The effects of the protein fraction of Panax ginseng on primary cultured chicken embryonic brain cells and DRG cultured with a deficient medium were studied. The protein fraction was further fractionated into four groups according to the molecular weight; larger than 10,000 dalton(fraction A), between 5,000 and 10,000 daltons(fraction B), between 1,000 and 5,000 daltons(fraction C), between 500 and 1,000 daltons(fraction D). All four protein fractions at the concentration of $100\;{\mu}g/ml$ significantly increased the number of the brain cells which promoted the neurite outgrowth. The activity of PDHC in the brain cells was elevated significantly by the protein fraction B at the concentration of $100\;{\mu}g/ml$. It was noted that $100\;{\mu}g/ml$ protein fraction C and D significantly enhanced the synthesis of protein in the brain cells. At the concentration of $100\;{\mu}g/ml$, the protein fraction B enhanced RNA synthesis and the protein fraction A significantly enhanced DNA synthesis in the brain cells. The protein fractions B, C, and D significantly promoted the neurite outgrowth of DRG at the concentration of $100\;{\mu}g/ml$.
Objective: Based on rapid advancement of genetic modification techniques, genomic editing is expected to become the most efficient tool for improvement of economic traits in livestock as well as poultry. In this study, we examined and verified the nickase of mutated CRISPR-associated protein 9 (Cas9) to modulate the specific target gene in chicken DF1 cells. Methods: Chicken myostatin which inhibits muscle cell growth and differentiation during myogenesis was targeted to be deleted and mutated by the Cas9-D10A nickase. After co-transfection of the nickase expression vector with green fluorescent gene (GFP) gene and targeted multiplex guide RNAs (gRNAs), the GFP-positive cells were sorted out by fluorescence-activated cell sorting procedure. Results: Through the genotyping analysis of the knockout cells, the mutant induction efficiency was 100% in the targeted site. Number of the deleted nucleotides ranged from 2 to 39 nucleotide deletion. There was no phenotypic difference between regular cells and knockout cells. However, myostatin protein was not apparently detected in the knockout cells by Western blotting. Additionally, six off-target sites were predicted and analyzed but any non-specific mutation in the off-target sites was not observed. Conclusion: The knockout technical platform with the nickase and multiplex gRNAs can be efficiently and stablely applied to functional genomics study in poultry and finally adapted to generate the knockout poultry for agribio industry.
Probiotics are live microbial feed supplements which beneficially affect the host animal by improving its intestinal microflora. To select the best Lactobacillus spp. as a chicken probiotic, probiotic characteristics of 10 selected Lactobacillus strains isolated from chicken cecum or obtained from KCTC were investigated. The strains were examined for resistance to pH 2.0 and 0.3% oxgall, and adhesion to cecal mucus and cecal epithelial cells. All strains grew in MRS containing 0.3% oxgall. However, Lb. plantarum AYM-10, Lb. fermentum YL-3, AYM-3, and Lb. paracasei YL-6 showed relatively high resistance to 0.3% oxgall. Lb. fermentum YL-3, YM-5, AYM-3, and Lb. paracasei YL-6 survived 4 hours of incubation at pH 2.0. Lb. fermentum YL-3, KCTC 3112, and Lb. plantarum AYL-5 were strongly adhesive to cecal mucus, while the rest showed moderate or low adhesion. Lb. plantarum AYM-10, AYL-1, and AYL-5 had good adhering properties to cecal epithelial cells (30.7$\pm$10.82, 40.2$\pm$20.90, and 14.5$\pm$4.22, respectively). Lb. fermentum YL-3, AYM-3, and KCTC 3547 showed Intermediate adhesion ability, and Lb. plantarum showed better adhesion ability to cecal epithelial cells than Lb. fermentum. Attached Lb. fermentum YL-3 to cecum after 60 min incubation was confirmed using CLSM. Lb. fermentum YL-3 attached to a matrix which was composed of a mucus layer adjacent to intracrypts and pericryptal region. Some Lb. fermentum YL-3 bound to mucosal epithelial cells. From these results, Lb. fermentum YL-3 was selected as a chicken probiotic. In vivo trials of chicks inoculated with Lb. fermentum YL-3 had decreased Salmonella population in cecal contents and livers (p<0.5).
Lactic acid bacteria were isolated from piglets and chicken and characterized. Lactic acid bacteria showing resistance to low pH and bile, adhesion to intestinal epithelium cells, and the inhibition of Escherichia coli and Salmonella spp. were identified as Lactobacillus acidophilus. L. acidophilus PF01 survived for 2 h in MRS broth adjusted to pH 2. L. acidophilus CF07 was less resistant than L. acidophilus PF01 to pH 2, but survived at pH 2.5 for 2 h. Both of isolates were able to grow in MRS broth containing 0.3% (w/v) bile, with L. acidophilus CF07 being more tolerant to bile than L. acidophilus PF01. L. acidophilus PF01 and CF07 adhered specifically to the duodenal and jejunal epithelium cells of piglet, and the cecal and duodenal epithelium cells of chicken, respectively. Both of isolates did not adhere to the epithelium cells of the various animal intestines from which they were isolated. When L. acidophilus was cultured with E. coli and Salmonella spp. in MRS broth, MRS broth containing 2% skim milk powder or modified tryptic soy broth at $37^{\circ}C$, L. acidophilus PF01 and CF07 inhibited the growths of E. coli K88 and K99, and S. enteritidis and S. typhimurium, respectively. Both of isolates were found to possess the essential characteristics of probiotic lactic acid bacteria for piglet and chicken.
Kim, Duk-Kyung;Seo, Sam-Youl;Lee, Eun-Young;Lee, Seul-Ki;Han, Jae-Yong
한국가금학회:학술대회논문집
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한국가금학회 2001년도 제18차 정기총회 및 학술발표 PROCEEDINGS
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pp.69-70
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2001
Lectins have great potential as to determine the alternation of the distribution of cell surface carbohydrates during cellular development and differentiation. Here, we investigated the presence and distribution of cell surface carbohydrates on chicken primordial germ cells (PGCs) during the migration and gonadal stages using a variety of lectins. A total of six FITC-labelled lectins from several specificity classes were used: ConA (glucose/mannose), WGA (N-acetylglucosamine), STA (N-acetylglucosamine), DBA (N-acetylgalactosamine/galactose), UEA-I (fucose) and PHA-E (oilgosaccharide). As a results, PGC-specific binding was observed in STA. PGCs of migration stage (2.5- and 5.5-day embyos) were STA-positive whereas PGCs of 10-day embryonic gonad were not. The results suggest that N-acetylglucosamine residuse are present specifically in migrating chicken PGCs and changes during development.
The effect of chicken IGF-I on protein synthesis of chicken embryo myoblasts cultured in serum-free medium was examined. When myoblasts were expanded to approximate 20-30% of well, the medium was changed to the serum-free medium including 0, 2, 20, 200 or 2000 ng/ml of recombinant chicken IGF-I. The culture medium including 10% fetal calf serum (FCS) was used as positive control. After 1 day of incubation, protein synthesis was measured by the incorporation of [$^3H$]-L-leucine. Thereafter cells were continued to incubate for further 18 hours, and the radioactivity in the protein was measured as an index of protein synthesis. The values for protein synthesis cultured in the serum-free medium without chicken IGF-I or with 2000 ng/ml of chicken IGF-I were the lowest. Protein synthesis was elevated with increasing chicken IGF-I concentration from 0 to 20 ng/ml. The values for protein synthesis in the 20 ng/ml and 200 ng/ml IGF-I groups were about half of that of the FCS group. The present study revealed that the potency of chicken IGF-I at the levels of 20 to 200 ng/ml to stimulate myoblast protein synthesis was about half of that of 10% FCS.
In order to study the marked variation of red blood cell sedimentation rate in some species of animals, the packed cell volume, volume percentage of erythrocytes in whole blood, was reshuffled of 20%, 40% and 60% using heteroplasma of chicken and goat, and the red blood cell sedimentation rate was measured in Westergren tubes at $27{\pm}1^{\circ}C$ and $8{\pm}1^{\circ}C$. The results obtained were summarized as follows: 1. The values of packed cell volume(PCV) of goat and chicken were $40.7{\pm}4.1%$ and $30.2{\pm}2.2%$ respectively. 2. The sedimentation rates of reshuffled red blood cell were settled faster at lower PCV than higher PCV, i.${\acute{e}}$. there was a reverse relationship between the sedimention rate and PCV. 3. Red blood cells of chicken settled quickly, where as those of goat settled very slowly. Chicken red blood cell sedimented rapidly even in goat plasma, and goat red blood cell sedimented slowly in chicken plasma. These findings indicate that the plasma is not the only factor determining the rapid red blood cell sedimentation rate of chicken. 4. The sedimentation rate of reshuffled red blood cell of chicken and goat were accelerated at higher temperature than lower temperature.
In mammals there are two distinct cellular units of the gastric glands which are responsible for the secretion of acid and pepsin respectively, namely, the parietal cells for acid and the peptic or chief cells for pepsin. On the other hand, the bird does net have separate parietal and chief cells in the glandular stomach. There exist only a single cell type in the asian gastric secretory-glands. In spite of this single cell type, however, variation in pepsin and acid secretion can he seen. Present study was conducted to know distribution, secretion and formation of the pepsinogen granules in chicken and rat stomach which observing by light and electron microscope. 1. In chicken, the pepsinogen granules are distributed in all submucosal gland cells and yet there are no distinction of parietal and chief cells. In rat, the pepsinogen granules are distributed in chief cells which lined the lower two-thirds of the gastric tubles and the parietal cells occupy upper third of the tuble. 2. Carbachol markedly stimulates the secretion of pepsinogen granules in chiken and rat, but Histamine is slightly. 3. After Histamine and Carbachol treatment, the pepsinogen granules are formated continuously and reaccmulated as control after 3 to 4 hours.
The immunogenetic analysis was performed to characterize the Korean native chickens (KNC) determined by monoclonal antibodies specific to chicken leukocyte differentiation antigens and flow cytometry. A total of 174 chickens including 58 KNC (black, brown and darkbrown colored), 77 foreign breed (Nagoya, White Reghorn, Rhode Island and Cornish) and 39 mixed breed (19 KNC with Nagoya and 20 KNC with Rhode Island) separately growing at Animal Science and Technology Institute were examined. The proportion of cells expressing MHC class II molecule (B-L in chicken) was significantly high in KNC. Proportion of CD4+ T helper cells was also higher in KNC and two mixed breed than that in foreign breed. However, proportion of CD8+ cells and TCR1 + (${\gamma}^{\delta}$ T cell receptor) cells was the lowest among the breed examined. Otherwise, those proportions were significantly high in White leghorn and two mixed breeds with two exclusive subpopulations. The two subpopulations were also typically shown in MHC class $II^+$ cells in KNC and one mixed breed, black-colored KNC with Nagoya. Although genotypic analysis was not pursued to characterize the immunogenetic properties of KNC, difference of phenotypic expression based on leukocyte differentiation molecules could be elucidated in KNC in this study.
The aim of this research was to estimate the effect of temperature and develop predictive models for the growth of total viable cells (TVC) and Escherichia coli (EC) on chicken breast under aerobic and various temperature conditions. The primary models were determined by Baranyi model. The secondary models for the specific growth rate (SGR) and lag time (LT), as a function of storage temperature, were developed by the polynomial model. The initial contamination level of chicken breasts was around 4.3 Log CFU/g of TVC and 1.0 Log CFU/g of E. coli. During 216 h of storage, SGR of TVC showed 0.05, 0.15, and 0.54 Log CFU/g/h at 5, 15, and $25^{\circ}C$. Also, the growth tendency of EC was similar to those of TVC. As storage temperature increased, the values of SGR of microorganisms increased dramatically and the values of LT decreased inversely. The predicted growth models with experimental data were evaluated by $B_f$, $A_f$, RMSE, and $R^2$. These values indicated that these developed models were reliable to express the growth of TVC and EC on chicken breasts. The temperature changes of distribution and showcase in markets might affect the growth of microorganisms and spoilage of chicken breast mainly.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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