and enhance the antioxidant capacity of the body. We suggest that the broiler farm can use 10 lx white LED light source for lighting in 8 to 42 days.
An experiment was conducted to determine the effect of supplementing various concentrations (0, 100, 200, 300, or 400 ${\mu}g/kg$ diet) of organic Se on growth performance, carcass traits, oxidative stress, and immune responses in commercial broiler chickens reared in open-sided poultry house under tropical climatic conditions. Each diet was fed ad libitum to eight replicates consisting of six birds in each pen from 1 to 42 d of age. Body weight gain and feed efficiency, and relative weight of liver, abdominal fat and ready to cook yields were not affected (p>0.05) by organic Se supplementation to broiler diets. Lipid peroxidation in plasma decreased, while activities of glutathione peroxidase and glutathione reductase in plasma increased (p<0.01) linearly with Se concentration in diet. The ratios between heterophyls and lymphocytes and relative weight of lymphoid organs (bursa, spleen, and thymus), and antibody production to Newcastle disease vaccination were not affected (p>0.05) by Se supplementation to broiler diets. However, the cell-mediated immunity (lymphocyte proliferation ratio) increased (p<0.01) linearly with dietary Se concentration. The results of the present study indicate that the supplementation of Se did not influence body weight and feed efficiency. However, supplementation of Se increased antioxidant status and lymphocyte proliferation in broiler chickens.
In order to establish and enzyme-linked immunosorbent assay to ILTV, field virus strain of ILTV was propagated in chorioallantoic membrane of the embryonated eggs. purified and used as antigen. The antisera selected from the field samples and immunized chickens based on serum neutralization test were used as the standard positive and negative sera in all tests. It was found that optimal antigen concentration was $2{\mu}g$ of protein per well and a 1 : 100 dilution of standard serum showed low background optical density with negative serum and high P/N values of positive sera. A 1 : 500 dilution of the rabbit anti-chicken IgG peroxidase conjugate produced a high P/N values and thirty minutes was chosen as suitable time to read the optical density of the enzyme substrate reaction and optical density was consistent during the 16 hours after stopper was treated. When coated antigen was kept on microplate for varying time up to 16 hours at $4^{\circ}C$ or $37^{\circ}C,$ no significant difference was observed between the treatment. The coated antigen could be kept without change of antigenicity for at least one month at $-70^{\circ}C,\; -20^{\circ}C,\; 4^{\circ}C$ and room temperature. When blocking buffer contanining bovine serum albumin was mixed directly with conjugate and serum at 10% level induced higher P/N values compared to blocking antigen coated microplate with the same blocking buffer. The coefficience of correlation between ELISA and SN test was 0.577. When antibody response of chickens, vaccinated with ILTV, was examined by ELISA and SN test, antibody rising and decay pattern between the two test was similar until 11 weeks of age. However 12 weeks onward antibody titer checked on by SN test was slightly lower than that tested by ELISA.
Cheng, Shi Bin;Li, Xian Qiang;Wang, Jia Xiang;Wu, Yan;Li, Peng;Pi, Jin Song
Animal Bioscience
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v.34
no.11
/
pp.1766-1775
/
2021
Objective: The oxidative stress status and changes of chicken ovary tissue after shading were studied, to determine the mechanism of the effect of shading on follicular development. Methods: Twenty healthy laying hens (40 weeks old) with uniform body weight and the same laying rate were randomly divided into two groups (the shading group and normal light group). In the shading group, the cage was covered to reduce the light intensity inside the cage to 0 without affecting ventilation or food intake. The normal lighting group received no additional treatment. After 7 days of shading, oxidative stress related indicators and gene expression were detected. Results: Analysis of paraffin and ultrathin sections showed that apoptosis of ovarian granulosa cells (GCs) increased significantly after light shading. Enzyme linked immunosorbent assay results revealed that the levels of total antioxidant capacity, malondialdehyde, superoxide dismutase (SOD), glutathione, catalase (CAT), and other substances in the sera, livers, ovaries, and follicular GCs of laying hens increased significantly after shading for 7 days; and reactive oxygen species (ROS) levels in the livers of laying hens also increased significantly. ROS in the serum, ovarian and GCs also increased. After shading for 7 days, the levels of 8-hydroxy-2 deoxyguanosine in the sera and ovarian tissues of laying hens increased significantly. Cell counting kit-8 detection showed that the proliferation activity of GCs in layer follicles decreased after shading for 7 days; the expression level of the anti-apoptotic gene B-cell lymphoma-2 in ovarian tissue and follicular GCs was significantly reduced, and the expression levels of pro-apoptotic caspase 3 (casp3), and SOD, glutathione peroxidase 2 (GPX2), and CAT were all significantly increased. Conclusion: Oxidative stress induced by shading light has a serious inhibitory effect on follicular development during reproduction in laying hens.
A total of twenty, 2-wk-old male broiler chickens were allotted into control diet(CON) or a diet supplemented with 1% ground grape seed(GGS). They had free access to feed and water for 3 wk. Growth performance and antioxidant markers in plasma, intestine and liver were determined. Dietary addition of 1% GGS did not affect weight gain, feed intake, feed conversion and organ weight in 35 day-old broiler chickens significantly. There was no difference in plasma levels of glucose, triglyceride, cholesterol, AST, ALT and LDH activity. However, total antioxidant status(TAS) in blood increased(P<0.05) in chickens fed the diet supplemented with 1% GGS compared to those fed the control diet. In addition, the specific activity of intestinal superoxide dismutase(SOD) increased(P<0.05) in birds fed the diet supplemented with GGS. However, the activities of intestinal gluthathione peroxidase(GSHPx) and gluthathione -S- transferase(GST) and hepatic SOD, GSHPx and GST were not affected by the dietary GGS. The levels of reduced glutathione and lipid peroxidation in the small intestine and liver were not different between the two groups. In conclusion, dietary supplementation of 1% GGS did not result in a negative effect on growth performance. In addition, some antioxidant indicators including blood TAS and intestinal SOD were markedly elevated in response to dietary GGS. Therefore, dietary addition of 1% GGS may be beneficial to improve antioxidant capacity in broiler chicken.
Objective: The aim of this study was to characterize the fecal microbiota of broiler chickens reared in the presence of different shades of light-emitting diode (LED) lights, correlating this information with biochemical and molecular evidence that allowed drawing conclusions on the state of health of the animals. Methods: Overall, the metagenomic approach on fecal samples was associated with evaluations on enzymes involved in the cellular response to oxidative stress: glutathione peroxidase (GPX), superoxide dismutase and catalase; while the inflammatory aspect was studied through the dosage of a proinflammatory cytokine, the interleukin 6 (IL-6), and the evaluation of the matrix metalloproteinases 2 (MMP-2) and 9 (MMP-9). Specifically, analysis was performed on distinct groups of chickens respectively raised in the presence of neutral (K = 3,300 to 3,700), cool (K = 5,500 to 6,000), and warm (K = 3,000 to 2,500) LED lightings, and a direct comparison was performed with animals reared with traditional neon lights. Results: The metagenomic analysis highlighted the presence of two most abundant bacterial phyla, the Firmicutes and the Bacteroidetes, with the latter characterized by a greater relative abundance (p<0.05) in the group of animals reared with Neutral LED light. The analysis on the enzymes involved in the antioxidant response showed an effect of the LED light, regardless of the applied shade, of reducing the expression of GPX (p<0.01), although this parameter is not correlated to an effective reduction in the tissue amount of the enzyme. Regarding the inflammatory state, no differences associated with IL-6 and MMP-9 were found; however, is noteworthy the significant reduction of MMP-2 activity in tissue samples obtained from animals subjected to illumination with neutral LED light. Conclusion: This evidence, combined with the metagenomic findings, supports a potential positive effect of neutral LED lighting on animal welfare, although these considerations must be reflected in more targeted biochemical evaluations.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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