To investigate the effects of chitosan on the redifferentiation of dedifferentiated chondrocytes, we used chondrocytes obtained from a micromass culture system. Micromass cultures of chick wing bud mesenchymal cells yielded differentiated chondrocytes, but these dedifferentiated during serial monolayer subculture. When the dedifferentiated chondrocytes were cultured on chitosan membranes they regained the phenotype of differentiated chondrocytes. Expression of protein kinase $C{\alpha}$ ($PKC{\alpha}$) increased during chondrogenesis, decreased during dedifferentiation, and increased again during redifferentiation. Treatment of the cultures with phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) inhibited redifferentiation and down-regulated $PKC{\alpha}$. In addition, the expression of p38 mitogen-activated protein (MAP) kinase increased during redifferentiation, and its inhibition suppressed redifferentiation. These findings establish a culture system for producing chondrocytes, point to a new role of chitosan in the redifferentiation of dedifferentiated chondrocytes, and show that $PKC{\alpha}$ and p38 MAP kinase activities are required for chondrocyte redifferentiation in this model system.
This study was conducted to determine the embryonic stages for the isolation of the highest number of PGCs and to improve PGCs enrichment method. The primordial germ cells(PGCs) from different sources of chick embryos were isolated. The embryonic stage having the highest number of PGCs from each sources was selected ; 1-day-old embryos for germinal crescent (stage 6-8), 2.5-day-old embryos for blood (stage 17-18) and 5.5-day-old embryos for gonad (stage 27-28). The number of PGCs from one embryonic germinal crescent, blood and gonad was about 87$\pm$1.8, 103$\pm$4.0, and 932$\pm$10.9, respectively. The viability of PGCs after Ficoll from each sources was similar, showing approximately 70%. the PGCs enrichment method was improved using Ficoll density gradient centrifugation. After this step the purity of PGCs from germinal crescent, blood, and gonad was 45$\pm$9.10%, 85$\pm$1.18%, and 86$\pm$0.19%, respectively. Also, PGCs were picked up by mouth pipette to improve the purity. This improved method for the separation of PGCs from different sources will serve as a useful too to preserve the foundation stocks of poultry and to produce germline chimeras.
45두의 브로일러 중 2두에서 배양과 직접 현미경 검사에 의해 폐 접합균증이 진단되었다. 폐의 병변부를 Sabouraud 배지에 접종하고 37$^{\circ}C$에서 배양하여 Absidia corymbifera가 분리되었다. 폐조직으로 squash표본을 만들어 직접 현미경 검사를 한 결과 폭이 넓고, 격벽이 없으며, 분지를 나타내는 접합균형 균사를 나타내었다. 감염된 폐조직의 PAS 염색 날인표본에서도 이와 비슷한 균요소가 발견되었다. 닭장의 흙과 닭똥으로부터 고농도의 A. corymbifera가 증명되었는데 이것은 이 브로일러균에서 환경이 감염원이었던 것을 제시하는 것으로 판단된다. 닭의 폐렴 감별진단에 있어서 접합균류도 고려할 것이 강력히 주장되었다.
Japanese encephalitis has been prevalent for long time in the Far East and many patients have been reported in both South East and Mid-West Asia recently. Recently, vaccine was used in prevention of this viral disease of man which was derived from formalin inactivated virus inoculated into mouse brain, but live attenuated active vaccine for human is not developed yet. Author inoculated Japanese encephalitis virus into several cell culture strains for development of live attenuated encephalitis virus strain and the results were as follows: 1. Japanese encephalitis virus was inactivated rapidly in cell free medium at $36^{\circ}C$ and totally inactivated by 72 hours. 2. In growth curve of Japanese encephalitis virus in HeLa cell cultures, maximal multiplication of the virus was occured at 4th day and virus multiplication was continued for at least 12 days. 3. After succeeding passage of the virus in HeLa cell cultures and human esophagus epithelial cell cultures, infectivity of virus for mice was disappeared from 2nd passage in HeLa cell cultures and 3rd passage in esophagus epithelial cell cultures. 4. In inoculation to monkey kidney epithelial cells and chick embryo cell cultures, infectivity of the virus for mice was continued after 10th passages.
Kim, J.H.;Cho, W.T.;Shin, I.S.;Yang, C.J.;Han, In K.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제10권3호
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pp.284-288
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1997
Purified diets containing five graded levels of tryptophan were fed to growing chicks to evaluate tryptophan requirements for growth and maintenance. A model was developed to separate tryptophan requirement for maintenance from requirement for growth. From this model, the daily tryptophan requirement for growth was 2.16 mg/g gain, and the daily requirement for maintenance 0.029 times metabolic body size ($Wg^{0.75}$). Based on nitrogen gain response, the tryptophan requirement for growth was 0.078 mg/mg N gain, and the daily maintenance requirement was 0.029 times metabolic body size. The total tryptophan requirements were 71.56 mg/day or 0.173% of the diet, 69.48 mg/day or 0.168% of the diet based on the weight gain response and nitrogen gain response, respectively. Previous tryptophan requirements for growing chicks aging 1-28 days are in close agreement with these estimates. Based on the relationship of weight gain and N gain, about 1.25% of the retained CP was consisted of tryptophan; the previously reported value of tryptophan content of chick muscle CP was 1.03%.
The chicken Mx gene has been regarded as a candidate gene for resistance to avian influenza virus (AIV). In this study, three groups of chickens with homozygotes (AA, GG) and heterozygotes (AG) of the resistant (A) and susceptible alleles (G) to AIV of the Mx gene were constructed from a line of dwarf egg-type chickens. These chickens were not examined for their resistant activities to AIV because the differential resistance had only been detected in vitro. The birds of the three groups were vaccinated with inactivated H5N2 AIV vaccine and the level of hemagglutination inhibition (HI) antibody to AIV was detected. The association between disease resistant activity to AIV and antibody response to AIV vaccination in the three groups was analyzed. The chickens with homozygous resistant allele A showed the lowest antibody levels, whereas the heterozygous chickens (AG) presented the highest antibody level after the boosting vaccination, which indicates that the efficiency of artificial selection on the resistant allele of Mx gene will be compromised since the homozygotes of the allele presented the weakest antibody response to the corresponding vaccine.
Inhibition of cyclooxygenase(COX), and thus prevention of the formation of prostaglandins, provided a unifying explanation of the therapeutic and toxic actions of nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs). Recently, the discovery of the two isoforms of COX was made by molecular biologists studying neoplastic transformation in chick embryo cells. The constitutive enzyme, COX-1, is obviously responsible for the production of prostaglandins involved in housekeeping functions such as maintenance of integrity of the gastric mucosa, renal blood flow and platelet aggregation. The inducible form of COX (COX-2) is responsible for the formation of prostaglandins that pathologically affects inflammation, pain and fever. Clearly, all the experimental and clinical data support the hypothesis that the beneficial effects of NSAIDs are due to inhibition of the COX-2 enzyme, whereas the gastrotoxicity is due to inhibition of COX-1. The cox-2/COX-1 ratios of the NSAIDs in common use have been measured and compared with epidemiological data on their side effects. There is little evidence to suggest that one NSAID is clearly more effective than another, But substantial individual variability is present with respect to the pharmacology and pharmacokinetics of these drugs: therefore it is essential to adjust the dosage and choose specific drug to the patient's response.
In Experiment 1, when fasted chicks were fed diets containing various sources of protein for 3 days, the activities of lipogenic enzymes (acetyl-CoA carboxylase, fatty acid synthetase, citrate cleavage enzyme and malic enzyme) in the liver of growing chicks were significantly lower in the soybean protein or gluten diet than in the casein or fish protein diet. Triglycride contents of the liver and plasma of chicks fed the casein or fish protein diet were significantly lower than that of those fed soybean protein or gluten diet. In Experiment 2, the effects of dietary amino acid mixture simulating casein or protein on the activities of hepatic lipogenic enzymes were examined. The activities of acetyl-CoA carboxylase and fatty acid synthetase in the liver of chicks fed the casein diet were significantly higher than that of those fed the soybean protein diet or two diets of amino acid mixtures. Furthermore, there were no significant differences between the two diets of amino acid mixture based on casein or soybean protein. However, the activities of malic enzyme and citrate cleavage enzyme tended to be lower in the soybean-type amino acid diet than in the casein-type amino acid diet. Thus, some effects can be ascribed to the protein itself and some to the amino acid composition of the protein sources.
세포증식에 관한 개체발생의 일주리듬을 검토하기 위하여 부화직후의 병아리 간장 DNA 합성 리듬 및 간 세포증식의 개체발생에 대해서 검토한 결과 포유류에 있어서 DNA 합성 리듬은 이유기 후기에 출현하는데 비하여 조류(병아리)에 있어서 DNA합성 리듬은 부화 12시간후 바로 출현하였고 간장의 DNA 합성 리듬은 사료섭취에 의해 리듬주기가 유지되었다. 한편 DNA 합성 활성은 절식에 의해 감소되었으며 DNA 합성의 리듬변화는 사료섭취에 의해서도 변화하였지만 빛의 조건에 의해서도 많은 영향을 받았다. 이러한 간 DNA 합성은 12시간 늦은 위상에서 유사분열도 동반하였다.
Chick embryos from stage 14 to stage 31 were studied by means of serial section and light microscopy in order to learn the relationship between the settlement sites of the primordial germ cells (PGCs) and the forming genital ridge. The results showed that: when embryo hatched for 53-56 h, the PGCs reached the coelomic epithelial tissue where gonad would be formed, meanwhile the epithelial tissue began thicker before the PGCs reached. Before stage 19, the final region the PGCs arrived was the thickened portion of the coelomic epithelium, the glycogen in the PGCs cytoplasm maintenance remained unchanged. However at the 3.5-5th hatching day, the glycogen in the PGCs cytoplasm reduced gradually. On the 6th hatching day, the gonad of the embryo appeared the feature of ovary, and the glycogen in the PGCs cytoplasm reduced further. On the 7th hatching day, the differentiation of ovary or testis was obvious and the glycogen in the PGCs cytoplasm later disappeared.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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